SELDI-TOF-MS筛选微小病变型肾病综合征尿液生物标志物

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1、SELDI-TOF-MS筛选微小病变型肾病综合征尿液生物标志物林青1，郑健2，陈蓉艳1，艾斯2（350004福建福州，福建中医学院附属人民医院：1检验科，2儿科）[摘要]目的探讨应用优化的表面增强激光解析电离-飞行时间-质谱（surfaceenhancedlaserdesorption/ionizationtimeofflight-massspectrometry，SELDI-TOF-MS）进行微小病变型肾病综合征（minimal-changednephroticsyndrome，MCNS）大鼠尿液生物标志物筛选的意义。方法SD大鼠30只随机分为正常对照组、模型对照组和强的

2、松治疗组。除正常对照组外，其余大鼠经尾静脉一次性注射阿霉素5.5mg/kg复制MCNS模型，造模10d后分别予以强的松和蒸馏水灌胃治疗。21d后收集大鼠尿液，经弱阳离子交换芯片CM10捕获蛋白质，应用SELDI-TOF-MS获取三组大鼠的尿液蛋白质指纹图谱，采用Biomarkerwizard软件比对分析差异蛋白。结果优化实验条件后获得较理想的尿液蛋白质指纹图谱，质控峰强度的平均CV值为18.0%（7.50%～35.89%）。在模型对照组与正常对照组之间检测到不同质荷比处有33个具统计学意义的差异蛋白峰（P<0.05），其中21个蛋白表达上调，12个蛋白表达下调。在正常对照组

3、、模型对照组与强的松治疗组之间有六个蛋白质表达存在差异（P<0.05），这些差异蛋白峰在模型对照组中高表达，而在强的松治疗组中蛋白表达下调，峰强度接近正常对照组。结论通过优化实验条件并实行质量控制，SELDI-TOF-MS可为MCNS大鼠尿液生物标志物的筛选提供一个可行的检测途径。所获得的差异性蛋白峰对MCNS的早期诊断、治疗监测和寻找药物治疗的靶目标具有重要的意义。[关键词]SELDI-TOF-MS；微小病变型肾病综合征；尿液；生物标志物；质控[中图法分类号][文献标志码]ASELDI-TOF-MSasamethodforbiomarkerdiscoveryintheur

4、ineofminimal-changednephroticsyndromeLINQing1,ZHENGJian2,CHENRong-yan1,AISi2(1DepartmentofClinicalLaboratory,2DepartmentofPaediatrics,TheAffiliatedPeople’sHospital,FujianUniversityofTraditionalChineseMedicine,Fuzhou350004,China)[Abstract]ObjectiveTostudytheuseofoptimalsurfaceenhancedlaserd

5、esorption/ionizationtimeofflight-massspectrometry(SELDI-TOF-MS)fordetectingbiomarkersintheurineofminimal-changednephroticsyndrome(MCNS).MethodsThirtySDratswererandomlydividedintonormalcontrolgroup,untreatedgroupandprednisonegroup.Exceptthenormalcontrolgroup,ratswereinjectedonceviacaudalvei

6、nwithadriamycin(5.5mg/kg)toinduceMCNS.10dayslater,theratswereadministeredwithprednisoneordistilledwaterfor21d,respetcively.Collectingtheurineofrats,urinarypeptideorproteinpeaksweredetectedbySELDI-TOF-MSandweakcationexchangeproteinchipCM10.Thedifferentiallyexpressedproteinandpolypeptideswer

7、eanalyzedwithBiomarkerWizardSoftware.ResultsUnderoptimalexperimentalconditions,theaveragevariationcoefficientsoftherelativepeakintensityincontrolwere18.0%（between7.50%and35.89%）.Inthedifferentrangeofm/zvalues,therewere33significantlydifferentmeanpeakintensitie