《高效液相色谱分析》ppt课件

《《高效液相色谱分析》ppt课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第9章高效液相色谱分析Highperformanceliquidchromatography(HPLC)第一节概述GC只适合分析较易挥发、且化学性质稳定的有机化合物，而HPLC则适合于分析那些用GC难以分析的物质。HPLC的应用范围远远超过GC。高效液相色谱法是继气相色谱之后，20世纪70年代初期发展起来的一种以液体做流动相的新色谱技术。1.高效液相色谱法定义指一种用液体为流动相的色谱分离分析方法。它在经典色谱理论的基础上，采用了高压泵、化学键合固定相高效分离柱、高灵敏专用检测器等新实验技术建立的一种液相色谱分析法。

2、高压：150-350×105Pa高效：大于3万塔板/米（GC：103塔板/米）高灵敏：10-9g（紫外检测）、10-11g（荧光检测）2.高效液相色谱法与经典液相色谱法的比较经典液相色谱法高效液相色谱法粒径(μm)75-6003-50（常用5-10）柱前压力(atm)0.01-1.020-300分析时间(h)1-200.05-1.0色谱柱长度(cm)50-2002-30柱效(块/m)2-50104-105样品用量(g)1-1010-6-10-2经典液相色谱法，流动相在常压下输送，分析周期长。高效液相色谱法流动相改为高

3、压输送（最高输送压力可达3.5107Pa）色谱柱是用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱；柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。因此，高效液相色谱具有分析速度快、分离效能高、自动化等特点。所以称它为高压、高速、高效液相色谱法。3.HPLC在药物分析中的作用药品质量标准在药物分析中，HPLC已成为对各类药物及其制剂进行鉴别、检查、杂质分离及含量测定的重要手段，以下以中国药典和美国药典为代表说明HPLC在药品质量标准中的作用。中国药典含量主要测定方法统计/%版本滴定分析法质量分析法分光光度法

4、HPLCGC1953年版68.811.90001963年版68.211.36.93001977年版61.83.8922.3001985年版57.82.6428.01.170.291990年版52.12.2926.36.090.441995年版51.81.4228.98.010.572000年版47.61.228.017.80.6美国药典含量测定方法比较（品种数）版本HPLCGCTLCUVIRFLAASNMRTI20版62682546921107221版363142698131727222版87115715542171

5、776578423版1188100449015578280324版138611113741414962775AtomicAbsorptionSpectroscopy原子吸收光谱NuclearMagneticResonance核磁共振Infraredray红外光谱Fluorescencespectrum荧光光谱TI滴定分析法药物分析研究方法以我国分析试验室杂志中的药物分析综述统计分析见表1992~2000年分析试验室杂志药物分析论文统计/%方法19921994199619982000UV27.727.128.517.6

6、16.2HPLC27.029.239.244.540.0GC12.810.37.69.78.0TLC13.416.612.216.121.4HPCE3.25.6电化学8.54.72.5其他10.611.410.09.08.8论文总数553923760870879HPCE高效毛细管电泳法3.高效液相色谱法与其他分离方法的比较项目分馏结晶提取经典柱色谱TLCGCHPLC分离效率低低低低高高高分离速度慢慢慢慢较快快快应用范围窄窄广广广较窄广样品用量多多多多少少少可否用于制备可可可可尚可可可可否用于痕量分析否否否否可可可分析

7、鉴定可可否否可可可分析灵敏度低低--高高高4.应用非挥发性和热不稳定组分的分析，在工业、科学研究，尤其是在生物学和医学等方面应用极为广泛。如氨基酸、蛋白质、核酸、烃、碳水化合物、药品、多糖、高聚物、农药、抗生素、胆固醇、金属有机物等分析。1.化学键合固定相:目前应用最广、性能最佳的固定相a.硅氧碳键型：≡Si—O—Cb.硅氧硅碳键型：≡Si—O—Si—C稳定，耐水、耐光、耐有机溶剂，应用最广；c.硅碳键型：≡Si—Cd.硅氮键型：≡Si—N第三节HPLC的固定相和流动相一.固定相使用条件为控制样品在分析过程的解离，常

8、用缓冲液控制流动相的pH值，但需要注意的是，C18和C8使用的pH值通常为2.5~7.5（2~8）。太高的pH值会使硅胶溶解，太低的pH值会使键合的烷基脱落。化学键合固定相的特点（1）传质快，表面无深凹陷，比一般液体固定相传质快；（2）寿命长，化学键合，无固定液流失，耐流动相冲击；耐水、耐光、耐有机溶剂，稳定；（4）选择性好，可键合不同官能团，