饲料中转基因植物成份PCR检测方法

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1、ICS点击此处添加ICS号点击此处添加中国标准文献分类号中华人民共和国行业标准XX/TXXXXX—XXXX饲料中转基因植物成份PCR检测方法PCRProtocolforDetectionofGeneticallyModifiedPlantIngredientsinFeed点击此处添加与国际标准一致性程度的标识送审稿XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施发布前言本标准根据GB/T1.1-2009《标准化工作导则》中的要求进行编写。本标准代替SN/T1201-2003《植物性饲料中转基因成分定性PCR检测方法》本标准与SN/T1201-2003相比，主要技

2、术变化如下：----增加了植物的品种，由原标准的大豆、玉米和油菜扩展到水稻、棉花和小麦等；----增加了基因特异性筛查的范围，由原标准的6个外源基因扩展到12个外源基因；----增加了转基因品系鉴定的种类，由原标准的1个品系（抗农达转基因大豆RRS）增加到61个品系；----原标准采用普通PCR方法，本标准全部采用实时荧光PCR方法，方法更灵敏，检测更快速。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：深圳出入境检验检疫局。本标准主要起草人：章桂明、凌杏园、潘广、向才玉、程颖慧、康林、余道坚、龙海、郑耘、陈枝楠、杨伟东。本标准中如涉及国内已申请的

3、专利，专利持有人声明放弃在中国境内的使用。饲料中转基因植物成份PCR检测方法1　范围本标准规定了饲料中转基因植物成份的定性实时荧光PCR检测方法。本标准适用于饲料中大豆、玉米、水稻、油菜、棉花和小麦等转基因植物成份的定性检测和相关品系的鉴定。本标准同样适用于玉米酒糟粕转基因成份的定性检测和相关品系的鉴定。2　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法GB/T19495.2转基因产品检测实验室

4、技术要求GB/T19495.7转基因产品检测抽样和制样方法SN/T0798进出口粮油、饲料检验检验名词术语SN/T1193基因分析检测实验室技术要求3　术语、定义和缩略语下列术语和定义适用于本标准。3.1　术语和定义3.1.1　饲料（Feed）饲料，是所有人饲养的动物的食物的总称，比较狭义地一般饲料主要指的是农业或牧业饲养的动物的食物。3.1.2　实时荧光PCR（real-timefluorescentpolymerasechainreaction）实时荧光聚合酶链式反应是指在聚合酶链式反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，荧光信号的强

5、弱直接反映模板数量。3.2　缩略语Acp1(Acidphosphatase1)：酸性磷酸酶1基因。BAR（phosphinothricinacetyltransferasegene）：磷化麦黄酮乙酰转移酶基因。BnACCg8(acetyl-CoAcarboxylasegene)：油菜乙酰辅酶A羧化酶基因。bp（basepair）：碱基对。Btc（theconstructspecificDNAsequenceoftransgenicriceTT51-1andBtshanyou63）：转基因水稻品系TT51-1和Bt汕优63结构特异性基因序列。CaMV35S（35S

6、promoterfromcauliflowermosaicvirus）：来自于花椰菜花叶病毒的35S启动子。CP4-EPSPS（5-enolpyruvylshikimate-3-phosphatesynthasegene）：5-莽草酸-3-磷酸合成酶基因。CryIA(b)[asyntheticgeneencodedthefirst648aminoacids,insecticidal-activetruncatedproductidenticaltothatofCryIA(b)geneofBacillusthuringiensissubsp,Kurstakiste

7、ainHD-1]：苏云金芽孢杆菌结晶蛋白(Cry)I型毒素抗虫基因。CryIA(c)[asyntheticgeneencodedthe29to613aminoacids,insecticidal-activetruncatedproductidenticaltothatofCryIA(c)geneofBacillusthuringiensis]：苏云金芽孢杆菌杀虫毒蛋白cryIA(c)基因。CryIA（b)/CryIA(c)：苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白cry1A(b)和cryA(c)融合基因。Ct值（C：Cycle，t：threshold）：每个反应管内的荧光信号到

8、达设定的域值时所经历的循