番茄烟粉虱传双生病毒PCR检测

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1、维普资讯http://www.cqvip.com第l9卷1期中国病毒学67—_692004年2月VIR0L0GICASINICAFebruary20O4番茄烟粉虱传双生病毒PCR检测何自福，虞皓，罗方芳(广东省农业科学院植物保护研究所，广东广州510640)DetectionofWhitefly-transmittedGeminivirusesfromTomatobyPCRHEZi．fu，YUHao，LUOFang—fang(InstituteofPlantProtection，GuangdongAcademyofAgriculturalSciences

2、,GuangzhOU510640，ChinaJAbstract：Fromtheconservedregionsofthereportednucleotidesequencesofwhitefly—transmittedgeminiviruses(WTGV)，apairofdegenerateprimerswasdesignedtoannealtotheconservedsequence．Thetomatosamplesinfectedgeminivirus—likefromGuangdongweredetectedbyPCR．Theresultsshow

3、edthata356bpspecificfragmentwasamplifiedfromthesamples．Thespecificfragmentwasclonedandsequenced，andthesequencewascomparedwithallnucleotidesequencesinGenBankbyBlastofNCBI．TheresultshowedthatthefragmentbelongedtoGeminiviridaeDNA．SothedegenerateprimersmaybeusedtodetecttheWTGVfromtom

4、atoinGuangdong．Moreover，bothofthehomologyofthefragmentbetweenWTGVfromtomatoinGuangdongandthereportedWTGVintheworldandWTGVfromtomatoinGuangxiwereunder82％．TheseresultsimpliedthattheWTGVfromtomatoinGuangdongdifferedfromtheabove—mentionedWTGV．Keywords：Whitefly—transmittedgeminivirus(

5、WTGV)，PCRdetection，Sequenceanalysis关键词：烟粉虱传双生病毒：PCR检测：宁列分析中图分类号：$432．41文献标识：A文章编号：1003—5152(2004)01—0067—03烟粉虱传双生病毒(Whitefly．transmittedGemini—了弄清该病毒病在我省番茄等作物上的发生及为viruses．WTGV)病是世界番茄生产上重要病害之害情况，进而开展综合控制对策研究，从2001年一起，我们即开始对其进行研究。本文报道的是对该，已给美国、以色列、埃及、澳大利亚等国的番茄生产造成了严重损失，病原是一类具有孪生颗粒

6、病毒病检测方法研究。形态的单链环状DNA植物病毒，属双生病毒科1材料与方法fGeminiviridae)菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)，其基因组由2个组分(DNA—A和DNA—B)组成，1．1简并引物的设计每个组分的大小为2．5～2．8kb，少数病毒为单组分：已有研究I4，5j表明，烟粉虱传双生病毒DNA间由烟粉虱(Bemisiatabaci)以持久方式传播⋯。同源性较高。比较GenBank中已报道的烟粉虱传双据报道，目前该病毒病已在我国的广西、云生病毒DNA序列，根据其保守区序列，我们设计南[31等省发生。我们在』’。东菜区田问调查时也发

7、现，了I对简并引物，用于扩增该保守区的356bp片段。一些番茄植株上的病症与文献描述的双生病毒病简并引物序列分别为：CoPL5’>AA(AG)(AG)T症状十分相似，而烟粉虱自二卜世纪九卜年代中期fACT)TGGATGGA(CT)G(AG)(AGT)AA<3’(位于以来即在广东普遍发生。因而推测，烟粉虱传双生Begomovirus代表种BGMV—PRDNA的708nt-病毒病很可能已在广东番茄等作物上发生为害。为727nt)：CoPR5’>GA(AGCT)G(GC)ATG(ACT)GT收稿Et期：2003—06—12，修回Et期：2003—07一I1基金

8、资助：广东省自然科学基金(031992)；广东省农业科学院卜五”重点科技项目(2