鼠疫病原学及鼠疫实验室管理和运行ppt课件

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1、鼠疫病原学及鼠疫实验室管理和运行新疆疾病预防控制中心鼠疫病原学一、鼠疫菌的生物学特性（一）形态和染色：典型的鼠疫菌呈短而粗，中段膨大，两端钝圆，且两极浓染的卵圆形小杆菌,菌体长约1～2μm，宽0.5～0.7μm。有荚膜，无鞭毛，无芽胞。革兰氏染色阴性。由于涂片材料来源不同，形态特点亦不同。用染疫动物或鼠疫患者及其尸体的新鲜材料所做涂片，一般可见到典型菌体形态，常散在，或成双排列，或呈群聚，偶见有短链状排列。用琼脂培养物制备的涂片标本，鼠疫杆菌呈球杆状，着色比较均匀，两极浓染不明显或无两极浓染。用肉汤培养物涂片，可见

2、呈散在或者短链状排列的两端钝圆，两极浓染的小杆菌。鼠疫菌在跳蚤消化道内的形态常发生变化，常呈近似球状的卵圆形的球杆菌，有时也呈现两端浓染。陈旧性病灶、腐败材料或在外界环境中生长的鼠疫菌可有多形性变化，这一特性应在镜检过程中应引起足够的注意。（二）培养特性：鼠疫菌为典型的异养菌，生长时需要多种有机物作为营养物质，不过普通培养基就能满足鼠疫菌的生长。鼠疫菌为需氧菌，也能在厌氧条件下生长，但适量供氧生长最好，氧压过高反而对生长有害。在厌氧环境生长时，发育缓慢且常出现变形。鼠疫菌最适生长温度为28～30℃，在此温度下培育的

3、菌落表面干燥，易于用白金耳从培养基表面刮取，也较容易均匀地悬浮在生理盐水中。在37℃条件下生长缓慢，培养出的菌落表面湿润、粘稠，不易刮取，不易制成均匀菌悬液。培养基的最适pH值为6.9～7.1，但是pH值在5.8～8.0范围内鼠疫菌均可发育。鼠疫菌虽然在普通培养基上生长良好，但是发育缓慢，一般需要24～48小时才能形成肉眼可见的灰白色小菌落，如果培养基质量差或者接种菌量过少，发育至成熟菌落的时间将会更长。鼠疫菌在普通培养基上的发育，其群体形态具有一定的稳定性，在最适温度条件下在普通培养基上经16～18小时培养可见形

4、状不一，呈碎玻璃样小菌落，24～48小时后形成肉眼可见灰白色小菌落。在显微镜下，成熟的菌落中心发暗、突起，有黄褐色粗糙颗粒，菌落周边围绕一圈宽窄不等、边缘不整、薄而透明的锯齿状花边。鼠疫菌的这一发育过程及成熟菌落的形态特点，是细菌学诊断的重要依据。二、鼠疫检验材料的采集、保存和运输（一）鼠疫检验材料的采集：1.人体标本材料的采集：凡疑似鼠疫患者，应争取在服用抗菌药物前采取被检材料标本，各型鼠疫患者除采静脉血液3～5ml供细菌学及血清学检验用外，可按临床类型采取以下检验材料标本.1.1疑似鼠疫患者和密切接者的取材：（

5、1）疑似腺鼠疫患者：①选取肿大淋巴结，局部皮肤经碘酒、酒精消毒后用注射器刺入腺体中央，抽取适量组织液，保存于灭菌试管中或直接培养在斜面或平板上；②如腺肿过小取组织液困难，可用无菌注射器抽取0.3～0.5ml灭菌生理盐水注入腺肿内，停留片刻后，再缓慢抽取液体；③如腺肿开放或有波动感，应在腺肿周围浸润部位穿刺抽取组织渗出液。（2）疑似肺鼠疫患者:①疑似鼠疫患者如有咳痰时，应用无菌试管、平皿或广口瓶收集痰液；②患者无痰时用无菌棉签取咽喉分泌物装入无菌试管内送检。（3）疑似败血型鼠疫患者:该型患者除采静脉血1ml以上保存于

6、无菌试管送检外，还应采集咽喉分泌物进行检验。1.2密切接触者取材:一般采用灭菌棉签自咽喉部取材检查，同时可采取淋巴穿刺液。1.3疑似鼠疫尸体的取材:经流行病学调查和临床检查，不能排除鼠疫的尸体应以细菌学检查作为最后诊断，取材方法以解剖取材为主，不能解剖取材的可行局部解剖取材或穿刺取材。取材时注意以下事项：（1）取材前应准备好取材的所有器械、试剂和容器等，如剪刀、镊子、手术刀、骨钳、穿刺针、注射器、生理盐水、酒精、灭菌广口瓶、试管等。以及消毒处理、个人防护的器械和药品等；（2）取材应选取病变损害最明显的部分采集。肝、

7、脾、肺分别置于灭菌广口瓶中，心血置于灭菌试管中；取口腔和鼻腔分泌物于灭菌试管中；若尸体已腐败，可取股骨、胫骨、胸骨、肋骨骨髓。（3）如不能进行尸体解剖时，可行局部取材。可在尸体的肝、脾、肺相应部位做局部小切口，采集相应的组织材料；（4）对鼠疫尸体在不能进行解剖取材时，也可行穿刺取材。方法是将要行取材的淋巴腺、肝、脾、肺、心等脏器组织部位皮肤经局部70%酒精消毒后，用腰椎穿刺针抽取淋巴腺、肝、脾、肺、心等脏器组织液和心血，分别保存备检。若尸体腐败时，则应从胸骨柄或髂骨抽取骨髓液送检。2动物标本材料的采集:动物标本材料

8、取材前必须做详细登记，主要记录动物名称、捕获地点、捕获时间、捕获数量和采集者等信息数据。取材时可根据标本的类型采取相应的方法。2.1病、死动物的取材:病、死动物标本取材的原则是按先皮下、后胸腔、最后腹腔的顺序进行取材，并在取材时观察皮下淋巴结及各脏器的病理变化。取材注意以下事项：（1）用3%来苏尔液消毒解剖部位的皮毛，但不宜过湿，以免来苏尔液进入体内，影响检