张海森2植物组织逆境伤害程度测定

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1、植物组织逆境伤害程度的测定——电导法（实验37)教师处理材料（-20ºC,20min冷冻材料）学生进入实验室先洗试管教师将水浴锅及电导率仪打开农业生物学基础实验教学中心逆境伤害程度的测定方法：1紫外法：根据渗出物质对紫外的吸收2电导法:测定受损质膜外渗电解质的电导农业生物学基础实验教学中心实验原理植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择透性能力。逆境：高温、干旱、冻害、冷害、污染、酸雨当植物受到逆境影响时，细胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，以致植物组织浸入去离子水中，水的电

2、导将因电解质的外渗而加大。用电导仪测定外液的电导度增加值，求得伤害程度。农业生物学基础实验教学中心膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关，也与植物抗逆性的强弱有关。因此，电导法目前已成为作物抗性栽培、育种上鉴定植物抗逆性强弱的一个精确而实用的方法。农业生物学基础实验教学中心大叶扶芳藤叶片实验材料：农业生物学基础实验教学中心操作方法实验处理：正常植物叶片冷冻胁迫处理（-20℃），处理20min。洗刷试管，去离子水中含有吐温20农业生物学基础实验教学中心正常、冻害各取3个叶片，用去离子水洗净每叶片打取叶圆片9个，放到小烧杯中用去离子水冲洗；每支试管放

3、入9个叶圆片；加入15ml去离子水；放入塑料纱网（距液面1-2cm），用去离子水漂洗；2.步骤农业生物学基础实验教学中心放置到塑料烧杯中（不盖塞子），统一抽气15min。（设置空白1只试管）农业生物学基础实验教学中心4.电导仪测定初电导值S15.沸水浴15min（杀死植物组织），自来水冷却，用力摇1-2min后即可测定终电导S2（注意：沸水浴时需将塞子松动一下，以防加热后打不开）3.抽气后取出纱网，室温摇动20min（时间可以更长）农业生物学基础实验教学中心结果计算:（参照课本）相对电导度（L）=(S1-空白）/(S2-空白）冻害的伤害度（％

4、）=Lt－冻害处理的相对电导度Lck－室温对照的相对电导度农业生物学基础实验教学中心实验材料空白电导值处理初电导值(μS)终电导值(μS)相对电导度(L)伤害度(%)重复平均重复平均室温-20℃植物组织逆境伤害程度的测定记载表农业生物学基础实验教学中心实验步骤简图取材（各3片叶）打取叶圆片9片/管15ml蒸馏水/管集中抽气15min平衡20min测量S1煮沸15min冷却冷却摇匀测量S2农业生物学基础实验教学中心DDS-307型电导率仪操作规程1、打开电源开关，预热30分钟。2、仪器校准：将“选择”旋钮指向“检查”档，调节常数补偿旋钮到“1”

5、刻度线，调节温度补偿旋钮到“25”刻度线，然后调节“校准”旋钮，使仪器显示100.0μS/cm，校正完毕。按照电极上标明的电极常数，调节常数补偿旋钮，使仪器显示值与电极所标常数一致。农业生物学基础实验教学中心3、样品测定：将“选择”旋钮置于适合的量程位置。当测定过程中显示值熄灭时，说明测量值超出量程范围，此时应将选择旋钮置于高一挡量程。测定时电极完全浸没到溶液中。（如果试管口小，电极不能全部浸没时，可以全部加去离子水至20ml。）测定一个样品后用去离子水冲洗后，再用滤纸将电极表面的水份吸干后测定下一个样品。农业生物学基础实验教学中心问题与注意

6、事项1.叶片大小一致，防止打出不圆片使误差增大，并保证各重复来自同三个叶片。2.材料不可混放。3.抽气前，切记将纱网放入试管。纱网距离液面1-2cm，可以防止抽气时叶圆片翻出试管。4.抽气的目的。5.平衡时振荡的作用。6.温度对电导影响较大，故S1和S2应在相同温度下测定。7.CO2在水中溶解度较高，测定电导时要防止高CO2气源和口中呼出的CO2进入试管。8.测定时，电极要完全插入待测液中。且不可甩电极，防止碰破电极。测定一个样品后用去离子水冲洗后，再用滤纸将电极表面的水份吸干后测定下一个样品。9.蒸馏水中加吐温，洗仪器时出现泡沫。吐温作用：

7、阴离子表面活性剂，促进水分与叶片表面接触。吐温20－聚氧乙烯（20）山梨醇酐单月桂酸酯农业生物学基础实验教学中心下一个实验：五、植物叶片光合、蒸腾和呼吸速率的测定（实验19）六、植物叶片叶绿素荧光参数的测定（实验讲义）时间:第11周地点：B-125农业生物学基础实验教学中心