《转基因植物》课件

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3、因工程1944年确认了遗传的物质基础是DNA。1953年JWatson和FCricK提出了DNA双螺旋结构模型，1958年MMesselson和FＷStahl证实了DNA半保留复制的机制，揭示了生物界遗传性状能世代遗传的分子奥秘。重要的里程碑：双螺旋结构的确立1962年WSzybalski和ESzybalski用人类DNA去转化人类细胞,发现Ca2+有刺激DNA转移入细胞的作用，是人工转移遗传物质给其它细胞的第1次尝试。1965年,Jacobf基因操纵子.1968年,NirenbergM,遗传密码.

4、1967年Nirenberg提出遗传工程可用于人类的基因治疗。60年代分子生物学作为一门独立学科正式出现70年代初Graessmann和Dicumako莫定了用显微注射法转移基因。1972年Grahant等对磷酸钙介导的DNA转移过程进行了详细的研究，使这技术能被普遍接受和应用。1972年,P.Berg:构建第一个DNA重组分子2种病毒DNA的重组1973年,S.S.Cohen:第一个基因克隆实验基因工程的开始1977年，基因工程产品的出现H.W.Boyer,第一个基因工程产品(SS)somatos

5、tatin生长素释放抑素70年代出现基因工程并有初步成果基因重组技术80年代的代表性研究领域基因工程产品的开发应用定点突变的研究与应用癌基因的发现DNA-蛋白质分子相互辨认PCR技术的出现人类基因组计划开始酝酿90年代基因诊断技术渐趋成熟基因治疗合法化人类基因计划的启动分子生物学各分支学科的建立与发展从20世纪50年代起，分子生物学领域的研究成果共获得40项诺贝尔医学-生理科学奖，说明分子生物学在生命科学研究中的重要性根据桑格法开发的DNA自动定序机使一周（24小时运转）解读100万甚至几百万个碱基

6、成为可能。它为“人类基因组计划”立下了汗马功劳2021/7/19Copyright©Jiangyong理论基础DNA是遗传物质的证明DNA双螺旋结构和中心法则的确立遗传密码的破译工程技术基因转移载体的发现工具酶的发现DNA合成和测序技术的发现DNA体外重组的实现重组DNA表达实验的成功第一例转基因动物的问世PCR技术的发明基因工程：就是重组DNA技术，指在体外将不同来源的DNA进行剪切和重组，形成杂合DNA或称嵌合DNA分子，然后将其导入特定的宿主细胞，得到大量扩增和表达，使宿主细胞获得新的遗传特性

7、，产生新的基因产物。2021/7/19Copyright©Jiangyong已学：基因工程的“专用工具”基因的剪刀——限制性核酸内切酶基因的针线——DNA连接酶基因的运输工具——运载体分子手术刀----限制性核酸内切酶(限制酶)磷酸二酯键EcoRI、SmaI限制酶提醒①切割的化学键为磷酸二酯键。②在切割目的基因和运载体时要求用同一种限制酶，目的是产生相同的黏性末端。③将一个基因从DNA分子上切割下来，需要2个限制酶，同时产生4个黏性末端2021/7/19Copyright©Jiangyong限制性核

8、酸内切酶(限制酶)来源：主要从原核生物中分离化学本质：蛋白质作用：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。特性：特异性。即限制酶识别特定的脱氧核苷酸序列，切割特定位点切割后的DNA末端：黏性末端；平末端分子缝合针----DNA连接酶功能：将切下来的DNA片段拼接成新的DNA分子种类T4DNA连接酶：既能“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，也能“缝合”双链DNA的平末端（效率低）E·coliDNA连接酶：只能