探究培养液中酵母菌数量的动态变化

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1、探究培养液中酵母菌数量的动态变化探究原理：酵母菌可以用液体培养基来培养。培养基中酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、pH、温度等因素有关。我们可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线，从而掌握酵母菌的种群数量变化情况。探究步骤：（1）将10mL无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中。（2）将酵母菌接种入试管中的培养液。（3）将试管放在25℃条件下培养。（4）每天取样计数、推导计算酵母菌数量：血球计数板（2mm×2mm方格，培养液厚0.1mm）（5）分析数据，画出曲线（7天），推测影响影响酵母菌种群数量变化的因素。(二)酵母细胞数的测定操作方法1.血球计数板的构造血球计数

2、板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面个刻有一个方格网。方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物计数用。这一大方格的长和宽各为1mm，深度为，其体积为0.1mm3。计数室通常有两种规格。一种是大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格；另一种是大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造；它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成，见图。2.血球计数板的使用(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌

3、个数。(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数，以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜，一般稀释10倍即可。(3)将血球计数板用擦镜纸擦净，在中央的计数室上加盖专用的厚玻片。(4)将稀释后的酵母菌悬液，用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘，使菌液缓缓渗入，多余的菌液用吸水纸吸取，捎待片刻，使酵母菌全部沉降到血球计数室内。(5)计数时，如果使用16格×25格规格的计数室，要按对角线位，取左上、右上、左下、右下4个中格（即100个小格）的酵母菌数。如果规格为25格×16格的计数板，除了取其4个对角方位外，还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数。(6)当遇到位于大格线上的酵母菌，一般只

4、计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞)。(7)对每个样品计数三次，取其平均值，按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数。3.计算公式(1)16格×25格的血球计数板计算公式：酵母细胞数／ml=100小格内酵母细胞个数／100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式：酵母细胞数／ml=80小格内酵母细胞个数／80×400×104×稀释倍数4.血球计数板的清洁血球汁数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用95％的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他

5、沉淀物。若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。计算公式16格×25格的血球计数板计算公式：酵母细胞数/ml=小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数25格x16格的血球计数板计算公式：酵母细胞数/ml=小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数方案设计：一、提出问题培养一种酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？也可以提出其他的探究问题，例如，在不同温度（以及通氧、通CO2等）条件下酵母菌种群数量增长的情况如何？不同培养液（如加糖和不加糖）中酵母菌种群数量增长的情况如何？等等。二、猜想假设酵母菌种群的数量随时间呈S型增长变化。三、设计实验①全班同学分成甲、乙、丙等若

6、干实验组。②分别用等量培养液，在相同适宜环境中培养等量酵母菌。③每天用血球计数板，采用抽样检测的方法计数一个小方格内的酵母菌数量并作记录，连续7天。④7天后，各组向全班汇报本小组7天的数据，算出每一天数据的全班平均值，根据平均值画出酵母菌种群数量的增长曲长。探究培养液中酵母菌数量的动态变化实验过程：一、材料用具探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血球计数板（2mm×2mm×0.1mm方格）、滴管、显微镜等。二、方法步骤和记录1、取相同试管若干支，分别加入5ml肉汤培养液，塞上棉塞。2、用高压锅进行高压蒸汽灭菌后冷却至室温，标记甲、乙、丙等。3、将酵母菌母液分别加入试管

7、各5ml，摇匀后用血球计数板计数起始酵母液个数，做好记录。4、将各试管送进恒温箱，25℃下培养7天。探究培养液中酵母菌数量的动态变化三、现象观察每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。菌数时间（2.5×104个）（天）组别起始1234567甲乙丙………………………平均探究培养液中酵母菌数量的动态变化四、实验结论1、根据表格平均值作出培养液中酵母菌种群数量7天中的变化曲线。2、培养液酵母菌种群数量随时