医学微生物实验本科实验三细菌致病性及病原性球菌

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1、医学微生物学实验三主要内容：上次实验结果观察细菌生化反应结果分析细菌的致病作用病原性球菌形态及培养特性上次实验结果观察平板划线分离及菌落观察菌落形态观察：菌落的色泽、大小;表面光滑或粗糙、边缘整齐否;隆起度、透明度等不同形态菌落代表不同的细菌斜面移种法及色素观察观察细菌在斜面上所形成的菌苔。绿脓杆菌产生水溶性色素，使整个培养基变绿。金葡菌产生脂溶性色素，培养基不变色。细菌生化反应结果分析H2S产生试验（史氏痢菌、乙型副伤寒）硫酸亚铁半固体乙型副伤寒黑色沉淀物细菌生化反应结果分析葡萄糖发酵试验乙型副伤寒（产酸产气）培养基红→黄色，有气泡史氏痢菌（产酸不产气）培养基

2、红→黄色，无气泡细菌生化反应结果分析吲哚试验（史氏痢菌、乙型副伤寒）蛋白胨水史氏痢菌吲哚试剂玫瑰吲哚细菌的致病作用细菌的毒力物质1、侵袭力菌体结构侵袭性物质2、毒素内毒素外毒素细菌的侵袭力的构成1、菌体表面结构荚膜微荚膜及糖萼菌毛或非菌毛粘附素2、侵袭性物质侵袭性蛋白及侵袭性酶类细菌所产生的毒素1、外毒素：主要由G+菌产生的能分泌到菌体外的具有毒性的蛋白质。2、内毒素：G-菌细胞壁脂多糖成份，菌体裂解后释放出。内毒素与外毒素的比较种类内毒素外毒素来源革兰阴性菌革兰阳性菌部及分革兰阴性菌存在部位细胞壁成分、细菌裂解释出活菌分泌或细菌溶解散出化学成分脂多糖蛋白质稳定性

3、好、160℃2-4h破坏差、60-80℃30min破坏毒性作用弱、各种内毒素作用大致相同，引起休克，发热，DIC等强、对机体组织器官有选择性，引起特殊临床表现抗原性弱，能刺激机体形成抗体，但无中和作用。甲醛处理后不能形成类毒素强，能刺激机体形成抗毒素，经甲醛脱毒后能形成类毒素细菌致病作用的实验内容肺炎球菌荚膜观察血浆凝固酶实验内毒素发热反应外毒素的毒性作用试管法玻片法肺炎球菌荚膜的观察荚膜的致病作用抗吞噬作用粘附作用抗有害物质损伤作用血浆凝固酶是致病性葡萄球菌产生的一种侵袭性物质具有抗吞噬作用及血清中杀菌物质对细菌的杀灭作用使感染局灶化。血浆凝固酶的种类及检测方法

4、游离血浆凝固酶——试管法检测结合血浆凝固酶——玻片法检测内毒素的发热试验试验动物：家兔(正常体温范围38.5-39.5℃)菌液：加热杀死的伤寒杆菌培养液结果观察：注射前后体温的变化注意事项：体温计使用内毒素检测方法——鲎试验试剂：鲎试剂内毒素、生理盐水试验结果观察：鲎试验(+)：出现凝固外毒素的毒性作用实验试剂：破伤风杆菌培养物破伤风抗毒素实验动物：小白鼠试验结果观察：细菌培养物→小鼠强直性痉挛病原性球菌常见病原性球菌的种类革兰阳性球菌葡萄球菌链球菌肺炎球菌革兰阴性球菌淋球菌脑膜炎球菌病原性球菌的生物学特点镜下培养毒力及鉴别实验葡萄球菌G+葡萄色素血浆凝固酶串样完

5、全溶血链球菌G+链状甲链不完全溶血条件致病菌乙链完全溶血致病菌丙链不溶血不致病肺炎球菌G+成双不完全溶血胆汁溶菌试验胞外、荚膜镜下培养毒力及鉴别实验脑膜炎G-成双巧克力平板球菌胞内CO2淋球菌G-成双巧克力平板胞内CO2细菌检测及鉴定常用方法镜检（G+球菌）培养（G+球菌）生化反应（G-杆菌）血清学诊断动物实验核酸诊断等快速诊断病原性球菌实验内容病原性球菌的形态观察葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌病原性球菌的培养特性普通平板菌落形态的观察血平板上溶血特性的观察金黄色葡萄球菌血平板乙型溶血性链球菌血平板