病毒学研究方法简介

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1、第八章病毒学研究方法简介生物安全实验室P1实验室——研究的病毒危险性较低，试验人员连口罩都不用带，穿上白大褂就可以了，试验人员在这里很放松；P2实验室——研究的是中度危险的病原，像肝炎、流行性感冒等等，要求戴防护性较好的口罩；P3实验室——研究的是高度危险的病毒，传染性很强，而且没有疫苗，试验人员的保护措施要比P1/P2实验室严密得多；P4实验室——全球级别最高的生物安全实验室，研究的是极度危险的病毒，如令人谈之色变的埃博拉病毒、马尔堡病毒，进入这种实验室的工作人员，处于防护服的严密保护之下，连空气都不能在实验室内

2、呼吸，红色螺旋状管子，是专门用来向室内输送新鲜空气的，试验人员一进入实验室，要先屏住呼吸，马上接上这种管子，然后才能呼吸。根据微生物及其毒素的危害程度不同，分为４级，一级最低，四级最高。病毒学研究的主要方法生物学特性测定:在寄主上的反应——症状、传播等病毒分离与培养：提纯与纯化、二元培养法光镜与电镜观察：病毒粒子和病毒与相应抗血清的特异免疫吸附情况免疫学技术：以血清学和组织免疫化学方法检测材料带毒情况、多克隆抗体、单克隆抗体分子生物学技术：核酸分子杂交、PCR等一、生物学特性测定在寄主上的反应寄主范围、症状表现、传

3、播方式等病毒的理化性质病毒粒子的形态、大小、对理化因子的耐受性、体外存活期等病毒接种方法注射接种、病毒组织培养技术植物病毒——汁液摩擦接种、昆虫介体接种、嫁接接种、菟丝子接种法等巨细胞病毒感染细胞的典型“猫头鹰眼”样核内包涵体冠状病毒感染——“非典”X线胸部检查可见肺部不同程度的片状阴影，少数病人进展迅速，呈大片状阴影，大多数为双侧改变，阴影吸收消散较慢。TMVtransmissionbyanApissp.Aseveremosaicsymptomontomatoleaf(TMV)腿色斑Chloroticspotin

4、g黄化Yellowing病毒检测斑驳Mottle脉明症Vein-clearing条斑Leafstreak腿色斑驳Chloroticmottleyellowdwarf变色seedcoatmottling郁金香碎锦花叶病花变色—碎色症colorbreaking、花瓣变绿virescence杂色花郁金香、香石竹、紫罗兰、虞美人、唐菖蒲TestingforSoybeanViruseswithIndicatorPlantsHypersensitivity——Someplantsarepredictably sensitive

5、toaspecificvirus.Thehypersensitiveplantsarecalledindicatorplants,andareusedasabioassaytotestforthepresenceofvirusinanunknownsample1Materials:gloves,sterilecottonswabs,rinsebottle,tissuegrindingbagsandcarborundum-siliconcarbidewhichisusedasatissueabrasive2Plant

6、sapismadefromtheplanttobetestedforvirusbypullingoffasymptomaticupperleaf3placingtheleafinasterileplasticbag.addingbuffersolutiontothebag.grindtheleaftissuetoreleasethevirusparticlesintothebuffer.4sprinkleabitofcarborundumontheplanttobeinoculated.Justalightdust

7、ingissufficienttoprovideenoughabrasiontointroducevirusintotheplantcells.5inoculatetheindicatorplant,acottonswabisimmersedinplantsaprubthesurfaceofthetestplantleaffirmly,butnotwithenoughforcetoteartheleaf67rinseoffthecarborundumexcesssapfromtheleafwithwatertore

8、movecompoundsthatcouldinterferewiththeinfectionprocess8Theindicatorplantsareplacedinthegreenhouseandcheckeddailyforsymptoms.Ifcharacteristicsymptomsappear,weknowthatvirusparticlesw