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时间:2019-06-20
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1、第四章微生物培养基4.1培养基的类型4.2微生物的营养类型4.3培养基的营养成分4.4选用和设计培养基的原则和方法微生物的特点:食谱广、胃口大营养物质:那些能够满足微生物机体生长、繁殖和完成各种生理活动所需的物质营养:微生物获得和利用营养物质的过程营养物质是微生物生存的物质基础,而营养是生物维持和延续其生命形式的一种生理过程。微生物的营养要求微生物细胞的化学组成微生物细胞水:70%-90%干物质有机物蛋白质、糖、脂、核酸、维生素等及其降解产物无机物(盐)微生物、动物、植物之间存在“营养上的统一性”细胞化学元素组成:主要元素:碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、镁、钙、
2、铁等;微量元素:锌、锰、钠、氯、钼、硒、钴、铜、钨、镍、硼等。4.1培养基的类型4.1.1.按成份不同划分1)天然培养基(complexmedium)以化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物组成2)合成培养基(syntheticmedium)是由化学成份完全了解的物质配制而成的培养基,也称化学限定培养基(chemicallydefinedmedium)3)半合成培养基(semi-syntheticmedium)多数培养基配制是采用一部分天然有机物作碳源、氮源和生长因子的来源,再适当加入一些化学药品以补充无机盐成分,使其更能充分满足微生物对营养的需要。4.
3、1.2.根据物理状态划分固体培养基;半固体培养基;液体培养基;4.1.3.按用途划分1)基础培养基(minimummedium)在一定条件下含有某种微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基,也称为基本培养基。牛肉膏蛋白胨培养基就是枯草芽孢杆菌等的完全培养基2)完全培养基(completemedium)在一定条件下含有某种微生物生长繁殖所需的所有营养物质的培养基3)加富培养基和富集培养基(enrichmentmedium)在普通培养基(如肉汤蛋白胨培养基)中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基称加富培养基。这些特殊营养物质包括血液、血清、酵母浸膏、动植
4、物组织液等。用来培养营养要求比较苛刻的异养型微生物,如培养百日咳博德氏菌(Bordetellapertussis)需要含有血液的加富培养基。根据待分离微生物的特点设计的培养基,用于从环境中富集和分离某种微生物称富集培养基。(目的微生物在这种培养基中较其他微生物生长速度快,并逐渐富集而占优势,从而容易达到分离该种微生物的目的。)4)鉴别培养基(differentialmedium)5)选择培养基(selectivemedium)用于鉴别不同类型微生物的培养基特定的化学反应,产生明显的特征性变化,根据这种特征性变化,可将该种微生物与其他微生物区分开来。用于将某种或
5、某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基根据不同种类微生物的特殊营养需求或对某种化学物质的敏感性不同,在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质,抑制不需要的微生物的生长,有利于所需微生物的生长。4)鉴别培养基(differentialmedium)伊红和美蓝二种苯胺染料可抑制G+细菌和一些难培养的G—细菌。在低酸度时,这二种染料结合形成沉淀,起着产酸指示剂的作用。试样中的多种肠道菌会在EMB培养基上产生相互易区分的特征菌落,因而易于辨。例如大肠杆菌强烈分解乳糖而产生大量的混合酸,菌体呈酸性,菌落被染成深紫色,从菌落表面的反射光中还可看到绿色金属闪光。5
6、)选择培养基(selectivemedium)5)选择培养基(selectivemedium)4.1.4按在发酵过程中的地位来分1)孢子培养基营养要求不要太高所用无机盐浓度要适量要注意培养基的pH和湿度2.种子培养基中各种营养物质的浓度不必太高。供孢子发芽生长用的种子培养基,可添加一些易被吸收利用的碳源和氮源。2)种子培养基1.必须有较完全和丰富的营养物质,特别需要充足的氮源和生长因子。3.种子培养基成分还应考虑与发酵培养基的主要成分相近。3)发酵培养基培养基能够满足产物最经济的合成发酵后所形成的副产物尽可能的少资源丰富,价格低廉,性能稳定,便于采购运输,适于
7、规模储藏,最好本地生产能满足生产工艺要求4.2微生物的营养类型异养型生物自养型生物生长所需要的营养物质生物生长过程中能量的来源光能营养型化能营养型光能自养型:以光为能源,不依赖任何有机物即可正常生长光能异养型:以光为能源,但生长需要一定的有机营养化能自养型:以无机物的氧化获得能量,生长不依赖有机营养物化能异养型:以有机物的氧化获得能量,生长依赖于有机营养物质微生物营养类型(Ⅰ)微生物的营养类型(Ⅱ)1.光能无机自养型(光能自养型)能以CO2为主要唯一或主要碳源;进行光合作用获取生长所需要的能量;以无机物如H2、H2S、S等作为供氢体或电子供体,使CO2还原为细
8、胞物质;例如,藻类及蓝细菌等和植物一样
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