植物快速繁殖和脱毒

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1、1第七章植物快速繁殖和脱毒英东生命科学学院白音2愈伤组织根、芽诱导培养离体的植物器官、组织或细胞完整植株外植体脱分化再分化分化培养选择优良母株外植体表面消毒、接种移苗入土和入圃植物组织培养过程炼苗、驯化生长素、细胞分裂素37.2茎尖培养脱毒7.1植物快速繁殖的途径和方法7.5脱毒后防病毒再感染7.3茎尖以外其他途径脱毒(学生自学)7.4脱毒苗的鉴定主要内容47.1植物快速繁殖的途径和方法◆概念：利用离体培养技术，将来自优良植株的器官、组织和细胞进行离体培养，在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法（技术）称快速

2、繁殖rapidclonepropagation（无性繁殖propagationinvitro或微繁micropropagation），由于这种繁殖方式繁殖数量大、速度快，因此也称离体快速无性繁殖。5◆植物快速繁殖的类型器官型器官发生型胚状体发生型原球茎型6◆离体快速繁殖的程序无菌培养物的建立培养物的增殖生根培养炼苗和移栽鉴定（细胞学或形态学）7◆植物快速繁殖的应用①扩大繁殖珍稀植物资源和育种原始材料。②扩大繁殖经济效益高、但难于繁殖的植物。③用于有性繁殖变异范围大而自然条件下又不易无性繁殖的植物。④用于自然繁

3、殖极易感染病毒的植物。⑤繁殖销售量大、但一时用常规（分株、扦插、播种）方法，难以满足数量上需要的植物。87.2茎尖培养脱毒植物脱毒（viruselimination）：利用植物组织培养技术，脱除植物细胞中浸染的病毒，生产健康的繁殖材料。97.2.1认识病毒◆特点◆生活周期10◆植物病毒侵染寄主的主要途径①农业操作时的机械微伤②介体（昆虫、螨、线虫、真菌等）造成的微伤③通过嫁接、菟丝子“桥接”传播11香蕉束顶病马铃薯病毒◆病毒的危害：产量降低、品质退化柑橘黄龙病12◆植物患病毒病后主要表现三类症状①因叶绿体被破

4、坏或不能合成新的叶绿素而引起花叶、黄化或红化等症状。②植株发生矮化、丛生或畸形等。③形成枯斑或坏死等症状。13◆病毒在植物体内的运转方式长距离运转，通过寄主植物韧皮部的输导组织随着营养输送进行转移,速度很快。一旦病毒进入韧皮部，运转速度突然增快。例如：水稻条纹叶枯病毒运转速度为25cm/h。从细胞到细胞的短距离运转，经过细胞间的胞间连丝向邻近细胞中扩散，速度很慢。烟草普通花叶病毒运转速度为6-13μm/h。14◆病毒在植物体内的分布病毒在植物体内成不均匀分布，越靠近生长点的部位，病毒含量越低，生长点（约0.1

5、-1.0mm区域）则几乎不含或含病毒很少。15分生组织能逃避病毒的侵染，可能的原因是：分生组织中不存在维管束系统“病毒钝化系统”茎尖中存在高水平内源生长素旺盛分裂的分生组织中，代谢活性很高分生组织分化速度大于病毒传播速度茎尖生长活跃16◆依据：病毒在植物体内分布是不均一的，越接近生长点，病毒浓度越稀，因此有可以采用小的茎尖离体培养而脱除植物病毒。7.2.2植物茎尖培养脱毒法17◆原理：已知病毒是DNA大分子，病毒侵染植物后可进入植物细胞。当植物细胞分裂时，病毒DNA随着复制。植物细胞分裂和病毒繁殖之间存在相互

6、竞争，在迅速分裂的植物细胞中，是正常核蛋白合成占优势，而在植物细胞伸长期间，是病毒核蛋白合成占优势。18◆无病毒苗的获得幼苗茎尖的２～３cm小段冲洗1h左右表面消毒在双筒解剖镜下剥去幼叶，露出圆滑的生长点注射器针头或解剖针，切取带有1～2个叶原基的生长点培养基(ＭＳ或white)表面消毒剂、无菌水接种培养①茎尖剥离②组织培养选择优良母株19①同一种病毒在不同植物体内分布部位不同茎原基所带叶原基的数目与生长点（茎尖）大小的相关性例：苹果茎原基0.05－0.08mm茎原基带2片叶原基0.1－0.2mm茎原基带4片

7、叶原基0.3－0.4mm茎原基带6片叶原基0.6－0.8mm◆茎尖培养法脱除植物病毒的技术关键20②不同病毒种类在同一种植物中分布部位不同马铃薯：马铃薯卷叶病毒、Y病毒：1.0－3.0mm以内的茎尖中X病毒：0.2－0.5mm以内的茎尖中G病毒：0.2－0.3mm以内的茎尖中S病毒：0.2mm以下说明取茎尖培养时，培养不同大小茎尖，所脱除的病毒种类不同。21③茎尖越小对培养基的要求越高，成功率越低茎尖越小，茎尖内营养、水分越难长时间维持。因此对培养基营养组成，渗透压、酸碱度、激素种类及浓度要求也就越高。茎尖越

8、小，剥离技术要求越高。总之，采用茎尖培养脱毒法，必须将植物种类、病毒种类、剥离茎尖的大小以及培养基营养组成四个方面统一起来考虑，才能收到理想的脱毒效果。22◆影响微茎尖培养的因素①外植体大小②培养条件③外植体的生理状态237.2.3提高脱毒效果◆热处理脱毒法和茎尖脱毒法相结合。◆化学处理脱毒法和茎尖脱毒法相结合。24(1)热处理（高温处理、温热疗法）脱毒法原理：病毒是DNA大分子，病毒进入植物细胞后