《疫学应用》课件

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1、第十五章免疫学应用教学目的：掌握：基于抗原–抗体反应的检测方法；免疫细胞的检测方法；人工（自然）主动免疫、人工（自然）被动免疫的概念。理解：基于抗原-抗体反应的特点及影响因素；免疫分子的检测原理；免疫细胞的检测方法与原理；以抗体、细胞和细胞因子为基础的免疫治疗了解：免疫分子的检测原理；免疫学诊断的原理、常用的免疫功能检测指标；免疫治疗制剂的类型和作用机制教学重点：基于抗原－抗体反应的检测方法及原理；人工（自然）主动免疫、人工（自然）被动免疫的概念。教学难点：抗原-抗体反应的特点及影响因素。使用教材：《医学免疫学》（第二版），龚非力主编，科学出版社，2007年。

2、参考教材：《医学免疫学》（第五版），金伯泉主编，人民卫生出版社，2008年；/主要内容第一节　基于Ag-Ab反应的检测方法第二节　免疫细胞的检测第三节　免疫分子的检测第四节免疫学预防第一节　基于Ag-Ab反应的检测方法抗原-抗体反应：指抗原与相应抗体在体内、外发生高度特异性结合反应。由于实验所用的抗体存在于血清中，故又称血清学反应（serologicalreaction)应用：用已知抗原检测未知抗体；用已知抗体检测未知抗原：定性或定量检测体内各种分子；用已知抗体检测半抗原物质。（一）特异性和交叉反应特异性：一种抗原通常仅能与由它刺激所产生的抗体结合。分子基础

3、：抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性。一、抗原-抗体反应的特点交叉反应（crossreaction）性：若两种抗原分子有一个或数个相同（或相似）的决定基，则针对一种抗原的抗血清可与另一种抗原发生反应。结合价：天然抗原分子表面一般含多种抗原决定基，可与多个抗体分子结合，为多价。单体形式的抗体分子有两个Fab段，能结合两个相同的抗原决定基，为两价。前带现象（prozone）和后带现象(postzone)Ab过剩和Ag过剩（二）抗原-抗体结合的带现象与可见性前带现象（prozone）和后带现象(postzone)Ab过剩和Ag过剩比例合适：若抗原、抗体的数

4、量比例合适，抗体分子的两个Fab段分别与两个抗原决定基结合，相互交叉连接成网格状复合体，则反应体系中基本不存在游离的抗原或抗体，此时形成肉眼可见的反应物（沉淀物或凝集物）。因此，确定反应体系中抗原、抗体的最适比例十分重要。抗原-抗体反应为分子表面的非共价结合，结合虽稳定但可逆。在一定条件下（如低pH、高浓度盐、冻融等），抗原-抗体复合物可被解离。解离后的抗原和抗体仍保持原有理化特性和生物学活性。根据此特点，可借助亲和层析法纯化抗原或抗体。（三）可逆性（一）电解质抗原和抗体有对应的极性基团，能相互吸附并由亲水性变为疏水性。电解质的存在使抗原-抗体复合物失去电荷而

5、凝聚，出现可见反应，故免疫学试验中多用生理盐水稀释抗原或抗体。二、抗原-抗体反应的影响因素（二）酸碱度抗原抗体反应的最适pH是6-8。（三）温度最适温度为37℃。有些例外，如冷凝集素在4℃左右与红细胞结合最好，20℃以上反而解离。（四）抗原和抗体的性质抗体的特异性和亲和力是决定抗原-抗体反应的关键因素。此外，抗原理化性质、抗原决定基多寡和种类等均可影响抗原-抗体反应。抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定基之间的结合能力亲和力(affinity)一个抗体分子与整个抗原分子间的结合强度亲合力(avidity)根据抗原的性质、结合反应的现象、参与反应的成分等因素

6、分类：（一）凝集反应（二）沉淀反应（三）补体参加的反应（四）免疫标记技术三、Ag-Ab反应的基本检测方法颗粒性抗原（细菌或细胞等）与相应抗体结合，在一定条件下，出现肉眼可见的凝集物，称为凝集反应(agglutination)。（一）凝集反应（AgglutinationTests）1．直接凝集（directagglutination)：细菌或红细胞与相应抗体直接反应，可出现细菌或红细胞凝集现象。2．间接凝集（indirectorpassiveagglutination)：检测针对可溶性Ag的Ab3．间接凝集抑制试验(directagglutinationinhi

7、bitiontest)4.协同凝集试验（co-agglutinationtest）1．直接凝集+Qualitativeagglutinationtest（定性凝集实验）AgorAbApplicationsBloodtyping（血型测定）Bacterialinfections（细菌性感染）PracticalconsiderationsEasy（简便）Semi-quantitative（半定量）2、间接凝集Definition-agglutinationtestdonewithasolubleantigencoatedontoaparticleApplicat

8、ionsMeasurementofan