中国药典2010年版－－显微鉴别法1

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1、显微鉴别法1简述药材及成方制剂显微鉴别法就是应用动植物细胞、组织学和矿物晶体光学等知识鉴别中药材或中成药的一种方法。通常是借助显微镜进行观察，故通称“显微鉴别法”。此法适用于：(1)药材性状鉴别特征不明显或外形相似而组织构造不同；(2)药材破碎不易辨认或区分：(3)药材呈粉末状或为成方制剂；(4)用显微化学方法确定药材中有效成分在组织中的分布状况及其特征。在进行显微鉴别时，首先要将“检样”制成适于镜检的标本。对于完整的药材可制成各种切面的切片，对于粉末药材(包括丸、散等中成药)可直接装片或作适当处理后制片。药材切片标本

2、的制作方法较多。在药材鉴定的研究工作中往往将其制成石蜡切片(永久切片)，因制成的石蜡切片外形较完整，厚薄均匀，且可制得连续切片，观察时方便，又能长期保存。但由于制片技术复杂，费时太多，不适于日常药检工作。所以在中药鉴定工作中通常采用滑走切片或徒手切片法制片，为观察叶类、花类及全草类药材的叶片、花冠、萼片、苞片等的表皮组织，还需要将其制成表面片，为清楚地观察比较坚硬的细胞组织，如导管、纤维、石细胞等的形态，往往还要进行“解离组织”后装片；观察花粉粒、孢子等的形态特征或构造，需用花粉粒与孢子制片法制片，观察矿物药或有些坚硬

3、的动物类药材如珍珠、石决明及动物骨骼，可采用磨片法制片。这些镜检标本片一般都是在观察前临时制备，故统称其为“临时制片技术”。2仪器和用具2.1仪器生物光学显微镜(最好具2.5X或4X物镜头及偏光镜)、显微描绘器、滑走切片机或徒手圆筒生物切片器、镜台测微尺、目镜测微尺、离心机。光学显微镜的构造1.机械部分、2.照明部分、3.光学放大部分1.机械部分：1）、镜座：基座，稳定和支持整个镜体。2）、镜柱：支持镜臂。3）、镜臂：支持镜筒，拿镜时握持此臂。4）、镜筒：5）、物镜转换器：物镜孔，可安装不同放大率的物镜。6）、镜台：7

4、）、调节器：分粗调和细调，细调在一圈范围内调2、照明部分：1）、反光镜(光源)：强时用平光镜，弱时用凹面镜。2）、聚光器3）、光圈光阑。3、光学放大部分1）、目镜：5X，10X，15X，内可放测微尺2）、物镜：低倍，镜筒短，筒径粗，5X。高倍，镜筒长，筒径细，40X，45X。油镜：镜筒最长，80X，85X。光学显微镜的使用（一）、低倍镜的用法1）、取镜：注意小心平稳轻放。2）、准备：3）、对光：4）、上片：注意有盖玻片的向上，注意取盖玻片时的拿法。5）、调节物距：注意先把低倍镜调至距玻片0.5厘米的样子——粗调——然后

5、缓慢使物镜上调，直至视野里出现可见物。注意两个要领：一是慢，二是距离只允许调大不允许调小。标本片与物象移动方向相反。如果调过了必须从头再来一次，直至视野里出现物象。（二）、高倍镜的用法用高倍镜的方法须在低倍镜取像的情况下，换高倍镜头，调节微调旋钮直至看清物象。调节范围在一圈以内。显微镜的维护①取镜时应一手紧握镜臂，一手平托镜座。安放好的显微镜就不要随意搬动。②使用前后，检查镜头和镜体，严禁随意拆卸。③保持清洁，避免灰尘和潮湿。避免阳光直射。远离挥发性和腐蚀性化学试剂。④镜筒下降时，眼睛一定要看着物镜。⑤使用显微镜时，一

6、定要稳重、谨慎、轻拿轻放。显微镜不要放在实验桌的边缘，以防跌落地面。⑥实验完毕，把显微镜擦拭干净。再转动镜头转换器，把两个物镜偏到两旁。最后把显微镜放进镜箱里，送回原处保存。2.2用具2.2.1放大镜、刀片、解剖刀、镊子(包括粗镊及眼科弯镊与直镊)、剪(眼科剪与手术剪)、解剖针。2.2.2载玻片、盖玻片。2.2.3吸湿器(即玻璃干燥器改装蒸馏水加微量苯酚，潮气润湿药材样品用)、培养皿或小烧杯(放切片用，切片后的处理均可在其中进行)、酒精灯、铁三角架、石棉网、滴瓶、试管、试管架、滴管、玻璃棒(粗与细)、乳钵、量筒。2.2

7、.4毛笔(从刀上刷取切片用)、铅笔(HB、4H、6H绘图用)、带盖搪瓷盘(装切片标本用)、纱布、吸水纸(滤纸)、火柴等。3试液3.1水合氯醛试液取水合氯醛50g，加水15ml与甘油10ml使溶解，即得。此液为透化剂，可使干缩的细胞壁膨胀而透明，并能溶解淀粉粒、树脂、蛋白质及挥发油等。3.2甘油醋酸试液(斯氏液)取甘油、冰醋酸与水各等份，混合即得。此液专用于观察淀粉形态，可使淀粉粒不膨胀变形，便于测量其大小。3.3甘油—乙醇溶液取甘油1份，50％乙醇1份，混合即得。此液为封藏液，用于保存植物材料及临时切片，有软化组织的作

8、用。3.4苏丹Ⅲ试液取苏丹Ⅲo.0lg，加90％乙醇5ml溶解后，加甘油5ml，摇匀即得。本液应置棕色玻璃瓶内保存，在2个月内应用。此液可使木栓化、角质化细胞壁及脂肪油、挥发油、树脂等染成红色或淡红色。3.5钌红试液取10％醋酸钠溶液1～2ml，加钉红适量使呈酒红色即得。本液应临用新制。此液可使粘液染成红色。3.6间苯三酚试液取间