《微生物培养基》PPT课件

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1、微生物培养基第一节培养基选择和配制的原则第二节工业发酵培养基第三节培养基的灭菌第一节培养基选择和配制的原则培养基是人工配制的供微生物或动植物细胞生长繁殖和合成各种代谢产物所需要的、一定比例的多种营养物质的混合物，同时培养基也为微生物等提供除营养外的其他生长所必须的环境条件。培养基组成对菌体生长繁殖、产物的生物合成、产品的分离精制乃至产品质量和产量都有重要的影响。所有发酵培养基都必须提供微生物生长繁殖和产物合成所需的碳源、氮源、无机元素、生长因子、水和氧气等。大规模发酵生产中还必须重视培养基原料的价格和来源。一、培养基的类型和用途根据来源分：根据主要成分或使用目的分：根据生产工业的要求分：天然培

2、养基合成培养基半合成培养基基础培养基增殖培养基鉴别培养基选择培养基孢子培养基——供制备孢子用；种子培养基——满足菌种生长；发酵培养基——满足大生产中大量菌体生长和繁殖以及代谢产物积累营养不能太丰富，尤其是有机氮源；无机盐浓度要适量，否则会影响孢子量和孢子颜色；注意pH和湿度营养要求比较丰富和完全，氮源和维生素含量也要高一些除含有菌体生长所必须的营养物外，还要有产物所需的特定元素、前体物质和促进剂等二、培养基类型的选择从微生物的特点来选择液体和固体培养基选择从生产实践和科学试验的不同要求选择从经济效益方面考虑选择生产原料三、培养基的配制原则根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基注意速效碳（氮）

3、源和缓效碳（氮）源的配合使用，发挥各自的优势营养成分的恰当配比（C/N一般取100:0.2～2.0）渗透压，营养物质要有合适的浓度合适的pH值（注意生理酸性盐、生理碱性盐和缓冲剂的加入）氧化还原电位考虑营养成分的加入顺序，避免生产沉淀四、培养基成分配比的选择参照前人所使用的较适合于某一类菌种培养基的经验配方结合所用菌种和产品的特性采用摇瓶、玻璃瓶等小型发酵设备，对碳、氮、无机盐和前体等进行逐个单因子试验观察这些因子对菌体生长和产物合成量的影响综合考虑各因素的影响得到一个适合该菌种的培养基配方以得到高产正交试验设计——减少试验次数，确定培养基组分和浓度方差分析——了解哪些因素影响大，以引起注意四

4、、培养基成分配比的选择氮源过多，菌体繁殖旺盛，pH值偏高，不利于代谢产物的积累；氮源不足，菌体繁殖量少，影响产量。碳源过多，容易形成较低的pH值；碳源不足，菌体衰老和自溶。C/N不当影响菌体按比例吸收营养物质，直接影响菌体生长和产物形成。注意速效碳、氮源和缓效碳、氮源的相互配合，选用适当的C/N。一般发酵工业中C/N为100:（0.2～2.0）但对于氨基酸生产，由于产物中含氮较多，因此C/N就要适当调整，如100:（15～21）第二节工业发酵培养基消耗每克底物将产生最大的菌体得率或产物得率能产生最高的产品或菌体的浓度能以最大的速率产生产物副产品的得率最小价廉并具有稳定的质量来源丰富且供应充足易

5、于通气和搅拌提取、纯化、废物处理等生产工艺过程都比较容易在发酵工业中，必须使用廉价的原料来配制培养基，使之尽可能满足下列条件：发酵培养基例子代谢产物衣康酸赤霉素核黄素青霉素培养基甘蔗糖蜜，150g/L；ZnSO4，1.0g/L；MgSO4，3.0g/L；CuSO4，0.01g/L葡萄糖，20g/L；MgSO4，1.0g/L；NH4NO3，1.0g/L；KH2PO4，5.0g/L；FeSO4∙7H2O，0.01g/L；MnSO4∙4H2O，0.01g/L；ZnSO4∙7H20，0.01g/L；CuSO4∙5H2O，0.01g/L；玉米浆（干固形物），7.5g/L大豆油，20mL/L；甘油，20m

6、L/L；葡萄糖，20g/L；玉米浆，12mL/L；酪蛋白，12g/L；KH2PO4，1.0g/L葡萄糖或糖蜜，总量的10％；玉米浆，总量的4％～5％；苯乙酸，总量的0.5％～0.8％；猪油或植物油；消泡剂，总量的0.5％一、工业上常用的碳源碳源来源葡萄糖纯葡萄糖，水解淀粉乳糖纯乳糖，乳清粉淀粉大麦，花生粉，燕麦粉，黑麦粉，大豆粉等蔗糖甜菜糖蜜，甘蔗糖蜜，粗红糖，精白糖等在微生物发酵过程中，普遍以碳水化合物作为碳源。生产疫苗时通常用牛血清蛋白、牛肉汁等蛋白质作为碳源。酒精、简单的有机酸、烷烃等含碳物质也可作为碳源。甲醇作为底物生产单细胞蛋白（SCP）用烷烃进行有机酸、维生素等的生产碳源供给菌体生

7、命活动所需的能量和构成菌体细胞以及代谢产物。二、工业上常用的氮源无机氮源：氨水，铵盐，硝酸盐等有机氮源：玉米浆，豆饼粉，花生饼粉，棉籽粉，鱼粉，酵母浸出液等氮源主要构成菌体细胞物质，作为酶的组成成分或维持酶的活性，调节渗透压、pH、Eh等。工业上常用的氮源及含氮量（质量分数/%）氮源含氮量氮源含氮量大麦1.5～2.0花生粉8.0甜菜糖蜜1.5～2.0燕麦粉1.5～2.0甘蔗糖蜜1.5～2.0大豆粉