微生物的分类鉴定1

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1、第二章微生物的分类鉴定与常见种类一、微生物分类鉴定步骤：①获得该微生物的纯种培养物②测定一系列必要的鉴定指标③查找权威性的鉴定手册不同种类微生物应采用不同的重点鉴定指标：真菌：形态特征较丰富、细胞体积较大，以形态特征为主要指标放线菌、酵母菌：形态特征与生理特征兼用细菌：形态特征较缺乏，使用较多的生理、生化和遗传等指标1.微生物的分类鉴定依据鉴于微生物形体微小、结构较简单等特点，微生物分类和鉴定除了像高等生物那样，采用传统的形态学、生理学和生态学特征之外，还必须寻找新的特征作为分类鉴定的依据。1.1经典分类鉴定依据1.1.1微生物的形态特征形态学特征始终被用作微生物分类和鉴定的重要依据之一，

2、其中有两个重要原因：一是它易于观察和比较，尤其是在真核微生物和具有特殊形态结构的细菌中；二是许多形态学特征依赖于多基因的表达，具有相对的稳定性。①培养特征a.固体培养特征：菌落特征，大小、侧面隆起、光泽、粘稠、颜色、边缘、表面状况、质地、水溶性色素（粘质沙雷氏菌产红色或紫红色色素）等b.半固体培养特征：明胶液化、鞭毛运动情况c.液体培养特征：表面菌膜、混浊，底部沉淀各种微生物形成的菌落特征粘液型菌落菌膜菌沉淀均匀浑浊对照固体培养基液体培养基半固体培养基②细胞形态形态：球形、杆状、弧形、螺旋形、丝状、分枝及特殊形状大小：其中最重要的是细胞的宽度或直径排列：单个、成对、成链或其他特殊排列方式③

3、特殊细胞结构有无鞭毛、芽孢、荚膜（糖被）、菌胶团孢子：形状、大小、颜色、着生位置、数量及排列细胞附属物：如柄、丝状物、鞘、异形胞等超微结构：壁、内膜系统、放线菌孢子表面特征等④细胞内合物硫粒、异染颗粒、伴孢晶体、PHB、气泡等⑤染色反应革兰氏染色、抗酸性染色抗酸性染色：分枝杆菌属或诺卡氏菌属的一些菌，普通方法染不上色，须加温或长时间染色，染色后的细胞用酸或碱处理不能脱色，把具此性质的细菌称为抗酸性细菌（含分枝菌酸，能与石炭酸和复红形成的复合物牢固结合，并能抵抗酸性酒精的脱色）。⑥运动性鞭毛泳动、滑行、螺旋体运动方式1.1.2微生物的生理生化特性生理生化特征与微生物的酶和调节蛋白质的本质和活

4、性直接相关，酶及蛋白质都是基因产物，所以，对微生物生理生化特征的比较也是对微生物基因组的间接比较，加上测定生理生化特征比直接分析基因组要容易得多，因此生理生化特征对于微生物的系统分类仍然是有意义的。在以实用为主要目的表型分类中，大量原核生物的属和种，仅仅根据形态学特征是难以区分和鉴别的，所以生理生化特征往往是这些医学上或其他应用领域中重要细菌分类鉴定的主要特征。（1）营养类型①光能无机自养型（光能自养型）②光能有机异养型（光能异养型）③化能无机自养型（化能自养型）④化能有机异养型（化能异养型）（2）对碳源的利用对各种单糖、双糖、多糖以及醇类、有机酸等的利用（3）对氮源的利用对蛋白质、蛋白胨

5、、氨基酸、含氮无机盐、N2等的利用（4）对生长因子的需要对特殊维生素、氨基酸等的依赖性乳酸菌对生长因子的要求较高（5）对氧的要求好氧、微好氧、厌氧及兼性厌氧（6）对温度的适应性最低温、最适温、最高温、产物积累温度、致死温度（7）对PH的适应性在一定PH条件下的生长能力及生长的PH范围生长的PH范围：肠道细菌较宽；血液寄生微生物较窄，因循环系统PH一般稳定在7.3（8）对渗透压的适应性对盐浓度的耐受性或嗜盐性（9）对抗生素及抑菌剂的敏感性对抗生素、氰化钾(钠)、胆汁、石炭酸（系数）或某些染料的敏感性（10）代谢产物各种特征性代射产物如色素、有机酸、产气、硫代氢、明胶液化作用大肠菌群乳糖发酵，

6、产酸、产气1.1.3微生物的生态特性在自然界的分布情况与宿主关系：共生、寄生、致病性等宿主种类有性生殖情况生活史，等1.1.4血清学试验与噬菌体分型（1）血清学试验细菌细胞和病毒等都含有蛋白质、脂蛋白、脂多糖等具有抗原性的物质，不同微生物抗原物质结构不同，赋予它们不同的抗原特征。常借助特异性的血清学反应来确定未知菌种、亚种或菌株。由于某些传染病与特定的血清型密切相关，其分布也有一定的区域性特征，所以血清型的划分在流行病的研究中有重要意义。通常是对全细胞或者细胞壁、鞭毛、荚膜或粘液层的抗原性进行分析比较。虽然血清学试验被广泛用于微生物分类鉴定的研究，但比较成功的应用是对种内（以及个别属内）不

7、同菌株血清型的划分。例如，根据鞭毛抗原(H抗原)苏云金芽孢杆菌分成40多个血清型根据荚膜抗原肺炎链球菌分成近百个血清型根据菌体(O)抗原、H抗原和表面(Vi)抗原将沙门氏菌属细菌分成约2000个血清型大肠杆菌O-157（2）噬菌体分型在原核生物中已普遍发现有相应种类的噬菌体。噬菌体对宿主的感染和裂解作用常具有高度的特异性，即一种噬菌体往往只能感染和裂解某种细菌，甚至只裂解种内的某些菌株。所以，根据噬菌体的宿主范围可将细菌