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1、高效液相色谱法在石斛质量分析中的应用进展摘要：高效液相色谱法是60年代末发展起来的一项新技术，具有分离效能高，准确性好，分析速度快等优点。随着HPLC技术的不断发展，在石斛属植物的研究方面的应用也日益广泛，HPLC法在石斛属植物质量控制、指纹图谱建立以及有效成分的分离、化学成分测定中占有重要地位。关键字：高效液相色谱法;石斛;质量控制;指纹图谱研究;有效成分分离测定石斛属(DendrobiumSw.)是兰科植物中一个较大的属,全世界约1100种,广泛分布于亚洲、欧洲和大洋洲等地,我国有74种2变种,分布于秦岭以南诸地区,尤
2、其以云南、贵州为多[1]。在我国传统医学中,石斛为常用贵重药材,药用历史悠久,具有益胃生津,滋阴清热等功能,用于阴伤津亏,口干烦躁,食少干呕,病后虚热,目暗不明。现代药理学研究表明,石斛具有抑制肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力和扩张血管等作用[2]。《中华人民共和国药典》2000年版收载的石斛为环草石斛D.loddigesiiRolf,马鞭石斛D.fimbriatumHook.Var.oculafumHook,黄草石斛D.chrysanthumWall,铁皮石斛D.candidumWallexLindl,金钗石斛D.nobil
3、elindl。2010年版《中华人民共和国药典》中记载为兰科植物金钗石斛DendrobiumnobileLindl、鼓槌石斛DendrobiumchrysotoxumLindl、或流苏石斛D-endrobiumfimbriatumHook.var.oculatumHook.的栽培品及其同属植物近似种的栽培品的新鲜或干燥茎[3]。金钗石斛和鼓槌石斛茎形态特异分别呈扁圆柱形和呈粗纺锤形,易于区分;而以流苏石斛为代表的其他黄草类石斛茎呈长圆柱形,其近似种品种主要有叠鞘石斛D.aurantiacumRchb.f.var.denne
4、anum、束花石斛D.chrysanthum、报春石斛D.primulinum、玫瑰石斛D.crepidatum、兜唇石斛D.aphyllum、细叶石斛D.hancocki、密花石斛D.densiflorum等。由于金钗石斛和鼓槌石斛目前已明确其专属性成分,分别为石斛碱和毛兰素,2010版《中华人民共和国药典》分别针对其专属性成分制定了相应的鉴别及含量测定方法;而流苏石斛等其他石斛,由于种类较多,目前仅有以石斛酚为指标的薄层鉴别检查,尚无含量测定方法。此外,石斛药材商品规格十分复杂,其植物来源种类甚多,主要有细黄草、粗黄草
5、、大黄草和扁黄草等[4]。因此,迫切需要建立简便、灵敏和可靠的定量分析方法,以保证临床用药的安全。HPLC法是利用药用植物各组分在固定相和流动相中迁移速率不同而进行分离。植物各组分在色谱图上的色谱行为可用于植物鉴别。HPLC法不受样品挥发度和热稳定性的限制，几乎能够分析所有的有机、高分子及生物试样,具有流动相选择性广、重现性好、色谱柱可反复使用,分离效能高、分析速度快及应用范围广等特点[5],使HPLC法在中药质量控制、指纹图谱建立以及化学成分测定中占有重要地位。本文对高效液相色谱法在石斛属植物研究中的应用综述如下:1.高
6、效液相色谱法(highperformanceliquidchroma2tography.HPLC)在石斛质量控制中的应用。由于科学技术的迅速发展,各学科间的相互渗透,分析化学发生了巨大变化。药物分析已发展成为以仪器分析为主的现代药物分析。其中高效液相色谱法的应用,并以计算机技术应用于药物分析中为药物提供了准确、快速、灵敏的分离分析方法,使我们可以更有效地控制药品的质量。尤其是对于石斛属植物的质量控制,随着生物技术的发展使生药分析在分子水平的检测成为可能。高效液相色谱法广泛应用于石斛属的活性成分、药材真伪及制剂质量分析,为石
7、斛属植物质量标准的规范奠定了坚实的基础。1994年马国祥等[6]采用反相高效液相色谱法测定18种石斛类生药中chrysotoxene,erianin和chrysotoxinede的含量,结果表明大部分石斛中含有这3中成分或其中的1~2种,chrysotoxene含量最高的种类为报春石斛,erianin含量最高的种类为鼓槌石斛,而几乎所有的种类都不含或只含极微量chrysotoxin.E。上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室徐蓓等[7]以联苄类成分杓唇石斛素和石斛酚为指标成分,建立了采用HPLC进行石斛含量测定
8、的方法。采用反相C18色谱柱,以乙腈-0.01%三氟乙酸为流动相进行梯度洗脱。通过对18种不同来源石斛及18批商品石斛的含量测定,表明所建方法灵敏、准确、可靠,为中药石斛的质量控制提供科学依据。郝冉等[8]通过采用薄层色谱(TLC)法对石斛爽目软胶囊中的石斛、白芍及柴胡进行定性鉴别,并采用高效液相色谱(
