水质总大肠菌群和粪大肠菌群(纸片快速法)检测方法确认表

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1、方法名称水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定（纸片快速法）申请人项目负责人员制定原因验证检测方法符合实验室要求、确保数据准确性与有效性方法适用范围适用于地表水、地下水及废水中的总大肠菌群和粪大肠菌群的快速测定。方法来源HJ755-2015《水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定纸片快速法》仪器、试剂和环境的要求1.仪器和设备1.1高压蒸汽灭菌器1.2培养箱1.3冰箱1.4采样瓶1.5试管1.6水质总大肠菌群和粪大肠菌群测试纸片2.试剂：2.1硫代硫酸钠2.2乙二胺四乙酸二钠采样和测试过程中，所用到的玻璃器皿需灭菌后方可使用。方法描述按MP

2、N法，将一定量的水样以无菌操作的方式接种到吸附有适量指示剂（溴甲酚紫和2,3,5-氯化三苯四氮唑即TTC）以及乳糖等营养成分的无菌滤纸上，在特定的温度（37℃或44.5℃）培养24h，当细菌生长繁殖时，产酸使pH值降低，溴甲酚紫指示剂由紫色变黄色，同时，产气过程相当的脱氢酶在适宜的pH范围内，催化底物脱氢还原TTC形成红色的不溶性三苯甲（TTF）。即可在产酸后的黄色背景下显示出红色斑点（或红晕）。通过上述指示剂的颜色变化就可对是否产酸产气作出判断，从而确定是否有总大肠菌群或粪大肠菌群存在，再通过查MPN表就可得出相应总大肠菌群或

3、粪大肠菌群的浓度值。检测结果的判断1.结果判读：（1）制片上出现红斑或红晕且周围变黄，为阳性。（2）纸片全片变黄，无红斑或红晕，为阳性。（3）纸片部分变黄，无红斑或红晕，为阴性。（4）纸片的紫色背景上出现红斑或红晕，而周围不变黄，为阴性。（5）纸片无变化，为阴性。2.结果计算：根据不同接种量的阳性纸片数量，查MPN表得到MPN值，按公式换算并报告1L水样中总大肠菌群或粪大肠菌群数：C=100*M/Q式中：C—水样总大肠菌群或粪大肠菌群浓度（MPN/L）M—查MPN表得到的MPN值(MPN/100ml)Q—实际水样最大接种量（ml

4、）100—为10*10ml，其中，10将MPN值的单位MPN/100ml转换为MPN/L，10ml为MPN表中最大接种量。3.结果表示：测定结果保留二位有效数字，大于等于100时以科学计数法表示，结果的单位为MPN/L。平均值以几何平均计算。附件说明表1运行说明经验证该方法符合我实验室使用。审批意见技术经理：日期：总经理：日期：表1