兔病毒性出血症鸡源高免蛋黄抗体的研究与应用

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1、兔病毒性出血症鸡源高免蛋黄抗体的研究与应用﹡王孝友1徐刚3何洪章2孔路军1曾秀1黄伟3（1.重庆市养猪科学研究院2.重庆市永健生物技术有限责任公司3.西南农业大学荣昌校区重庆荣昌402460）摘要：用兔病毒性出血症抗原免疫产蛋鸡，收集高免蛋，精制蛋黄抗体（IgY），采用血凝抑制试验（HI）测定IgY的最高滴度为15log2。通过IgY的被动免疫保护试验证实，IgY滴度稀释至13log2时肌肉注射体重2Kg-2.5Kg的健康非免家兔5.0ml/只，可抵抗兔病毒性出血症强毒RC株1.0ml(血凝价HA为9log2)的攻击。临床应用效果显示:IgY（HI为13

2、l0g2）对发病兔进行紧急防治，治愈率为84.38%—92.86%，能迅速控制疫情。关键词：兔病毒性出血症；蛋黄抗体ResearchandAppalicationofRabbitHaemorrhagicDiseasevirusHigh-leverImmunizedyolkAntibody﹡WANGXiao-you1,XUGang3,HEHong-zhang2,KONGLu-jun1,ZENGXiu1,HUANGWei3(1ChongqingSwineScienceAcademy,2Chongqinghealth-foreverbiotechnologyl

3、imited-liabilitycompany,3South-westAgricultureUniversity,ChongqingRongchang402460,China)Abstract:Aflowfull-grownhenswereimmunizedwithinactivatedrabbithaemorrhagicdiseasevirus(RHDV).Afteraboostingprocesseggswerecollectedandusedtoextractthespecialyolkantibody(IgY).Themaximumtiterof

4、thispreparationreached15log2byhemagglutinationinhibitionassay(HI).ItwasconfirmedthroughpassiveimmunizationofIgYthathealthynonimmunizedrabbitswhoseweightvariedduring2Kgand2.5KgwereintramuscularinjectedwithIgY5.0ml(HI=13log2),theycouldresisttheattactof1.0ml（HA=9log2）RHDV-RC.Theclin

5、icalapplicationeffectofIgY(HI=13log2)showedthecureratewas84.38to92.86percenttodiseasedrabbitsandtheycouldcontroltheepidemicsituationimmediately.Keywords:rabbithaemorrhagicdiseasevirus;yolkantibody4兔病毒性出血症(Rabbithaemorrhagicdiseasevirus，简称RHD)是1984年在我国江苏扬州首次发现[1]。它是由病毒引起的兔的一种急性、热性

6、、败血性、高度致死性传染病。其特点是潜伏期短、发病快、死亡率高、流行范围广、造成的损失巨大。该病在全国各地均有流行，在国外，如意大利、德国、捷克、西班牙、日本、北美等都有本病的流行。扬州大学首先研制成功RHD组织灭活疫苗，对预防RHD起到了积极的作用，并一直沿用至今，基本控制了本病大规模的流行爆发。仅管如此，我国仍有一些地区（特别是边远山区）在免疫过RHD疫苗以后又发生本病的情况，尤其是仔兔较多，而目前治疗本病尚无特效药，因此我们研制RHDIgY旨在为临床发病兔提供特效药，对发病兔先注射RHDIgY进行治﹡通讯作者，E-mail：wangxiaoyou@

7、163.com疗，待疫情控制后再注射RHD疫苗，以期能达到有效控制本病的目的，最大限度地减少RHD造成的经济损失。现将我们的研究结果报道于下。1材料与方法1.1兔病毒性出血症病毒(RHDV)RC株：自荣昌县发病兔场分离，HA滴度为9log2，注射1.5-2.0Kg的健康家兔1.0ml，家兔于24-72小时死亡。人“O”型红细胞：由荣昌县血站慧赠，用灭菌生理盐水于4000rpm洗涤3-5次，配制成1%的“O”型红细胞悬液。氯仿（化学纯）：重庆化学试剂厂。家兔（体重1.5-2.5Kg，非RHD疫苗免疫）：购自本地边远山区，经HI试验检测，抗RHDV血清抗体为

8、阴性。产蛋鸡：伊沙蛋鸡，本地养殖户提供。1.2抗原制备将RHDVRC株接种非免家