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《JNK12-AP1信号转导通路对PM2.5所致气道黏液高分泌的介导作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、基金项目：国家自然科学基金（31171346,81070031）1作者单位：重庆医科大学附属第二医院呼吸科,E-mail:zywenjianli@163.com1*通讯作者：周向东,E-mail:zxd999@263.netJNK1/2-AP1信号转导通路对PM2.5所致气道黏液高分泌的介导作用温建立1李琪1周向东1*（重庆医科大学附属第二医院呼吸内科，重庆400010;）摘要：目的研究直径≤2.5μm空气中可吸入颗粒（PM2.5）所致气道黏液高分泌的信号转导机制。方法PM2.5刺激大鼠建立气道黏
2、液高分泌模型，Wistar大鼠随机分为对照组、PM2.5组、PM2.5+SP600125组。ELISA检测各实验组中粘蛋白（MUC）5AC在蛋白水平的表达量，Realtime-PCR检测MUC5AC在mRNA水平的表达量，Westernblotting检测JNK3个亚型（p-JNK1、p-JNK2、p-JNK3）的蛋白含量，EMSA检测该信号通路下游激活蛋白1（AP-1）与DNA的结合活性。结果PM2.5刺激组与空白对照组相比，前者MUC5AC在mRNA水平和蛋白水平的表达量均显著高于后者（P＜0
3、.01），通过WesternBlotting法测得p-JNK1、p-JNK2的含量也明显高于对照组（P＜0.01），p-JNK3的蛋白含量则无明显变化，EMSA结果提示：PM2.5刺激大鼠后，测得激活蛋白1结合活性明显升高（P＜0.01），给予JNK特异性抑制剂SP600125后，测得激活蛋白1结合活性明显降低（P＜0.05）。与PM2.5刺激组比较，PM2.5+SP600125组的MUC5AC在mRNA水平和蛋白水平的表达明显降低（P＜0.05）。结论PM2.5可以通过JNK1/2-AP-1信号
4、传导通路调节气道黏液高分泌。关键词：PM2.5;c-JunN端激酶;气道黏液高分泌;信号传导中图分类号：文献标识码：PM2.5inducemucussecrectionviaJNK1/2-AP-1pathwayinvitroWENJianLi1,LIQi1,ZHOUXiangDong1*Abstract：ObjectiveToinvestigatethemechanismofPM2.5onairwaymucoushypersecretion.MethodsStimulatedratsbronchi
5、alepithelialcellwithPM2.5tocreateairwaymucoushypersecrectionmodelinvitro,Wistarratsweredividedinto3groups:controlgroup,PM2.5groupandPM2.5+SP600125group.ThemRNAandproteinofMUC5ACweremeasuredbyreal-timePCRandELISA,respectively.Thesubtypeofp-JNK(p-JNK1,p
6、-JNK2,p-JNK3)weremeasuredbywesternblotting.Electrophoreticmobitityshiftassay(EMSA)wasusedtodetecttheDNA-bindingactivitiesofactivatorprotein-1.ResultsAscomparedwiththecontrolgroup,themRNAandproteinofMUC5ACandp-JNK1,p-JNK2,inPM2.5groupwereobviouslyhighe
7、rthanthoseofthecontrolgroup(allP＜0.01).butdidnotaffectthephosphorylationofJNK3,TheDNA-bindingactivitiesofactivatorprotein-1wasup-regulatedinPM2.5groupbyEMSA,TheDNA-bindingactivitiesofactivatorprotein-1wasdown-regulatedinPM2.5+SP600125groupbyEMSA(P＜0.0
8、5),atthesametime,ThemRNAandproteinofMUC5ACwassignificantlyinhibitedbypretreatmentwithinhibitorofJNK(SP600125)(P<0.05).ConclusionPM2.5mayinducetheairwaymucoushypersecretionviaJNK1/2-AP-1signalingpathwayinvitro.KeywordsPM2.5;c-JunN-terminalkinas
