基于单碱基延伸和酶放大系统的SNP漏声表面波生物传感器的实验研究

《基于单碱基延伸和酶放大系统的SNP漏声表面波生物传感器的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、基于“单碱基延伸和酶放大系统”的SNP漏声表面波生物传感器的实验研究唱凯，陈伟，张泉，徐泽刚，靳晓军，张可珺，王云霞，王丰，陈鸣（第三军医大学大坪医院野战外科研究所检验科，重庆400042）摘要:目的　探讨漏声表面波生物传感器检测单核苷酸多态性（SNP）的方法。方法　分别在漏声表面波生物传感器反应体系加入2条仅存在一个碱基不同（A/G）的靶序列，与固定的探针杂交。利用酶生物信号放大系统，结合单碱基延伸技术，观察其杂交信号的改变。结果　靶位点为完全匹配的A时，相位下降（6.47±0.42）°；而靶位点为错配的G时，相位下降仅为（0.77±0.25

2、）°，两者差异有统计学意义(P＜0.01)。结论　成功建立了漏声表面波生物传感器检测SNP的新方法。关键词：漏声表面波生物传感器；信号放大；SNP中图法分类号：文献标识码：AStudyofSNPLeakySurfaceAcousticWaveBiosensorDetectiononSingleBaseExtensionandEnzymeAmplificationSystemCHANGKai,CHENWei,ZHANGQuan,XUZe-gang,JIXiao-jun,ZHANGKe-jun,WANGYun-xia,CHENMing(Depart

3、mentofClinicalLaboratoryMedicine,ThirdAffiliatedHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400042,China)Abstract:ObjectiveToexploreamethodforsinglenucleotidepolymorphism(SNP)detectionusingleakysurfaceacousticwave(LSAW)biosensor.MethodsTwotargersequenceswhichexistjuston

4、ebasedifference(A/G)wereaddedontheLSAWbiosensorreactionsystem,andwerehybridizedwithcorrespondingprobes.Combiningenzymesignalamplificationsystemandsinglebaseextension(SBE)technology,changesofthehybridizationsignalwereobserved.ResultsPhasedecreased（6.47±0.42）degreewhenthetarge

5、rpointwasmatchedA.Whilephasedecreased（0.77±0.25）degreewithmismatchedG.Phasechangewassignificantlydifferent(P＜0.01).ConclusionAnewmethodforSNPdetectionwithLSAWbiosensorwassuccessfullyestablished.Keywords:LSAWbiosensor;signalamplification;singlenucleotidepolymorphism单核苷酸多态性(si

6、nglenucleotidepolymorphism，SNP)作为基因变异的主要形式，以其数量多、分布广和稳定遗传等特点，在生物医学、遗传学、基因突变与疾病易感基因筛查、药物敏感性基金项目：国家高技术研究发展计划（863计划，2007AA02Z416）；国家自然科学基金（30400107）；军队十一五科技攻关项目（06G073）SupportedbytheNationalHighTechnologyResearchDevelopmentProgramofChina(863Program,2007AA02Z416),theNationalNatu

7、ralSeienceFoundationOfChina(30400107)andtheEleventhFive-yearmilitaryscienceandtechnologyproject(06G073)作者简介：唱凯，男，黑龙江佳木斯人，主要从事生物传感器方面的研究。E-mail：changkai111111@163.com通信作者:陈鸣，电话：（023）68757602，E-mail：chenming1971@yahoo.cn收稿日期：2009-07-17；修回日期：2009-09-10研究以及人群进化史研究和作物品种鉴定等方面中发挥着重

8、要的作用[1-3]。但由于缺乏简单有效快速低廉的临床检测手段，SNP的研究还停留在实验室阶段。生物传感器[4]是将生物活性材料(酶、蛋白质、DNA、抗