蛋白质组学相关考题

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1、1.生物质谱所用的内肽酶是。（北京大学2010试题；北京大学2009试题）ACPABCPBCCPYDTrypsin知识要点（1）CPA，CPB，CPY是羧肽酶A、羧肽酶B、羧肽酶Y。羧肽酶（carboxypeptidase）是一类肽链外切酶，它能专一地从肽链的C-末端开始逐个降解，释放出游离氨基酸，用于C-末端氨基酸残基分析。（2）Trypsin是胰蛋白酶，是最常用的蛋白水解酶，专一性强，只断裂赖氨酸或精氨酸的羧基参与形成的肽键。用固相法测序时，用胰蛋白酶裂解得到的肽段可以通过双功能交联剂—对苯二异硫氰酸直接偶联到固相载体上。解题思路多注意

2、常用酶的英文及缩写根据知识要点1、2，排除A、B、C。参考答案D2.简述2-3种检测蛋白质间相互作用的方法。（北京大学2010试题；中国科学院2009试题）知识要点（1）蛋白质-蛋白质相互作用的研究已被纳入蛋白质组学的研究范畴。（2）蛋白质相互作用的方法包括：酵母双杂交、FarWestern印迹技术、GST融合蛋白质沉降技术、蛋白质芯片技术、等离子表面共振技术、免疫共沉淀技术和荧光共振能量转移法等。解题思路首先要了解蛋白质-蛋白质相互作用和蛋白质-DNA相互作用方法的区别，然后根据知识要点选取2-3种方法进行阐述。参考答案（1）酵母双杂交系

3、统（yeasttwo-hybirdsystem）：是利用杂交基因通过激活报道基因的表达探测蛋白-蛋白的相互作用。真核生物转录因子具有DNA结合结构域（BD）和转录激活结构域（AD）,这两个结构域分开时仍分别具有功能，但不能激活转录，只有它们以适当途径在空间上较为接近时，才能重新具有转录因子活性，并激活报道基因表达。（2）免疫共沉淀（IP）：基本原理是抗原和抗体之间专一性地相互作用而沉淀，从而保留下来，其是一种经典的检测蛋白质相互作用的方法。其实验过程比较简单，裂解细胞后，加入抗体，抗原被沉淀下来后洗涤，去除非特异性结合，再分析复合体。抗体可

4、以是单克隆，也可以使多克隆。（3）蛋白质芯片（proteinchip）：蛋白质芯片可以用来大规模筛选蛋白质之间的相互作用，将一个蛋白质芯片与荧光标记的探针蛋白孵育，洗脱非特异性结合的蛋白后，可以通过扫描芯片上的荧光点来检测稳定的相互作用蛋白点。8.研究蛋白质相互作用可以采用、、等方法。（北京大学2008试题）14.蛋白质双向电泳（2-DE）是根据蛋白质分子量大小和的不同来分离蛋白质的技术。（中山大学2007试题）5.蛋白质芯片技术基本上是基于（）方法中的原理。（深圳大学2009试题；中科院上海生命科学研究所2006试题）ANorthernb

5、lotBWesternblotCSouthernblotDEasternblot10.用来研究蛋白质-蛋白质间相互作用的实验技术是（）。（中国科学院2007试题）A酵母双杂交技术B原位杂交技术CRACE技术DSAGE技术25.免疫沉淀法（immunoprecipitation）一般用于分离（）。（中山大学2008试题）ADNABRNAC蛋白质D脂类名词解释：1.Edman降解(Edmandegradation)（苏州大学2008试题；浙江大学2004试题）2.等电聚焦（isoelectrofocusing，IEF/EF）（苏州大学2008试

6、题；华南理工大学2005试题）3.蛋白质组学（proteomics）（深圳大学2010试题；武汉大学2003试题）4.蛋白质组（proteome）（深圳大学2010试题；协和医科大学2006试题；武汉大学2005试题）5.双向电泳（two-dimentionlalgelelectrophoresis，2-DE）（四川大学2006试题；军事医学科学院2000试题）6.酵母双杂交系统（yeasttwo-hybirdsystem）（浙江大学2007试题；协和医科大学2006试题）7.SDS电泳（SDS-PAGE）（中国农业大学2006试题；南开大

7、学2006试题）8.蛋白质印迹法（Westernblotting）（南开大学2006试题）9.蛋白质测序（proteinsequencing）（军事医学科学院2000试题）10.免疫沉淀（immunoprecipitation，IP）（浙江大学2008试题）2.简述双向电泳研究蛋白质组的优缺点。（北京大学2010试题）6.请例举三种蛋白质分子量的测定方法，并简述其原理。（中国海洋大学2003试题）答：（1）凝胶阻滞分析法（EMSA）：DNA在电场中发生迁移，至一定位置形成条带，其迁移距离与其分子大小、形状和所带电荷有关。DNA和蛋白质结合后

8、其大小和形状发生变化，因而其在电泳时迁移的距离也会发生变化，形成不同的条带；（2）DNaseⅠ印迹法：DNA与蛋白质结合后，结合部位的DNA因受到蛋白质的保护而不被DNaseⅠ降