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时间:2019-07-08
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1、第三章病毒和亚病毒第三章病毒与亚病毒第一节病毒第二节亚病毒第三节病毒与实践第一节病毒概述病毒的形态和结构病毒的复制病毒的溶原性病毒对理化因素抵抗力一、病毒的特点和定义第一节概述1、特点1)不具有细胞结构,具有一般化学大分子的特征。2)一种病毒的毒粒内只含有一种核酸,DNA或者RNA。3)大部分病毒没有酶或酶系极不完全,不含催化能量代谢的酶,不能进行独立的代谢作用。4)严格的活细胞内寄生,没有自身的核糖体,没有个体生长,也不进行二均分裂,必须依赖宿主细胞进行自身的核酸复制,形成子代。5)个体微小,在电子显微镜下才能看见。6)
2、对大多数抗生素不敏感,对干扰素敏感。例如一些简单的病毒仅由核酸和蛋白质外壳(coat)构成,故可把它们视为核蛋白分子。朊病毒甚至仅由蛋白质构成病毒感染敏感宿主细胞后,病毒核酸进入细胞,通过其复制与表达产生子代病毒基因组和新的蛋白质,然后由这些新合成的病毒组分装配(assembly)成子代毒粒,并以一定方式释放到细胞外。病毒的这种特殊繁殖方式称做复制(replication)。第一节概述1、特点一、病毒的特点和定义病毒是一类既具有化学大分子属性,又具有生物体基本特征;既具有细胞外的感染性颗粒形式,又具有细胞内的繁殖性基因形式
3、的独特生物类群。超显微的、没有细胞结构的、专性活细胞内寄生的实体第一节概述1、特点一、病毒的特点和定义单细胞微生物与病毒性质的比较aDNA病毒和RNA病毒中的一部分;b利福平可抑制痘病毒复制第一节概述2、定义一、病毒的特点和定义迄今仍无一个科学而严谨的定义病毒为具有独立于其宿主的进化史的绝对细胞内寄生物,它的DNA或RNA基因组被其所编码的蛋白质壳体化(encapsidation)。-------------(Fields等,1990年)非细胞生物(真)病毒:至少含核酸和蛋白质二种组分亚病毒(subvirus)类病毒(v
4、iroid):只含具侵染性的RNA组分拟病毒(virusoid):只含有不具侵染性的RNA组分朊病毒(prion):只含蛋白质二病毒的宿主范围第一节概述病毒几乎可以感染所有的细胞生物,并具有宿主特异性噬菌体(phage)、植物病毒(plantviruses)动物病毒(animalviruses)三、病毒的培养和纯化第一节概述同微生物学其他学科分支一样,病毒学的进步完全得益于研究方法和技术手段的发展。通过病毒的分离与纯化获得纯化的、有感染性的病毒制备物是病毒学研究和实践的基本技术。1、病毒的培养病毒的培养:二元培养物法四、病
5、毒的培养和纯化1、病毒的培养噬菌体细菌培养物培养液营养琼脂平板细菌培养液变清亮细菌平板成为残迹平板若是噬菌体标本经过适当稀释再接种细菌平板,经过一定时间培养,在细菌菌苔上可形成圆形局部透明区域,即噬斑(plague)。Microbiology双层平板法优点:①弥补玻璃皿底面不平的缺陷②所形成全部噬菌体斑都接近处于同一平面上③形成的噬菌斑较大,更有利于计数Microbiology噬菌斑四、病毒的培养和纯化1、病毒的培养动物病毒实验动物鸡胚多种细胞培养四、病毒的培养和纯化1、病毒的培养植物病毒敏感植物叶片产生坏死斑,或称
6、枯斑蛋白质提纯方法(盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、凝胶层析、离子交换等)四、病毒的培养和纯化2、病毒纯化标准纯化的病毒制备物应保持其感染性病毒是有感染性的生物体病毒具有化学大分子的属性纯化的病毒制备物的理化性质应具有均一性方法主要化学组成为蛋白质具有一定的大小、形状和密度差速离心梯度离心(超速离心)第二节毒粒的性质病毒是一类既具有化学大分子属性,又具有生物体基本特征;既具有细胞外的感染性颗粒形式,又具有细胞内的繁殖性基因形式的独特生物类群。毒粒(病毒颗粒):病毒的细胞外颗粒形式,也是病毒的感染性形式。一团能够自主复制的
7、遗传物质保护遗传物质免遭环境破坏,并作为将遗传物质从一个宿主细胞传递给另一个宿主细胞的载体。蛋白质外壳包膜第二节毒粒的性质一、毒粒的形态结构1、病毒的大小和形状个体小,必需在电镜下观察;不同病毒的毒粒大小差别很大;毒粒的形状:动物病毒有球状、卵圆状、砖形植物病毒有杆状、丝状、球状噬菌体有蝌蚪状和丝状采用各种电镜技术观察毒粒的形态结构Orfvirus:口疮病毒(接触性脓疱皮炎病毒)(负染技术)Ebolavirus:埃博拉病毒(正染技术)Vacciniavirus痘苗病毒(投影技术)甲型H1N1型流感病毒SARS病毒第二节毒粒
8、的性质毒粒的化学组成毒粒(化学组成)核酸;蛋白质;脂类;碳水化合物;基本化学组成病毒颗粒在化学上表现为核蛋白二、毒粒的化学组成1、病毒的核酸核酸是病毒的遗传物质;一种病毒的毒粒只含有一种核酸:DNA或是RNA;病毒核酸单链DNA(ssDNA,single-strandedDNA);双链DNA(dsDNA
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