《恩普生化检验基础》PPT课件

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1、临床生化检验基础产品经理刘海明15889510353目录生化检验的概述生化检验的手段生化检验的对象生化检验的作用概述临床生化检验：主要是运用物理学、化学、生物物学等实验室技术和方法，通过感官、试剂反应、仪器分析和动物实验等手段，对病人的血液、体液、分泌液、排泄物等标本进行检验，以获得反映机体功能状态、病理变化或病因等的客观资料。标本种类：血液尿液脑脊液胸腹水精液对象胃液十二指肠液羊水唾液汗液组织液血液的组成血液标本的采集标本的处理标本的运输和保存血液的组成血液由血细胞和血浆组成的红色粘稠混悬液。血细胞：45％～50％血浆：50

2、％～55％水分：91％～92％蛋白质有机物无机盐代谢产物血液的组成血液标本类型：全血：离体血液立即与适量抗凝剂混合，轻轻混匀，则可避免凝固，从而得到抗凝全血。血浆：将抗凝全血在一定条件下将其离心沉淀后的上层浅黄色的液体。血清：离体血液自行凝固收缩析出淡黄色透明的液体。血清和血浆的区别：血清中缺少了凝血系统中的某些凝血因子（凝血过程中被消耗）如凝血因子Ⅰ（纤维蛋白原）、凝血因子Ⅱ（凝血酶原）、凝血因子Ⅴ（易变因子）、凝血因子Ⅷ（抗血友病球蛋白AHG）等。血液的组成分析物与血浆均值比较的差异血清与血浆差异的原因钾+6.2％细胞的溶

3、解、特别是血小板无机磷+10.7％来自细胞的释放总蛋白-5.2％纤维蛋白原的作用氨+38％血小板溶解、谷胺酰胺水解乳酸+22％细胞释放除了血小板溶解外，有时候血清高钾因溶血与极度的白细胞溶解有关（白细胞计数＞50G/L）。考虑到血小板对全血的影响，可以推算：血小板计数达100G/L，即平均使血清与血浆的钾含量差0.11mmol/L。血清与肝素血浆的差异（一）总蛋白白蛋白TSH转铁蛋白AST肌酸激酶总胆红素钠铁胆碱酯酶碱性磷酸酶直接胆红素甘油三酯LDH无机磷钾GGT三碘甲状腺素乳酸血清与肝素血浆的差异（二）标本的采集采血方法：毛

4、细血管法：血球计数仪、微量分析等。静脉采血法：生化检验常用，真实反应。动脉采血法：个别特殊检验，血气分析注意:生化分析仪测量CO2问题标本的采集静脉采血法注意事项：抽血姿势抽血时间饮食运动溶血脂血药物标本的采集溶血：必须避免（1）注射器和容器不干燥、不清洁；（2）压脉带捆扎时间太长，淤血过久；（3）穿刺不顺损伤组织过多；（4）抽血速度太快；（5）血液注入容器时未取下针头或用力推出产生大量气泡；（6）抗凝血用力振荡；（7）全血放置时间过久；（8）离心机速度过快。标本的处理抗凝剂：枸橼酸钠：出凝血疾病检验和ESR；草酸钠：出凝血疾

5、病检验；乙二酸四乙酸盐：EDTA-K2/Na2，血RT；双草酸盐：草酸钾（钠）/草酸铵，Ht等；氟化钠：适于血糖，抑制糖酵解、血清酶；肝素：多种生化分析，临床常用抗血栓药对部分生化项目有影响；标本的处理分离：用离心机在符合要求的转速下离心10min得到生化标本；转速选择：RCF＝1.118×L×（r/1000）2RCF：相对离心力，在生化检验分析中的标本相对离心力在1500～1800；L：离心半径，以mm计算，即离心管至旋转轴中心距离；r：转子每分钟转速。分离注意事项：转速不够，离心不彻底，不能很好的将血清分离，在血清中容易夹

6、杂纤维蛋白，在测试过程中容易堵针，影响测试。转速过高，容易造成溶血。例：10cm离心半径的离心机，我们要得到生化分析的合格标本，应选择3662～4012之间转速，离心10min即可。标本的处理标本的运输和保存运输：分离出的血清或血浆，运送过程中注意容器的密闭性、注意避光、避免剧烈震荡。保存：不能及时检测或需保留以备复查时，一般密闭存放于4～10℃冰箱中，以免水分蒸发造成标本浓缩或细胞内外交换影响结果。手段检测仪器检测试剂检测方法操作人员校准品检测仪器生化分析仪：进行设置参数、试剂位置、定标测试、质控测试后就可以上机测试标本。。

7、保证生化结果准确性的因素除包括样本质量外还包括整个检测系统的工作状态，检测系统的工作状态保持最佳，除了保证仪器所在实验室的环境，仪器参数的正确编制，配套校准品试剂的使用、定期校正、定期保养等都是保证检测质量的重要方面。检测试剂试剂的分类：干粉试剂：易保存、便宜，复溶瓶间差大，效期短，浪费；液体试剂：稳定性好，效期长，浪费少；双试剂：消除干扰物影响；试剂指示系统和化学原理NAD+－NADH(NADP+－NADPH)p-NP和p-NAH2O2偶联其它显色系统抗原抗体反应检测试剂NAD+－NADH(NADP+－NADPH)指示系统：

8、NADH和NADPH在340nm有最大吸收峰，而NAD+和NADP+在340nm无吸收峰，利用其偶联的脱氢酶(工具酶)反应，根据340nm吸光度的变化，可以测定物质的浓度或活性。目前利用此指示系统进行测定的临床项目有：ALT、AST、CK、LDH、CK-MB、α-HBDH、G