枯草芽孢杆菌发酵培养基的优化_张丽霞

枯草芽孢杆菌发酵培养基的优化_张丽霞

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1、DOI:10.16409/j.cnki.2095-039x.2006.s1.01922(增刊)82-88中国生物防治ChineseJournalofBiologicalControl2006年10月枯草芽孢杆菌发酵培养基的优化1,212*2张丽霞,李荣禧,王琦,梅汝鸿(1.内蒙古农业大学农学院,呼和浩特010018;2.中国农业大学植物病理学系,北京100094)摘要:在摇瓶发酵条件下,采用Plackett-Burman设计法和响应面分析法对枯草芽孢杆菌B908菌株的培养基配方进行优化,确定了影响B908菌株发酵液含菌量的3个重要因子依次为玉米粉、碳酸钙和豆饼粉;对这3个

2、因子进行爬坡路径试验,通过响应面分析法确定了主要影响因9子的最佳条件。优化后的培养基配方使摇瓶发酵液每毫升的含菌量从0.6×10个/ml提高到101.18×10个/ml。关键词:枯草芽孢杆菌;发酵培养基;Plackett-Burman;响应面分析法中图分类号:S476.11文献标识码:A文章编号:1005-9261(2006)增刊-0082-07OptimizationofBacillussubtilisB908FermentationMediumZHANGLi-xia,LIRong-xi,WANGQi,MEIRu-hong(DepartmentofAgronomy,In

3、nerMongoliaAgriculturalUniversity,InnerMongolia010018,China)Abstract:Plackett-BurmandesignandresponsesurfaceanalysiswereusedtooptimizethefermentationmediumofBacillussubtilisB908.BasedontheresultsofPlackett-Burmandesign,importantfactorsaf-fectingtheyieldofBacillussubtilisB908werecornflour,

4、beanflourandCaCO3.Then,thethreefactorswerefurtheroptimizedusingresponsesurfaceanalysis.Theoptimizedfermentationmediumallowedthe9-110-1productiontobeincreasedfrom6.6×10sporesmlto1.18×10sporesml.Keywords:Bacillussubtilis;fermentationmedium;Plackett-Burman;responsesurfaceanalysis枯草芽孢杆菌(Bacil

5、lussubtilis)B908是中国农业大学植物病害生物防治研究室从水稻根际土壤中分离获得的有益菌株,对水稻纹枯病、棉花枯萎病、小麦赤霉病等多种植物病害有明[1]显的防治效果,应用前景广阔。该芽孢杆菌已经制成制剂而应用于农业生产。制剂中的芽孢含量是影响制剂应用效果的关键因素。本研究通过优化发酵培养基配方,提高发酵液中芽孢含量,降低生产成本,提高制剂的生防效果。目前,生产上枯草芽孢杆菌的发酵培养基配方的主要成分有玉米粉、葡萄糖、豆饼粉、鱼粉以及其它一些微量元素。但由于配比的不合适使得发酵液含菌量不高。发酵培养基的成分对[2]微生物发酵液含菌量有很大的影响。调整培养基中各物

6、质的配比,可以改善细菌的生长条收稿日期:2006-04-25基金项目:国家863科技攻关项目作者简介:张丽霞(1979-),女,硕士;*通讯作者,博导,电话:010-62731460,E-mail:wangqi@cau.edu.cn。82增刊张丽霞等:枯草芽孢杆菌发酵培养基的优化件,提高发酵液含菌量。本研究针对应用于生产上的一种发酵培养基作为初始发酵培养基,采用Plackett-Bruman设计与响应面分析方法(RSA)相结合的试验统计方法进行优化,确定了该培养基中影响B908发酵液含菌量的主要因子及其最佳配比:玉米粉(13.0g/L)、CaCO3(7.0g/L)和豆饼粉

7、(20.5g/L),使B908菌株的发酵液含菌量提高。1材料与方法1.1供试菌株枯草芽孢杆菌B908,从水稻根际土壤中分离获得,由中国农业大学植物病理学系植物病害生物防治研究室提供。1.2培养基[3]液体种子培养基:肉汁胨培养基。初始发酵培养基:玉米粉10g,葡萄糖5g,豆饼粉15g,鱼粉5g,CaCO35g,(NH4)2SO41g,K2HPO40.3g,MgSO4·7H2O0.2g,MnSO4·H2O0.2g,水1000ml。1.3培养基配方的优化方案设计[4]1.3.1Plackett-Burman设计法筛选培养基中影响发

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