《微生物的培养基》PPT课件

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1、第三节微生物的培养基一、培养基的概念二、培养基的配制原则三、培养基的类型及应用四、培养基的配制过程重点:掌握培养基的概念、配制原则和类型。难点：学习选择和配制培养基一、培养基的概念培养基：按照微生物生长繁殖所需要的，用人工方法配制而成的适合于微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。用途：1.促进特定微生物的生长繁殖。2.用于微生物纯种的分离、鉴定。3.制造微生物制品。实现有效控制微生物生长繁殖前提条件是：合理配制培养基培养基应具有的条件：1.含有满足微生物生长发育的水分、碳源、氮源、生长因子及基本的离子（磷、硫、钠、钙、镁、钾、铁）及各种微量

2、元素。2.具有适宜的酸碱度(PH)。3.具有一定的缓冲能力及一定的氧化还原电位和合适的渗透压。一、配制培养基的原则1.选择适宜的营养物质根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。如：自养、异养①细菌--牛肉膏蛋白胨(普通肉汤)培养基；②放线菌--高氏1号合成培养基；③酵母菌--麦芽汁培养基，马铃薯蔗糖④霉菌--查氏培养基，马铃薯蔗糖2.控制营养物质浓度及配比合适（1）营养物的浓度浓度大--抑制作用，如高糖，盐；浓度小--不能满足微生物生长的需要。（2）营养物质配比--影响微生物生长繁殖和代谢产物积累。碳氮比（C/N=碳元素与氮元素）碳源过多-

3、-抑制作用；碳源过少--菌种衰老和自溶氮源过多—菌体生长旺盛，积累代谢产物少。氮源过少---菌体生长繁殖缓慢。谷氨酸发酵：C/N=4:l时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少。C/N=3:1时，菌体繁殖受抑制，谷氨酸大量增加。正常:细菌：C:N=6:1真菌：C:N=10:13.控制PH值各类微生物生长的最适pH各不相同。细菌：7～7.5放线菌：7.8～8.0酵母菌、霉菌：4.5～6.0生长和代谢--改变培养基pH。维持pH值的恒定方式：在培养基里加PH缓冲剂(6.4～7.2)或不溶性的碳酸盐。磷酸二氢钾(碱性)或磷酸氢二钾(酸性)PH=6.8（CaC

4、O3）4.原料来源的选择⑴微生物学实验--便于观察实验现象原料：选择易加工，使用方便的原料。碳源--试剂纯葡萄糖、蔗糖、淀粉等。氮源--蛋白胨、牛肉膏、酵母膏。⑵发酵生产原料--廉价且易于获得的原料生产酱油：碳源:麸皮氮源:豆粕。甲烷发酵—废水、废渣;人畜粪便及禾草常用的发酵工业原料：麸皮、米糠、玉米浆、酵母浸膏、酒糟、豆饼、花生饼等。５.选择适宜的灭菌处理方法获得纯种微生物，必须避免杂菌污染，需对所用器材和工作场所进行消毒与灭菌。培养基:高压蒸汽1.05kg/cm2(121.3℃，15～30min）不耐热含糖培养基:0.56kg/cm2(

5、112.6℃,15～30min)对糖要求较高的可用过虑除菌或间歇灭菌。高温灭菌（磷酸盐、碳酸盐与钙、镁铁离子）易产生沉淀的需加入螯合剂EDTA(乙二胺四乙酸)对于不同种类的培养基、内含不同杂菌的器具和场所等应当采用不同的灭菌方法。配制培养基的原则1.选择适宜的营养物质2.营养物质的浓度及配比合适3.控制培养基的PH值4.原料来源的选择5.选择适宜的灭菌处理方法二、培养基的种类及应用1.分类原因(1)微生物种类不同，需要的营养物质不同。(2)同一种微生物，培养或研究目的不同，配制的培养基也不同。2.分类角度按组成成分分：合成、天然、半合成培养基

6、按物理状态分：固体、半固体、液体培养基。按功能分：基础、选择、加富、鉴别培养基。按照培养微生物的种类分：细菌、霉菌、酵母菌、放线菌培养基。（一）根据培养基成分1.合成培养基又称限定性培养基，指由化学成分的营养物质（已知营养物质的成分的化学性质和数量）配制而成的培养基。优点:化学成分精确、重复性强。缺点:配制过程复杂，微生物生长较慢，价格昂贵。应用：实验室内，研究微生物营养、代谢、菌种选育、菌种鉴定、生物测定等定量要求较高的研究。2.天然培养基又称复杂培养基，采用动植物组织或微生物细胞或其提取物和粗消化产物制成的。营养物质来源于天然物质。天然物

7、质：牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、麦芽汁、玉米粉、马铃薯、牛奶和血清等。蒸熟的马铃薯、豆芽汁、麦芽汁--霉菌、酵母菌普通牛肉汤、酵母膏、牛肉膏、蛋白胨等--细菌。优点：配制方便，营养丰富，价格低廉。缺点：成分不稳定，营养成分难以控制，结果复重性差。应用：生产上大规模培养菌种。3.半合成培养基即有天然有机物，又有已知成分化学药品的培养基。在天然培养基的基础上适当加入无机盐类或在合成培养基的基础上添加某些有机物。如马铃薯蔗糖培养基。马铃薯蔗糖培养基成分:去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，水1000mL.优点：有效地满足微生物对营养物质的要求，适合大多数

8、微生物。应用：生产上、实验室（二）根据培养基的物理状态分1.固体培养基在液体培养基中加入凝固剂（1.5～2.0%的琼脂），使液体培养基凝固呈固体状态，或直接由天然的