医学生物化学课件1

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1、第十二章翻译Translation翻译----以mRNA为模板合成蛋白质第一节参与蛋白质生物合成的物质mRNA----模板rRNA----构成核糖体作为蛋白质合成场所tRNA----搬运工具氨基酸----原料蛋白质因子----(起始因子IF,延伸因子EF,释放因子RF,等等)酶----氨基酰-tRNA合成酶,转肽酶,转位酶,等无机离子----Mg++一、mRNA是翻译的直接模板原核生物与真核生物mRNA的区别多顺反子单顺反子5’端帽子结构3’端polyA尾巴三联体密码----mRNA上每三个相邻的碱基构成一个遗传密码,决定一种氨基酸.遗传密码的特点1.连续性:密码子

2、间紧密相连,密码子阅读从起点开始一直读到终点信号为止;插入或删去一个碱基,会产生移码作用,引起移码突变。一般遗传密码不重叠。ABCDEFG……..,应读为ABC,DEF,…..,很少有BCD,CDE的阅读2.简并性:许多氨基酸可由几组不同的密码子编码。这种由几组密码子编码同一种氨基酸的现象称密码的简并;可以编码相同氨基酸的密码子称同义密码子;色氨酸和甲硫氨酸只有一个密码子(UGG和AUG)3.摆动性:专一性由头两位碱基决定,第三位碱基的专一性不强,这种特性称“摆动性4.有起始子(AUG)和终止子(UAG,UAA,UGA)5.通用性:几乎所有生物都共用同一套密码。但线

3、粒体DNA则有所不同(如人线粒体):UGA不是终止密码子,而编码色氨酸;AGA和AGG不编码精氨酸,而是终止密码子二核糖体是肽链合成的场所核糖体由大、小亚基构成原核生物:70s(30s,50s)真核生物:80s(40s,60s)核糖体是蛋白质合成的场所。在细胞中以游离形式存在,或与mRNA结合成串联的多核糖体(原核生物),或与内质网结合而形成粗糙内质网(真核生物)。1、结构:由大、小两个在一定条件下可解聚的亚基构成(1)原核生物:30S小亚基---21种蛋白质和16SrRNA50S大亚基---34种蛋白质和5S、23SrRNA(2)真核生物:40S小亚基---30多

4、种蛋白质和18SrRNA;60S大亚基---50多种蛋白质和5S、23SrRNA2、结构模型:小亚基哑铃状,大亚基椅子状,相互结合形成结合面上的一大空隙;小亚基中的rRNA识别mRNA上多肽合成的起始位点,所以能与mRNA结合;大亚基上有两个tRNA位点:氨酰基位点(A位点)和肽酰基位点(P位点),所以能与tRNA非专一地结合。另外还有E位点(即空载tRNA的结合位点)。多聚核糖体在一条mRNA链上,多个核糖体呈串珠状排列(间隔80个核苷酸),多个核糖体同时在一条mRNA上进行翻译,大大加速蛋白质合成的速度,提高了mRNA的利用率三tRNA和氨基酰-tRNAtRNA

5、的反密码子环与mRNA的密码配对tRNA的3--端CCA--OH是氨基酸的结合位点氨基酰-tRNA合成酶具有绝对专一性校正活性氨基酰-tRNA的写法Arg-tRNAargfMet-tRNAfmet(原核)Met-tRNAimet(真核)Met-tRNAemet氨基酰-tRNA的合成(氨基酸活化)1、氨基酸-AMP-酶复合物的形成:RCHCOOH+ATP+合成酶RCHCO~AMP•合成酶+PPiNH2NH2氨基酸的羧基通过酸酐键与AMP上的5’-磷酸基相接,形成高能酸酐键2、氨基酸从复合物上转移到相应的tRNA上:氨基酰~AMP•合成酶+tRNA氨基酰-tRNA+合成

6、酶+AMP氨基酸的羧基通过酯键连接在tRNA3’-末端的AMP(-CCA3’)上反应中形成的PPi水解成正磷酸,所以对每个氨基酸活化来说,净消耗2个高能磷酸键合成酶对氨基酸有较高的专一性,包括:专一的氨基酸,只作用于L-氨基酸mRNA只对tRNA识别,与氨基酸无关密码子与反密码子的配对关系:反密码子中的碱基密码子中的碱基GU或CCGAUUA或GIA,U或CI:次黄嘌呤核苷(1)结构特点:起始密码子常为AUG,少数为GUG;起始密码子上游约10个核苷酸处有一段富含嘌呤核苷酸的序列(9-12bp):5’-AGGAPuPuUUUPuPuAUG-3’,称为Shine-Dal

7、garno序列,它与16SrRNA3’端的一段嘧啶核苷酸序列互补;(一)原核生物(大肠杆菌)翻译起始起始氨基酸是甲酰甲硫氨酸,起始的氨基酰-tRNA复合物是N-甲酰甲硫氨酰-tRNA(fMet-tRNAf),由甲酰化酶催化Met-tRNAf上甲硫氨酸的-NH2甲基化而成。第二节蛋白质生物合成过程一翻译的起始甲硫氨酰-tRNA与mRNA结合到核糖体形成起始复合物IF3,IF1,IF2,GDP+Pi(2)起始过程(起始复合物形成):mRNA在IF3和IF1(起始因子)参与下与核糖体小亚基结合形成mRNA-30S-IF3复合物→在IF2参与下与fMet-tRNAf和G

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