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《出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法_》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 SN0169-92代替ZBX09002一88 Methodforexaminationofcoliform,fecalcoliformandescherichiacoliinfoodforexport 1 主题内容与适用范围 本标准规定了出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌的检验方法。 本标准适用于出口食品的检验。 2 设备和材料 吸管:1mL,具刻度；5mL和10mL,具1mL刻度。 水浴箱：±℃。 培养箱：36±1℃,±℃。 冰箱:0～5℃和-15～-20℃出口食品
2、中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 SN0169-92代替ZBX09002一88 Methodforexaminationofcoliform,fecalcoliformandescherichiacoliinfoodforexport 1 主题内容与适用范围 本标准规定了出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌的检验方法。 本标准适用于出口食品的检验。 2 设备和材料 吸管:1mL,具刻度；5mL和10mL,具1mL刻度。 水浴箱：±℃。 培养箱：36±1℃,±℃。 冰箱:0～5℃和-15～-20℃。 均质器。
3、 乳钵和研棒。 平皿：直径90mm。 天平：感量。 显微镜。 稀释瓶：100mL、200mL和500mL三角烧瓶及广口瓶。 玻璃珠：直径约5mm。 菌落计数器。 3 培养基及试剂 月桂基硫酸盐胰蛋白(月示)(LST)肉汤。 煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤。 EC肉汤。 伊红美蓝琼脂(EMB)。 营养琼脂斜面。 色氨酸肉汤。 MR-VP培养基。 Korser氏枸椽酸盐肉汤。 结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)。 Butterfield氏磷酸盐缓冲稀释液。 生理盐水。 革兰氏染色液。 Kovacs氏靛基质试剂。 甲基红指示剂。 V
4、oges-proskauer(V-P)试剂。 4 样品制备 以无菌操作取有代表性的样品。如有包装则用75％乙醇在开口处擦拭后取样。若不能及时检验,应将冷冻样品置于-15℃保存；非冷冻而易腐的食品,应置于4℃冰箱保存。检验前冷冻样品可于2～5℃18h内解冻,或在45℃以下15min内解冻。 不同食品样品匀液的制备 液体食品以灭菌吸管取样25mL放入装有225mL稀释剂的灭菌玻璃瓶(瓶内预置适当数量的玻璃珠),以30cm幅度、于7s内振摇25次(或以机械振荡器振摇),制成1:10的样品匀液。 固体和半固体食品 以无菌操作取25g样品,放入装有225mL稀释剂的灭菌均质杯内,
5、于8000r/min均质1～2min,制成1:10样品匀液(也可用灭菌乳钵研磨的方法代替)。 稀释样品匀液根据对样品污染情况的估计,用稀释剂将样品匀液制成一系列十倍递增的样品稀释液,如10**-2、10**-3、10**-4……。从制备样品匀液至稀释完毕,全过程不得超过15min。 5 大肠菌群的测定 大肠菌群MPN值的测定 对每个样品,选择适宜的三个连续稀释度的样品稀释液。每个稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白(月示)(LST)肉汤,每管接种1mL。 将接种管置于36±1℃培养48±2h。 观察试管的产气情况：检查倒管内是否有气泡产生,记录在24h和48h内产气的LS
6、T肉汤管数。如所有LST肉汤管均未产气,则可报告为大肠菌群阴性；如有产气者,则进一步作证实试验。 大肠菌群的证实试验 将所有产气管用直径为3mm的接种环移种到煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤管中。 置BGLB肉汤管于36±1℃培养48±2h。 记录所有BGLB肉汤管的产气管数。 结果报告：按BGLB肉汤产气管数,查MPN表[见附录B(补充件)]报告每克(毫升)样品中大肠菌群的MPN值。 6 粪大肠菌群测定 用直径为3mm的接种环将所有48±2h内产气的LST肉汤管培养物移种于EC肉汤管中。 将所有接种的EC肉汤管在30min内放入带盖±℃水浴箱内,培养24±2h。
7、水浴箱的水平面应高于肉汤培养基液面。应以已知为℃产气阳性的大肠杆菌和℃不产气的产气肠杆菌或其他大肠菌群细菌作阳性和阴性对照。 记录EC肉汤管的产气情况。产气管为粪大肠菌群试验阳性；不产气管为粪大肠菌群试验阴性。 结果报告：按产气管数,查MPN表报告每克(毫升)样品中粪大肠菌群的MPN值。 7 大肠杆菌测定 将条中的EC肉汤管继续培养24h,取其产气管的培养物划线接种于伊红美蓝(EMB)平板,36±1℃培养2
