临床生化实验室基本知识

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1、第三章生物化学检验实验室基本知识第一节实验用纯水天然水自来水实验用纯水经简单的物理、化学方法处理，除去悬浮物质和部分无机盐经蒸馏、电渗析等处理，除去杂质实验用纯水并非不含任何杂质，其质量高低直接影响到所配试剂的质量，影响实验结果的准确度和精密度。一、纯水的制备方法蒸馏法25℃时其电阻率为IX105Ω／cm左右离子交换法25℃时其电阻率为5X106Ω／cm左右电渗透法104－105Ω／cm炭吸附法除去有机物质超滤膜法除去悬浮物混合纯化系统二、水的纯度检查水的纯度检查首先用电导率仪测定其电导率或电阻率，然后可用特定试剂检测水中残留的Ca2+、Mg2+、CI、So4等成分的含量。临床

2、实验室用水，一般选用11级水，特殊实验如酶活性测定、电解质分析等应选用1级水，Ill级水用做仪器、器皿的自来水清洁后冲洗一般选用聚乙烯或聚丙烯桶（瓶）贮存，贮存时间不宜太长，使用时应避免一切可能的污染，切勿用手接触纯水或容器内壁第二节实验用玻璃仪器普通玻璃仪器的使用（略）二、普通玻璃仪器的清洗初用玻璃仪器的清洗使用过的玻璃仪器的清洗清洁液的配制和使用初用玻璃仪器的清洗新购买的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性物质，可先用肥皂水（或去污粉）洗刷再用自来水洗净，然后浸泡在l％～2％盐酸溶液中过夜（不少于4小时），再用自来水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2～3次，在100～130oC烘箱内烤干备

3、用。使用过的玻璃仪器的清洗容器类玻璃仪器如试管、烧杯、锥形瓶等。先用自来水洗刷至无污物，再选用大小合适的毛刷蘸取去污粉（掺人肥皂粉）或浸人肥皂水内。将器皿内外（特别是内壁）细心刷洗，用自来水冲洗干净后，蒸馏水冲洗2～3次，烤干或倒置在清洁处，干后备用。量器类玻璃仪器如吸量管、滴定管、容量瓶等。使用后应立即浸泡于凉水中，勿使物质干涸；然后用流水冲洗，除去附着的试剂、蛋白质等物质。晾干后浸泡在铬酸洗液中4～6小时（或过夜），再用自来水充分冲洗，最后用蒸馏水冲洗2～4次，晾干备用使用过的玻璃仪器的清洗其它具有传染性标本的容器，如病毒、传染病患者的血清等动污过的容器。应浸泡在杀菌剂（5

4、％煤酚皂溶液）中过夜，进行消毒后再清洗清洁液的配制和使用清洁液的配制和使用配制时，先将重铬酸钾溶于水中，加热助溶，待冷。然后将粗浓硫酸缓慢加人上液中，边加边搅拌，切勿过快，以免产生高热使容器破裂。不要把重铬酸钾溶液向硫酸中倾倒。配制时，根据用量选用烧杯或陶瓷缸作容器。清洁液的腐蚀性强，用时注意勿溅在皮肤和衣服上。它的吸水性较强，故应加盖贮存。如果清洁液的颜色逐渐变为绿色，表示效力降低，再加人适量的重铬酸钾和浓硫酸，还可继续使用；如已变成黑色，则不能再用。清洁液适用于事先清洗过但未能洗净的玻璃器皿，将水甩干后浸泡。未清洗或未消毒的器皿不要直接浸泡于清洁液中，否则会使清洁液迅速失效

5、，减低洗涤能力。第三节实验方法的选择实验方法选择的目的（略）实验方法的分级标准试剂的分级实验方法选择的原则（略）实验方法选择的步骤（略）实验方法的分级决定性方法参考方法常规方法决定性方法决定性方法（definitivemethod）准确度最高，系统误差最小；经过详细研究未发现产生误差的原因，其测定结果与“真值”最为接近。主要方法有重量分析法、中子活化法、同位素稀释一质谱分析法（ID－MS）等。由于技术要求太高，费用昂贵，这类方法不直接用于鉴定常规方法的准确性，只用于评价参考方法与一级标准品。国际上研究这类方法的实验室很少，美国、法国、德国、丹麦等国家有这类实验室参考方法参考方法

6、（referenc。method）是指准确度与精密度已经被充分证实，且经公认的权威机构（国家主管部门、相关学术团体和国际性组织等）颁布的方法。这类方法干扰因素少，系统误差很小，有适当的灵敏度、特异度、较宽的分析范围并且线性良好，重复测定中的随机误差可以忽略不计。参考方法能在条件优越的实验室作常规分析，主要用于鉴定常规方法，评价其误差大小、干扰因素并决定是否可以被接受；用于鉴定二级标准品和为质控血清定值；用于商品试剂盒的质量评价。常规方法常规方法（routinemethod）应具有足够的精密度、准确度和特异度，有适当的分析范围，经济实用，其性能指标符合临床或其它目的的需要。其中准

7、确度已经确定即已查明偏差方向和数量的方法称为偏差已知方法，而准确度不明者称为偏离未知方法。常规方法在作出评定以后，经有关学术组织认可，可以作为推荐方法临床生化检验部分项目的决定性方法、参考方法和常规方法见表3－5三、标准试剂的分级一级标准品二级标准品控制物一级标准品（原级参考物）它是已经确定的稳定而均一的物质，其数值已由决定性方法确定或由高度准确的若干方法确定，所含杂质已经定量。一级标准品都有证书，在美国由国家标准局（WBS）颁发证书，并指明其性质和有关数据。一级标准品用于校正决定性方法，评