实验室拟南芥常用种植方法

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1、拟南芥实验室的常用种植方法刘金亮（西北师范大学，生命科学学院，730070）摘要：拟南芥由于其生活周期短，种植和生长不受季节限制，并且为自花受粉植物而作为实验最常用的模式植物，因此拟南芥如何能够在实验室较好较快地生长便成为实验成败的关键，由于拟南芥存在多种生态性，各实验室均有各自适合栽培种植的方法如在土壤，石英砂，琼脂等均可种植，但土壤种植种子萌发率低，生长过程中受其它方面影响大，故本方法重点介绍利用琼脂无菌培养基培养幼苗和移植相结合的方法，来快速种植拟南芥，该过程主要包括种子的处理，琼脂无菌培养基上种子的培养和幼苗的移植以及成熟后种子的保存。关键词：培养基配制；种子处理；种植；移植Abstr

2、act:TheArabidopsisisusedasamodelplantbecauseitslifecycleisshortandthegrowthisnotseasonlimitedaswellasself-pollination.Asforthosereasons,itisimportanttomaketheArabidopsisgrowingwellandrapidlyinlaboratory.OurexperimentwillsuccessornotdependingontheArabidoopsisgrowth.TherearemanymethodstocropArabidoops

3、isindifferentLabssuchasplantcropsonthesoil,quartzsand,agarandsoon.Buttheplantsgrowslowlyonthesoilandareinfluencedbymanyelements.Tosolvethis,weadoptthemethodusingtheagarculturemediumraiseseedlingandthentransplant.Thisprocessmainlyincludesseedtreatment,seedcultureonagarcultureandtransplant.Keywords：Cu

4、lturedispensing;seedtreatment;plant;transplant拟南芥（Arabidopsisthaliana）是十字花科拟南芥属植物,由于具有其它无法替代的特点，拟南芥是一种著名的研究有花植物的遗传、细胞、发育、分子生物学研究的模式植物，使得拟南芥在实验室中优化种植显得非常的重要。为了与国际接轨，近年来，国内已引入了拟南芥作为实验材料，室内培养不仅可以得到实验所需的材料，也可以打破自然环境对拟南芥生长的限制作用，掌握拟南芥实验室培养技术对顺利开展各种生理，分子生物学等方面的研究具有重要的意义。1培养基配制和种子处理1.1培养基的配制1.1.1培养基母液配制,如表一

5、：表一：MS培养基母液配制（单位：mg）母液成分规定量扩大倍数称取量母液体积配1L培养基编号种类（ml）吸取量（ml）KNO319001019000大量NH4NO3165010165001元MgSO·7HO3701037001000100素42KH2PO4170101700CaCl2·2H2O440104400MnSO4·4H2O22.31002230ZnSO4·7H2O8.6100860微2量H3BO36.2100620100010元KI0.8310083素Na2MoO4·2H2O0.0251002.5CuSO4·5H2O0.0251002.5CoCl2·6H2O0.0251002.5铁Na

6、2EDTA37.310037303盐100010FeSO4·4H2O27.81002780甘氨酸2.050100450010维盐酸硫胺素0.55025生素盐酸吡哆素0.55025烟酸0.55025肌醇（另配）100505000500101.1.2MS培养基的配制方法为了使植株能够很好的在培养基上成长，选用2.4%蔗糖，0.8%的琼脂（有利于在不伤根的情况下取出植株并进行移植）在培养基配制过程中先将蒸馏水，母液，琼脂混合，加蒸馏水至所需要的体积，然后高温加热并搅拌使琼脂完全溶解，溶液呈透明状时加入所需蔗糖，并搅拌溶解。在此过程中应不断补充蒸馏水，使总体积保持不变。溶解完成后，调节溶液PH，使PH

7、为5.8(1MKOH)，然后在琼脂凝固之前将药品分装，与实验中所用的培养皿，枪头，枪盒，蒸馏水等利用高压蒸气灭菌。1.1.3倒平板将灭菌后的药品及培养皿于无菌室中倒平板，平板厚度一般占培养皿厚度的1/3，不易过厚或过薄。过薄，点种子后水分蒸发快，培养基有可能干涸；过厚，种子发芽后，有可能使叶子浸入平板中，影响幼苗后期发育并且过厚平板易开裂。1.2种子处理1.2.1种子消毒处理在培养基中点样前，必须