淡色库蚊2f致倦库蚊对杀虫剂靶标抗性机制的分析

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1、安徽医科大学硕士学位论文目录中文摘要.................................................1英文摘要.................................................31前言...................................................62材料与方法.............................................72.1实验材料.......................................

2、..72.2实验方法........................................113结果..................................................173.1淡色库蚊和致倦库蚊对常用杀虫剂抗性的生物测定.....173.2致倦库蚊抗性靶标乙酰胆碱酯酶基因的研究...........213.3致倦库蚊抗性靶标钠离子通道基因的研究............304讨论..................................................385结论........

3、..........................................456参考文献..............................................47附录....................................................55致谢....................................................58综述....................................................60安徽医科大学硕士学位

4、论文淡色库蚊/致倦库蚊对杀虫剂靶标抗性机制的研究硕士研究生：赵明惠导师：赵彤言研究员中文摘要淡色库蚊（Culexpipienspallens）和致倦库蚊（Cx.pipiensquinquefasciatus）同属于尖音库蚊复合组（Cx.pipienscomplex），是我国主要的家栖蚊种，更是丝虫病和乙型脑炎的重要媒介。目前，化学防治仍为蚊虫综合防治的重要措施之一，拟除虫菊酯、有机磷和氨基甲酸酯三大类化学杀虫剂的广泛应用已经导致了淡色库蚊和致倦库蚊抗药性的发生和发展。有报道我国不同地区淡色库蚊和致倦库蚊对多种杀虫剂均产生了不同程度的抗性，因此迫

5、切需要对杀虫剂抗性的发生和发展进行深入研究。本研究以野外采集的淡色库蚊和致倦库蚊种群为研究对象，测定其生物抗性，并对其靶标基因乙酰胆碱酯酶基因和钠离子通道基因的突变进行了研究，分析基因突变频率与生物抗性之间的相关性，了解蚊虫种群与抗性相关的基因突变的现状，为蚊虫抗性治理提供新的靶标。本研究的主要结果如下：1.淡色库蚊和致倦库蚊自然种群抗性水平检测结果通过LC50的生物测定，发现各地理株蚊虫对不同类型杀虫剂均产生了一定的抗药性。5株致倦库蚊幼虫对敌敌畏的抗性倍数介于2.8-17.6倍；对残杀威的抗性倍数介于2.4-11.0倍；6株致倦库蚊幼虫对溴

6、氰菊酯的抗性倍数介于9-1019倍；对高效氯氟氰菊酯的抗性倍数介于14-1291倍。7株淡色库蚊和4株致倦库蚊成蚊对溴氰菊酯和氯菊酯的抗性均达到抗性水平。2.致倦库蚊靶标抗性基因上存在的基因突变通过分子克隆技术，发现自然种群致倦库蚊乙酰胆碱酯酶基因中存在5个基因突变，分别是V185M：GTG→ATG，G247S：GGC→AGC，A328S：GCC→TCC，A391T：GCC→ACC，T682A：ACA→GCA；钠离子通道基因存在6个位点上的7种基因突变，分别是V250M：GTG→ATG，R436K：AGG→AAG，M943V：ATG→GTG，I

7、973T：ATC→ACA，L1035F：TTA→TTT，L1035S：TTA→TCA，E1901D：GAG→GAT。另外，在钠离子通道上共发现11处可变剪接，这些可变剪接在丰富钠通道蛋白多样性方面也许会有一定的意义，但与拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性关1安徽医科大学硕士学位论文系有待进一步研究。3.致倦库蚊靶标抗性基因突变频率的计算通过基因测序，计算出各个位点基因突变的突变频率分别是：乙酰胆碱酯酶基因上的V185M：6.10%-25.0%，G247S：0.00%-18.1%，A328S：2.90%-47.2%，A391T：0.00%-54.3%，T6

8、82A：18.6%-51.6%；钠离子通道上的V250M：17.2%-33.9%，R436K：46.3%-50.0%，M943V：25.8%-41.9