猪繁殖与呼吸综合征的elisa抗体检测结果分析与应用

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1、万方数据·178·疾病防治中国畜牧兽医2012年第39卷第1期猪繁殖与呼吸综合征的ELISA抗体检测结果分析与应用李剑秋1,赵灵燕2,周彩琴2,吴赞兹2,吴雪军2,倪柏锋2,徐辉2(1.浙江工商大学杭州商学院,浙江杭州310035;2.浙江省动物疫病预防控制中心,浙江杭州310020)摘要:本研究应用ELISA方法共检测25个猪场26个猪群507份血清的PRRS抗体水平,应用统计学方法分析各猪群的检测数据,结合猪群临床表现和病原污染情况的流行病学调查结果,可将猪群分为无PRRSV污染,l临床健康;PRRS病毒污染,临床稳定;PRRS病毒

2、污染,临床发病且控制困难等3种流行模式,并提出了应用猪群PRRSELISA检测值标准差、个体检测极值及盒须图(Box-and—WhiskerPlot)进行分类的具体指标和PRRS分类控制的建议。关键词:PRRSV;抗体检测;流行模式;数据分析中图分类号:$855.3文献标识码:A文章编号:1671—7236(2012)01—0178—03猪繁殖与呼吸综合征(porcinereproductiveandrespiratorysyndrome,PRRS)由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcinereproductiveandrespirato

3、rysyndromevirus,PRRSV)引起猪的一种高度接触性传染病,俗称“猪蓝耳病”,临床上以妊娠母猪繁殖障碍、流产、死胎、木乃伊胎、弱胎为主要特征,各种年龄猪特别是仔猪以间质性肺炎等呼吸道疾病为特征。本病于20世纪80年代首发于美国,1990年6月在欧洲出现,中国于1995年发生该病。PRRSV可分为2个型,即欧洲型和美洲型,中国流行的毒株为美洲型,几乎所有省份都有PRRS的发生与流行,给中国养猪业造成了极大损失。2006年,该病在中国20多个省、市、自治区发生流行,造成极大的损失。猪场感染PRRSV后,临床上多以持续高热,体温

4、40度以上,呼吸困难、共济失调和死亡为特征的“高热病”出现,混合感染比例高。研究结果表明。中国PRRSV病毒污染面广、感染猪场呈持续性感染和猪群体液免疫保护不完全的特点,加上该病毒特有的抗体依赖性增强作用(ADE)的存在(刘辉等,2009;屈雪琪等,2010),单纯以抗体检测来直接判断猪群对PRRSV的抵抗力,对猪群发病风险进行预警变得十分困难。必须根据猪群抗体分布、日龄、疫苗免疫、带毒状况和临床稳定性等情况进行综合分析,才能更有效地判断猪群发生PRRS的风险,及修回日期:2011-06-27作者筒介:李剑秋(1964一),女,浙江人.

5、剐教授.研究方向:应用数学.叠信作者:徐辉(1964一).男.浙江人.研究员,研究方向:兽医淹行病学.E-mail:xuhui888@163.tom基金项目:浙江省重大科技专项农业项目(2007c12045).时发出预警并采取相应措施,将损失降低到最小。本研究试图通过检测PRRSV抗体水平并结合猪场实际情况,对PRRS抗体检测值的分布根据猪场PRRS流行模式进行分类,探索不同模式下的抗体分布和发病风险。1材料与方法猪群选择:2008--2010年间选择并采集26个规模猪场15日龄至150日龄507份猪血清检测PRRS的EI,ISA抗体。

6、抗体检测:采用ELISA方法,试剂盒购自IDEXX公司。PRRSV污染检测:B、C模式猪群采集血清或发病猪组织样品检测病毒,RT—PCR检测按照徐辉等(2007)介绍的方法进行,检测到阳性的群体认定为PRRSV感染群体。抗体效价分布分析方法:每个场采集10份以上的血样,对每个血样的S/P检测值,分群统计检测出的S/P值的均值、标准差、最大值和最小值,并采用Excel软件按模式制备分析数据分布图进行分析。同时将3种按模式分类的检测数据采用盒须图(Box-and-WhiskerPlot)方法(Tukey,1977)对抗体效价分布进行分析,得

7、出各种模式典型数据分布图。盒图形将数据分为4个部分,中间两部分代表了数值由低到高25oA~75%的数据,中线为中值线。异常偏离样本值为大于第4部分最大值,且在25%~75%差值的1.5倍以上。盒须图制作采用MedCale软件。2结果与分析2.1猪群分类根据临床表现和对25个猪场26个猪群的临床调查和PRRS抗体检测结果,可以将猪群分为3种流行模式。第1种(A)模式为无万方数据中国畜牧兽医2012年第39卷第1期疾病防治·179·PRRSV污染,临床健康;第2种(B)模式为PRRSV污染,但临床稳定,可能有一过性零星发病,防控措施有效;第

8、3种(C)模式为野毒污染,临床发病,控制困难。其中B、C模式的血清或发病猪组织病料经RT—PCR方法检测PRRSV为阳性。2.2A模式猪场PRRS抗体分布经对该模式下未经免疫的7个从未发生过生猪高热病的健康

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