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时间:2019-06-23
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1、端粒酶在大鼠脊髓脊髓胶质瘢痕中的表达及关系的试验研究杨明坤,盛伟斌,郭海龙,徐韬新疆医科大学第一附属医院脊柱外科1、国内外研究现状星形胶质细胞活化局部微环境脊髓胶质瘢痕形成和发展分子生物学水平国内外研究现状Haoxian[等:TransplantationofLow-PowerLaser-irradiatedOlfactoryEnsheathingCellstoPromoteRepairofSpinalCordInjuryinRats.结论-胶质瘢痕的形成和发展与相关细胞的分子生物学机制有关。Wu等:Correlation.oftheexpressionofhuman
2、telomerasesubunitwithtelomcraseactivityinanmalskinandskintumors.结论-肿瘤、组织瘢痕的发生与发展与端粒酶的高表达相关。Liu[等:HumantelomerasereversetranscriptasemRNAishighlyexpressedinnormalbreasttissuesanddown-regulatedinductalcarcinomainsitu。结论-TERTmRNA表达上调将启动TERT,从而导致端粒酶活性升高。实验动物由新疆医科大学动物中心提供;实验过程在新疆医科大学第一附属医院伦理
3、委员会的监督下进行;端粒酶的抑制采用RNA干扰,其质粒载体由美国Invitrogen公司合成。3、实验过程及结果造模过程中死亡4只大鼠,术后观察阶段死亡6只,以上死亡大鼠及时予以补充。术后未出现感染。最终共有120只大鼠进入结果分析。图1,2术后28d大鼠脊髓组织免疫荧光观察胶质瘢痕的形成(×100):GFAP标记(1a:为干扰组,1b干扰组,1c对照组)NF-200标记(2a:为干扰组,2b干扰组,2c对照组)本实验动物模型自发恢复曲线动力学特点和NYU装置制作的动物模型恢复曲线基本吻合。未干扰组BBB评分显著低于干扰组和对照组(P<0.001),干扰组低于对照组(
4、P<0.001)。提示脊髓损伤后抑制端粒酶的表达有促进大鼠后肢神经功能的恢复,也说明端粒酶参与了脊髓损伤胶质瘢痕的形成。4、讨论脊髓损伤后星形胶质细胞呈反应性增生,细胞肥大增殖、GFAP表达增加等现象,而NF-200很少表达,与Uchida等报道一致。这说明脊髓损伤后瘢痕形成是一个动态过程。TERTmRNA表达上调将启动端粒酶的表达,进而促进星形胶质细胞的活化,从而形成胶质瘢痕。经相关性分析发现与衡量瘢痕严重程度的GFAP表达呈正相关性(r=0.755,P<0.01)。免疫组织化染色:未干扰组端粒酶的表达显著高于其他两组,而其瘢痕形成也明显重于干扰组。端粒酶在脊髓胶质
5、瘢痕中呈动态表达,与衡量胶质瘢痕的程度的GFAP的表达呈正相关,提示端粒酶参与了胶质瘢痕的形成,可能是促进脊髓胶质瘢痕形成的重要原因;采取RNA干扰后,端粒酶在胶质瘢痕中的表达显著下降,但并未使胶质瘢痕显著减少,这说明端粒酶只是促进胶质瘢痕形成的一方面原因;胶质瘢痕的形成还有更深层次的生物学原因。
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