《生化原理基础》PPT课件

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1、生化基础部分用户服务部全球信赖的迈瑞Aworldtogether主要内容生化分析的对象生化分析的原理生化试剂的作用和组成生化仪如何算出结果一、生化仪分析的对象1、血液的组成2、生化项目的分类（临床性质）肝功能肾功能心肌酶谱糖尿病胰腺炎血脂痛风免疫性疾病3、生化项目的分类（化学性质）酶类底物代谢类无机离子类特种蛋白类第一部分小结1、生化仪分析血清中的化学物质。2、化学物质代表了人体的生理指标。二、生化仪分析仪的原理1、吸收光谱法光谱的范围补色的定义如果把两种光以适当比例混合而产生白光感觉时，则这两种光的颜色互为补色。/

2、nm颜色互补光400-450紫黄绿450-480蓝黄480-490绿蓝橙490-500蓝绿红500-560绿红紫560-580黄绿紫580-610黄蓝610-650橙绿蓝650-760红蓝绿吸光度定义，为透光率Lamber-Beer定律溶液的吸光度等于该物质的吸光系数ε、浓度C和光径L的乘积A=εCL吸收曲线吸收波长右图是几种不同浓度的KMnO4溶液的吸收曲线2、比浊法定义第二部分小结1、吸收光谱法和比浊法。2、生化仪是检测吸光度A的。三、生化试剂的作用和组成1、生化试剂的意义显色剂单一性2、生化试剂的分类NAD+-N

3、ADH系统p-NP（p-NA）系统H2O2偶联的指示系统抗原抗体反应指示系统其它显色反应NAD+-NADH指示系统NADH和NADPH在340nm有最大吸收峰，而NAD+和NADP+在340nm无吸收峰，利用其偶联的脱氢酶(工具酶)反应，根据340nm吸光度的变化，可以测定物质的浓度或活性。目前利用此指示系统进行测定的临床项目有：ALT、AST、CK、LDH、CK-MB、α-HBDH、Glu（己糖激酶法）、UREA、NH4+、CO2等。ALT（GPT）的测定原理R1：NADH、乳酸脱氢酶（LDH）R2：L-丙氨酸、α-

4、酮戊二酸ALTL-丙氨酸+α-酮戊二酸→丙酮酸+L-谷氨酸LDH丙酮酸+NADH+H+→L-乳酸+NAD++H2Op-NP和p-NA指示系统p-NP和p-NA在405nm有特征性吸收峰，根据405nm吸光度的变化，可以测定物质的浓度或活性。目前利用此指示系统进行测定的临床项目有ALP、r-GT、AMY等。ALP（AKP）的测定原理R1：AMP缓冲液、MgCl2；R2：对硝基苯磷酸盐ALP对硝基苯磷酸盐+H2O→磷酸盐+对硝基苯酚H2O2偶联的指示系统H2O2在过氧化物酶的作用下，可使单一个或成对的无色的色素原氧化成有色

5、的色素，导致某一波长吸光度的增加，因此可用来测定物质的浓度或活性。http://www.tecenet.com/天成医疗网目前利用此指示系统进行测定的临床项目有TC、TG、HDL-C、LDL-C、Glu（氧化酶法）、Cr、UA等。GLU的测定原理R1：4-氨基安替吡啉、抗坏血酸氧化酶R2：葡萄糖氧化酶（GOD）、过氧化物酶（POD）、酚。GOD葡萄糖+O2+H2O→葡萄糖酸+H2O2POD2H2O2+4-氨基安替吡啉+酚→醌亚胺+4H2O抗原抗体反应指示系统特异性抗体与抗原(待测物质)在相应的缓冲环境下反应生成抗原抗体

6、复合物，形成一定的浊度，导致特定波长透光率的改变。在抗体过剩的前提下，改变程度与抗原浓度成正比目前利用此指示系统进行测定的临床项目有apoAI、apoB、Lp(a)、IgG、IgA、IgM、C3、C4、CRP等载脂蛋白测定原理和临床意义测定原理：免疫透射比浊法，抗原抗体免疫复合物形成的浊度的大小在合适的抗体浓度下与抗原含量成正比R1（缓冲液）:磷酸盐缓冲液pH7.5　20mM，PEG，表面活性剂，防腐剂，稳定剂；R2（抗血清）:羊抗人apoAl（apoB）抗血清，防腐剂，稳定剂。抗原(血清中的apoAl,apoB)+抗

7、体(抗血清试剂)缓冲环境>抗原抗体免疫复合物其它显色反应（TP）测定原理：蛋白质中的肽键在碱性溶液中能与铜离子作用产生紫红色络合物，导致540nm吸光度的增加，增加的程度与蛋白质的含量成正比。碱性条件酞键+Cu2+→紫红色络合物其它显色反应（Ca）测定原理：甲基麝香草酚兰(MTB)在碱性条件下可与Ca2+形成红色络合物，引起612nm吸光度的上升，上升程度与Ca浓度成正比。碱性条件MTB+Ca2+→红色络合物第三部分小结1、不同的试剂和血清中不同的物质（项目）反应，导致了吸光度的变化。2、试剂有NAD+-NADH系统、

8、p-NP（p-NA）系统、H2O2偶联的指示系统、抗原抗体反应指示系统和其它显色反应。四、生化仪如何算出结果1、测定方法及反应度的计算测定方法反应度2、终点法定义和反应度的计算终点法的定义指经过一段时间的反应，整个反应达到平衡，所有的被测定物已转变为产物，反应液的吸光度不再增加（或降低），吸光度的增加（或降低）程度与被测定物的浓度