蕉芋多糖抗氧化性及还原能力的研究

蕉芋多糖抗氧化性及还原能力的研究

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1、第37卷第6期韩山师范学院学报Vol.37No.62016年12月JournalofHanshanNormalUniversityDec.2016蕉芋多糖抗氧化性及还原能力的研究李粉玲,林瑶(韩山师范学院化学与环境工程学院,广东潮州521041)摘要:以蕉芋地上部分茎叶为原料,采用超声波辅助热水提取并精制蕉芋多糖,通过邻苯三酚自氧化法、水杨酸法研究蕉芋多糖的抗氧化性对超氧自由基、羟基自由基的清除作用,采用分光光度法测定不同浓度的蕉芋多糖溶液对亚硝酸钠的清除能力.研究结果表明,蕉芋多糖对超氧自由基

2、和羟基自由基具有良好的清除能力,同时对亚硝酸钠也有一定的清除能力.关键词:蕉芋;多糖;超声波;羟自由基;超氧阴离子;抗氧化性中图分类号:TS202.3文献标识码:A文章编号:1007-6883(2016)06-0029-05蕉芋(CannaedulisKerGawl)别名畲鹅草,属于美人蕉科植物,具块状根茎,原产印度群岛、南美洲,中国南部及西南部有栽培,始载于《中国经济植物志》.据潮州凤凰镇民间验方,蕉芋味甘、[1]淡,性凉,入肺、肝、大肠三经,具有清热利湿、解毒消肿、健脾胃功效.在潮州凤凰镇,

3、蕉芋块茎可煮食或提取淀粉,其淀粉是凤凰镇特色美食畲鹅粉的主要原料.本实[2-4]验通过超声波辅助热水提取蕉芋茎叶中的多糖,通过邻苯三酚自氧化法、水杨酸法分别测定蕉芋-多糖清除超氧阴离子自由基(O2·)和羟基自由基(·OH),通过铁氰化钾法测定不同浓度蕉芋多糖溶液的还原能力,通过分光光度法测定不同浓度蕉芋多糖溶液对亚硝酸钠的清除能力,初步评价蕉芋茎叶多糖的抗氧化活性,为蕉芋的综合利用提供参考.1材料与方法1.1材料蕉芋茎叶,采自潮州凤凰镇凤凰山当地蕉芋种植户.1.2主要试剂95%乙醇、无水乙醇、丙

4、酮、无水乙醚、5%苯酚、葡萄糖、三氯甲烷(氯仿)、正丁醇、浓硫酸、高岭土、邻苯三酚(焦性没食子酸)、硫酸亚铁、水杨酸、盐酸、30%过氧化氢、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、亚硝酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、铁氰化钾、三氯化铁、三氯乙酸,均为国产分析纯.1.3仪器与设备KQ-500DB数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);FA2004N精科电子分析天平(郑州南北仪器设备有限公司);752S紫外分光光度计(上海精密科学仪器有限公司);TDL80-2B型离心机(广州广一科学仪器有限公司);KDM型

5、调温电热套(山东省鄄城永兴仪器厂);SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵(巩义市英峪予华仪器厂);DJ-10A倾倒式粉碎机(上海定久中药机械制造有限公司);收稿日期:2016-03-22作者简介:李粉玲(1970-),女,广东汕头人,韩山师范学院化学与环境工程学院高级实验师.·29·101-1A型数显电热鼓风干燥箱(上海协达计控设备公司通州医科仪器厂);玻璃仪器气流烘干器(巩义市予华仪器有限责任公司);ET-Q型气浴恒温振荡器(常州荣冠实验分析仪器厂).1.4实验内容与方法1.4.1蕉芋多糖的制备预处

6、理:原料蕉芋→电热鼓风干燥箱→倾倒式粉碎机→蕉芋粉末(过40目筛).10g蕉芋粉末→索氏提取器→石油醚回流脱脂2次→无水乙醇回流脱脂2次(回流时间1h/次,试剂用量60mL/次)→烘干恒重(提取率为93.40%).[5-7]粗多糖的制备:碘量瓶(蕉芋粉末∶去离子水质量比为1∶5)→超声波清洗仪二次浸提20min(温度60℃、超声波功率50%、料液比1∶30)→减压抽滤→调温电热套(加热浓缩至1~2mL)→趁热加入为浓缩液4倍体积的95%乙醇,置4℃冰箱过夜→离心收集其沉淀,沉淀物依次用95%乙醇

7、、丙酮、无水乙醚洗涤→真空干燥得粗多糖.[8-9]粗多糖精制:粗多糖用50ml蒸馏水溶解,加入Sevage试剂脱蛋白(多糖溶液∶氯仿∶正丁醇=1∶0.2∶0.04)→振荡30min,静置→加入适量高岭土脱色20min,重复多次→加4倍量95%乙醇,置4℃冰箱过夜→离心收集沉淀,用95%乙醇、丙酮、乙醚依次洗涤沉淀→真空干燥得精多糖.1.4.2蕉芋多糖抗氧化性及还原能力的测定-(1)蕉芋多糖对超氧阴离子自由基(O2·)清除能力的测定实验原理:[10-11]采用改进的邻苯三酚自氧化法:在碱性条件(p

8、H8.2)下,邻苯三酚发生自氧化反应,生成---O2·和有色中间产物,该有色物在波长325nm处有一特征吸收峰.当加入O2·清除剂时,O2·的生成受到抑制,邻苯三酚的自氧化反应受阻,溶液在波长325nm处吸收峰减小.所以通过测定A325,-可以计算蕉芋多糖对O2·的清除作用.实验步骤:将50mmol/LTris-HC1缓冲溶液(pH8.2)4.5mL与4.2mL蒸馏水混匀,于25℃水浴中保持20min后立即加入5mmol/L邻苯三酚(25℃预热)0.3mL,混匀,在4min内,每隔30s测定OD

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