《HPV分型的检测》PPT课件

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1、www.youyijianyan.com宫颈癌筛查的首选人乳头瘤病毒（HPV）分型的检测制作人：刘海峰目　录宫颈癌与HPV关系HPV简介HPV的生物学特点HPV感染特点HPV基因分型检测原理HPV基因结构特点常用HPV检测方法HPV的基因分型HPV标本的采集处理与保存宫颈癌与HPV关系豪森，德国人，2008年10月诺贝尔奖获得者研究了人乳头状瘤病毒与宫颈癌的关系。据权统计，全球每分钟就有一例宫颈癌新发病例，每2分钟就有一名妇女死于宫颈癌，在中国每4分钟就有一例宫颈癌新发病例，每天约80名妇女死于此疾病。近年来宫颈癌患病呈上升趋势。哪些人群更容易患宫颈癌性生活过

2、早的妇女早孕多产或多次人工流产的妇女自身或性伴侣有多个性伴侣的妇女曾经货正患有生殖道HPV、单纯疱疹病毒、HIV感染或其它性传播疾病的妇女。吸烟、吸毒、营养不良的妇女有宫颈病变（长期慢性宫颈炎、宫颈癌前病变、宫颈癌、子宫内膜癌、阴道癌或外阴癌）病变的妇女感染途径1、性传播途径2、密切接触3、间接接触：通过接触感染者的衣物、生活用品等4、医源性感染：医务人员在治疗护理时防护不好，造成自身感染或通过医务人员传给患者5、母婴传播：是由婴儿通过孕妇产道的密切接触常见宫颈癌筛查方法的对比对比项目细胞学检查HPV检测（不分型）HPV基因分型检测范畴细胞形态学检查病原学检测病原学

3、检测灵敏度60﹪左右＞95﹪＞95﹪重复性低高高结果判读对阅片医生要求高，受主观因素影响大结果直观，受主观因素影响小结果直观，受主观因素影响小临床意义判断是否发生细胞病变，但低灵敏度易导致漏诊判断是否存在HPV感染，初步提示子宫病变风险分型检测能更好的提示宫颈病变风险：1.可以明确患者是否是同一基因型持续感染。2.不同基因型感染，临床处理不同。宫颈癌的首选—HPV检测与细胞学检查相比，HPV检测具有更高的敏度和重复性。国际权威机构—欧洲生殖感染和肿瘤研究组织推荐将HPV检测作为宫颈癌筛查的首选方法。简　介什么是人类乳突病毒？人类乳突病毒（HumanPapilloma

4、virus，简称HPV）是一种嗜上皮性病毒，有高度的特异性，长期以来，已知HPV可引起人类良性的肿瘤和疣，如生长在生殖器官附近皮肤和粘膜上的人类寻常疣、尖锐湿疣以及生长在粘膜上的乳头状瘤。像乙肝病毒一样，HPV也是一种DNA病毒。它原是多瘤空泡病毒科的一员，1999年国际病毒分类委员会（ICTV）取消多瘤空泡病毒科，代之以乳头瘤病毒科，因此，HPV便归属此门下。注：如何对待HPV感染？1.HPV感染较为常见2.多数HPV可以被清除,“一过性”感染不致宫颈病变3.少数持续性感染会引发宫颈病变4.HPV致CINI、CINII、CINIII到浸润癌需要相当长的时间，一般是

5、8~10年5.致宫颈癌的是高危型HPV6.HPV(+)只说明是一种感染，并非是一种疾病7.没有HPV感染可以不得宫颈癌,因此避免HPV感染可以避免发生宫颈癌8.目前治疗HPV感染的方针是“治病不治毒”,对于HPV感染的检查与治疗的轻视和过分恐惧都不适宜HPV的生物学特点1、HPV为小DNA病毒，通常引起生殖器疣、子宫颈及肛门、生殖道癌。目前已完全鉴别到的HPV有80种型，型与型之间的差异在于基因结构的不同，基因结构的差异决定其存在部位及可能导致的皮肤病变类型。2、乳头瘤病毒科的成员主要包括人乳头瘤病毒、牛乳头瘤病毒、狗口腔乳头瘤病毒、棉尾兔乳头瘤病毒、多乳房小鼠乳头

6、瘤病毒和鹿乳头瘤病毒。3、HPV呈球形，无包膜，20面体立体对称结构。HPV基因组是双链环状，以共价闭合的超螺旋、开放的环状DNA结构。HPV感染特点初次感染HPV大部分可自行消退。与病毒的侵袭能力和感染者的免疫状态相关，连续多次的HPV感染会引发女性子宫颈发生病变，并可能导致子宫颈癌。HPV感染后以整合和非整合两种状态存在于宿主细胞。性行为和年龄是两个HPV相关性肿瘤的高危因素。感染高峰年龄:17-33岁；每年新感染的病例，高峰年龄为20～24岁。HPV基因分型检测原理采用PCR体外扩增和DNA反向点杂交相结合的DNA芯片技术。利用HPV的基因特点设计特异引物，可

7、以扩增出23种HPV基因型的目标片段，再将扩增产物与固定在膜条上的包括18种高危型和5种低危型在内的分型探针进行杂交，依据杂交信号的有无来判断是否有这些HPV基因型的存在。HPV基因结构特点为双链环状DNA，长约8kb，由8个ORF框组成，按基因功能可分为长控制区（上游调控区）、早期基因区（E1、E2、E4-E7）编码六个早期蛋白和晚期基因区（L1、L2）编码两个晚期蛋白。E1、E2与病毒的复制有关，E6、E7是癌基因，分别与抑癌基因P53、pRb结合并导致其失活，这是高危型HPV感染与子宫颈癌发生的重要分子机制。L1、L2编码病毒的结构蛋白形成病毒外壳，L2蛋