实验六酵母菌死活细胞鉴别

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时间:2019-07-24

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1、实验六酵母菌细胞的形态观察、死活细胞的鉴别一、目的和要求1.观察酵母菌的出芽繁殖方式,学习区分酵母菌死活细胞的实验方法。2.掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。二、基本原理1.形态观察:酵母菌是不运动的单细胞真核微生物,通常比常见细胞大几倍甚至十几倍。大多数酵母菌以出芽方式进行无性繁殖,有的分裂繁殖;有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。2.死活鉴定:美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型呈无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此,具有还原能力

2、的酵母活细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则成蓝色或淡蓝色。啤酒酵母酵母出芽酵母菌出芽繁殖及芽体三、器材1、染液:吕氏碱性美蓝染液2、菌种:酿酒酵母的斜面培养物3、仪器和其他用具:显微镜、载玻片、盖玻片等四、操作步骤1、美蓝浸片的观察:1)在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色液,然后按无菌操作用接种环挑取少量少量酵母菌苔放在染液中,混合均匀。染液不宜过多或过少,否则在盖上盖玻片时菌液会溢出或出现大量气泡而影响观察。2)用镊子取一块盖玻片,先将一边与菌液接触,然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上。盖玻片不宜平放着放下,以免产生气泡

3、影响观察。3)将制片放置约3min后镜检,先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况,并据颜色来区别死活细胞。4)染色约0.5h后再次进行观察,注意死活细胞数量是否增加。5)用0.05%吕氏碱性美蓝染液重复上述操作。2、水-碘液浸片的观察在载玻片中央加一小滴革兰氏染色用碘液,然后在其上加三滴水,取少量酵母菌苔放在水-碘液中混匀,盖上盖玻片镜检。五、实验报告1、绘图说明所观察的酵母菌的形态特征。酵母死活细胞的对比六、思考题(1)吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同,对酵母菌死细胞数量有何影响?试分析其原因。(2)在显微镜下,酵母菌有哪些突出的

4、特征区别于一般细菌?

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