病毒和亚病毒-微生物学(周德庆主编)

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1、第三章病毒和亚病毒了解病毒的特点和定义;病毒的结构、病毒大小、化学组成、病毒的寄主和种类以及病毒的群体形态特征。掌握病毒的一般增殖过程。掌握噬菌体、烈性噬菌体、温和噬菌体、溶源噬菌体的概念,认识和掌握噬菌体的结构、特点和功能;烈性噬菌体的增殖与溶菌;温和噬菌体与溶源性细菌的特点;噬菌体的效价和一步生长曲线;噬菌体的危害与防治措施。了解什么是亚病毒?亚病毒包括的类病毒、拟病毒、朊病毒等的特性。非细胞生物(真)病毒:至少含有核酸和蛋白质两种组分亚病毒类病毒:只含具单独侵染性的RNA组分拟病毒:只含不具侵染

2、性的RNA组分朊病毒:只含蛋白质一种组分一、概述(一)什么是病毒?病毒是超显微的,无细胞结构,专性活细胞内寄生,在活细胞外具一般化学大分子特征,一旦进入宿主细胞又具有生命特征。(二)特点:1、形体十分微小,能通过细菌滤器,电镜可见;2、无细胞结构,分子生物,由核酸和蛋白组成,且一种病毒仅含一种类型核酸;3、专性活细胞内寄生,有宿主专一性,无独立代谢酶系,依赖宿主自身复制;4、对抗生素不敏感,对干扰素敏感。(三)种类1、微生物病毒:侵染细菌、放线菌等原核微生物的病毒,通常称为噬菌体。2、植物病毒:3、脊

3、椎动物病毒:4、昆虫病毒:二、形态大小(一)大小个体极小,能通过细菌滤器,必须通过电镜观察,测量单位为nm,多在100nm左右。(二)形态1、个体形态——病毒粒子的形态病毒粒子是指成熟的、结构完整的和有感染性的单个病毒。一般为球状、棒杆状、蝌蚪状和线状等多种形态。人、动物和真菌的病毒大多呈球状,少数为弹状或砖状。植物病毒和昆虫病毒则多数为线状和杆状,少数为球状。噬菌体,部分呈蝌蚪状,部分线状或球状。2、群体形态(1)包涵体包涵体是病毒感染细胞后,宿主细胞内形成的一种在光学显微镜下可见的蛋白质小体。多为

4、圆形、卵圆形或不定形,在细胞中呈现的大小数量不一,多数位于细胞质内(质型多角体),少数位于细胞核内(核型多角体),也有的在细胞质和细胞核内都存在。应用:a.用于病毒病的辅助诊断;b.用于生物防治。(2)噬菌斑1)什么是噬菌斑?当一个噬菌体感染一个敏感细胞后,隔不久即释放出一群子代噬菌体,在固体培养基中,它们通过琼脂层的扩散又侵染周围的宿主细胞,并引起它们的裂解,如此经过多次重复,就出现了一个由无数噬菌体粒子构成的群体—噬菌斑,它是透亮不长菌的小圆斑,每一个噬菌斑是由一个噬菌体粒子形成的。2)噬菌斑的应

5、用:a.作为噬菌体的鉴定指标。b.用于纯种分离。c.计数——噬菌体效价的测定效价表示每毫升试样中所含有的侵染性的噬菌体粒子数,也即噬菌斑形成单位(pfu)。噬菌斑×稀释倍数噬菌体效价=裂解液毫升数双层平板法的优点:①弥补了原来底面不平的玻璃皿的缺陷;②每一噬菌班的大小接近、边缘清晰,且不致发生上下噬菌斑的重叠现象;③有利于计数。双层平板法(3)空斑和病斑在覆盖一薄层琼脂的一片单层细胞上,如某一细胞感染有病毒,则增殖后的病毒粒子只能扩散至邻近细胞,最终形成与噬菌斑相似的空斑。利用病毒空斑可对有活性的动物

6、病毒粒子进行计数。而病斑则是单层细胞受肿瘤病毒感染后,导致细胞剧增,形成类似与菌落的病灶。(4)枯斑指植物叶片上的植物病毒群体。三、病毒的结构与化学组成(一)病毒粒子的构造与化学组成1、化学组成多数病毒只含蛋白质和核酸两种成分。少数大型病毒还含有脂类和糖类。(1)核酸功能:遗传物质基础。1)核酸种类:病毒只含一类核酸——DNA或RNA。含DNA的病毒称为DNA病毒,含RNA的病毒称为RNA病毒。2)单链(ss)和双链(ds):RNA病毒多数是单链,极少数为双链,DNA病毒多数为双链,少数为单链。3)线

7、状和环状:4)正链和负链凡碱基排列顺序与mRNA相同的单链DNA或RNA,称(+)DNA链或(+)RNA链,凡碱基排列顺序与mRNA互补的单链DNA和RNA,称(-)DNA链或(-)RNA链。正链(+)核酸具有侵染性,负链(-)没有侵染性。5)核酸分段现象:每个节段都有自己独特的核苷酸序列,分别转录一种蛋白质。6)核酸含量:随病毒种类而异,通常在1%~50%之间。(2)蛋白质病毒的主要组成部分,其作用是构成病毒粒子外壳,保护病毒核酸免受核酸酶及其它因子破坏;决定病毒感染的特异性;决定抗原性。(3)其它

8、:类脂或脂蛋白,大多数存在于包膜中。2、病毒粒子的构造核心:由DNA或RNA构成核衣壳(基本构造)病毒粒子衣壳:由蛋白质构成包膜(非基本构造):由类脂或脂蛋白构成(二)病毒粒子的基本结构类型1、螺旋对称型—TMV呈直杆状,中空,核酸为ssRNA,其蛋白质衣壳由呈皮鞋状的衣壳粒一个紧挨一个一逆时针方向螺旋排列而成,而病毒RNA则位于衣壳粒内侧螺旋状沟中,以距轴中心4nm处以相等的螺距盘绕于蛋白质外壳中,每三个核苷酸与一个蛋白质亚基(衣壳粒)相结合,结构极其

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