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时间:2019-07-13
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1、病毒与其它微生物的区别病毒致病过程四.病毒与宿主相互关系的探索时期病毒核酸可以整合到宿主细胞基因组中DNA是噬菌体的遗传物质某些病毒感染引起细胞融合某些病毒引起细胞生长习性和形态特征的转化转录增强子元件、转录因子与启动子结合---SV40的研究RNA聚合酶Ⅲ与启动子识别并进行转录--腺病毒VA基因的研究基因在DNA基因组上的位置是不连续的,有内含子存在,转录体需要剪裁,拼接成mRNA---T4噬菌体和腺病毒的研究mRNA3’-端的聚腺苷酸化-----痘病毒首次发现聚腺苷酸化信号-----SV40mRNA5’-端的帽子结构和碱基的甲基化作用-----呼肠病毒翻译后的前体经蛋白酶加工裂解成为
2、功能蛋白质,经高尔基体的糖基化以及被蛋白激酶磷酸化的研究------病毒意义:1.揭示了病毒正链RNA基因组复制和基因表达的一种新类型。2.对20世纪60年代所形成的中心法则理论的重要修饰和补充。3.反转录酶广泛应用于cDNA克隆的技术。(一)反转录酶的发现20世纪70年代反转录酶的发现----RNA肿瘤病毒20世纪70年代另一个病毒学研究中最有深远影响的发现。在对噬菌体与其寄主相互关系的研究中发现的。(二)限制性内切酶的发现1972年P.Berg在斯坦福大学第一次体外构建重组DNA分子,即将λ噬菌体基因和E.Coli半乳糖基因插入SV40的环状DNA中。1973年H.Boyer和S.C
3、ohen用E.coli质粒pSCIOI(Tetr)上仅有一个EcoRⅠ切点的特点与另一个质粒R6-3(Neor)组合成嵌合质粒,转化E.coli后在含四环素和新霉素培养基上选出有Tetr和Neor的新转化子。PaulBerg(1926-)(三)基因工程的诞生CMV立刻早期基因IE的启动子含有增强子、TATAbox、和转录起始位点载体的一些必要元件如复制原点、启动子、转录增强子、翻译增强子等等大多来自病毒多种病毒载体的广泛应用。SV40的polyA病毒的定义体积小,结构简单,只有一种类型的核酸,只能在活的、敏感细胞内以复制方式增殖的非细胞型微生物。病毒大小测量单位为纳米(nm,为1/100
4、0m)<50nm小型病毒50nm-150nm中等大小病毒>150nm大型病毒病毒形态多数病毒呈球形或近似球形,杆状,丝状,少数可为子弹状、砖块状,噬菌体可呈蝌蚪状。病毒大小最大的病毒:大小或直径(纳米)虫痘病毒450牛痘苗病毒300X250X100最长的病毒:柑橘衰退病毒2000甜菜黄花病毒1250X10铜绿假单胞菌噬菌体1300X10最小的病毒:口蹄疫病毒21乙型肝炎病毒18苜蓿花叶病毒16.5玉米条纹病毒12-8烟草坏死病毒16菜豆畸矮病毒9-11最细的病毒:大肠杆菌的f1噬菌体5X800病毒体结构模式图壳粒衣壳核心(核样物)核衣壳包膜包膜病毒包膜子粒衣壳粒(capsome
5、re):概念:为病毒的最小形态单位,由1~6个多肽分子折叠缠绕成的蛋白质亚单位(三级结构)。◆不同病毒,多肽分子的组成不同;◆简单病毒只有1~2种衣壳粒,如:TMV就只含有1种壳粒;◆复杂病毒,20种左右。衣壳粒的特点:衣壳(capsid):⑴概念:是衣壳粒以对称形式有规律的排列形成的病毒外壳。内包核酸,形状多样。壳体蛋白是许多亚基借次级键或静电引力互相聚合而成的具四级结构的多聚体。(2)特点:亚基的组成和数目的不同是区别不同壳体蛋白的标志核衣壳(nucleocapsid):概念:又称核壳体;病毒蛋白质衣壳与病毒核酸的合称,为病毒的基本结构。包膜(envelope)(1)概念:指核衣壳外
6、包裹的由类脂、多糖或蛋白质组成的一层构造较复杂的包膜,亦称被膜或外膜。包膜的特点:包膜的结构具有高度稳定性a.维系病毒体结构;b.保护病毒核酸;c.起始病毒感染所必需(识别)。包膜的功能:包膜蛋白的种类:A包膜糖蛋白:概念:主要在包膜外侧,是包膜的重要结构组成。功能:a.引起感染的先决条件,为病毒的吸附蛋白。b.在病毒进入时发挥作用,与细胞质膜融合。c.是病毒表面和受染细胞质膜上的特异抗原决定簇。d.具多种生物学活性。B.基质蛋白:(有些病毒无)概念:位于包膜内侧的非糖基化蛋白。功能:a.支撑包膜,维系病毒结构;b.识别病毒核衣壳,联系核衣壳与病毒糖蛋白包膜的形成:◆来源于宿主细胞膜或
7、核膜:如流感病毒。◆在宿主细胞内合成:如痘苗病毒。刺突的功能:a.可启动感染;b.可诱生免疫保护作用;c.可中和抗体;d.可促使病毒从宿主细胞上释放.病毒的化学组成核衣壳核心衣壳一种类型的核酸小量非结构蛋白壳粒蛋白质包膜蛋白质多糖脂类金属离子多胺单链DNAsinglestrandDNA,ssDNA正链DNA(+DNA):碱基序列同mRNA的为正链;负链DNA(-DNA):碱基序列同mRNA互补,可直接作为转录模板的DNA链为
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