《特殊染色》PPT课件

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1、第九章特殊染色一、特殊染色的概念及意义特殊染色为常规染色（即苏木素、伊红）的必要补充，又称选择性染色，只有相对的特异性，如PAS阴性反应它有糖元。意义：（1）特染能显示在常规染色切片中不明显的部分，如革兰氏染色、细菌染色。（2）区别HE染色中不能鉴别的组织病变，如VG染色区别胶元纤维和平滑肌。（3）显示某些常规染色中不能着色的物质，如网染才能显示网状纤维，常规HE染色是染不出来的。因此，特殊染色也是制片染色中不可缺少的组成部分，它在病理诊断常着辅助作用，也为科研提供依据。二、学习特染技术应掌握的重点（注意事项）（1）染色方法的成败，应该在温度、浓度、时间和PH

2、值等方面找原因。（2）注意特染的应用范围，如某种病变应用什么方法染色才能达到目的，一般先在HE切片所见的要求去选择适当的特染方法，一种或多种。（3）必须掌握各种特殊染色的结果，避免导致错误的结论或严重的误诊，如在网染时把胶元纤维误以为网状纤维。（4）尽量要阳性切片作对照，便于选择特染方法，并与HE切片作对照。（5）特染的组织，在其固定、脱水根据要求选择。所用的器皿都必须化学清洗。三、玻璃器皿的清洁在病理实验室可用的玻璃器皿，都必须经过清洗干净才能使用，清洗的方法依玻璃器皿的新旧而不同。1、新购玻璃器皿的处理对于新购买的玻璃器皿应先用洗衣粉浸泡洗刷，自来水冲洗后再

3、用1—2%盐酸水溶液浸泡数小时后，用自来水冲洗干净，必要时可用少量蒸馏水洗2次2、使用后玻璃器皿的处理每次使用后的玻璃器皿都必须及时彻底清洗干净，以供下次实验之用，如轻视这一步骤，可用的玻璃器皿不够干净，则会影响染色效果，甚至导致染色失败，特别在酶组化和银离子反应操作过程中更有严格的要求，使用后的玻璃器皿在一般清洗后，还要求用硫酸清洗液浸泡。硫酸清洗液配制重铬酸钾80g自来水1000ml浓硫酸（工业用）120m新配制的清洁液为红褐色，反复使用一段时间后，慢慢变成绿色，说明清洁液已失败，不能继续使用应重新配制。3、玻璃器皿的清洗方法①任何玻璃器皿都必须用自来水冲洗

4、，然后把残余药液或染液洗去。②用毛刷沾洗衣粉擦干净。③自来水冲洗，蒸馏水洗2次。④把晾干的器皿轻轻置入清洁液浸泡数日。⑤取出器皿，用自来水把器皿内外彻底冲洗干净，最后用蒸馏水洗2次。⑥把玻璃器皿倒置于有孔架上自然晾干或温箱中烤干，最后存放橱内备用。常用的特染第一节结缔组织染色一、胶元纤维染色（VG染色）㈠胶元纤维的分部组成成分胶原纤维是结缔组织中的三种纤维之一，分布最为广泛，含量最多。主要分布于真皮、腱、韧带、骨、透明软骨、动脉、肠壁、子宫和基底膜等。胶原纤维具有韧性大，抗拉力强的特点。胶原纤维单位主要由纤维母细胞合成。苦味酸—酸性品红法1．VG染液试剂配制1%

5、酸性品红10ml苦味酸饱和液90ml此液常分别配制临用时加以混合，不能久用。【染色步骤】（1）组织固定于10%早醛液中，常规脱水包埋（2）组织切片脱腊至水。（3）V-G染液2-5’（酸性品红1：苦味酸饱和液9）（4）倾去染液，无水酒精急速脱水，用滤纸吸干（5）二甲苯透明，中性树胶封片。【结果】胶元纤维呈红色，肌纤维、胞质及红细胞黄色。㈡胶元纤维染色应用胶原纤维染色在病理诊断上主要用于鉴定梭形、纤维形细胞肿瘤的组织来源；常常要在纤维、平滑肌和神经三者之中作出选择。观察动脉硬化的心脏，在HＥ切片中，心肌内散在的小疤痕灶和心肌均被染作红色，而作胶原纤维染色可将胶原

6、组织和肌肉上明显地区分开来。早期肝硬化用胶原纤维染色，也可使小叶之间少量增生的胶原纤维突出地显示出来。二、网状纤维染色㈠网状纤维染色的形态特点和染色原理网状纤维是网状结缔组织内的一种纤维。它由网状细胞产生，网状纤维细而有分支，穿行于细胞体和突之间，共同构成网状支架。这种纤维用HE染色一般不易辨认。若用银氨溶液浸染能使纤维变成黑色，故又称嗜银纤维。（二）网状纤维染色的原理网状纤维的染色方法很多，但是染色原理基本相同，有以下方面。（1）氧化使网状纤维具有选择性，不经氧化的切片，常用的氧化剂是高锰酸钾。（2）漂白一般采用2%草酸，漂白后无色（3）媒染多用2%硫酸铁氨

7、（俗称铁明矾）。这些试剂可增加网状纤维对银氨液的选择性。（4）浸银也称镀银，使银氨配位化合物与网状纤维结合，带正电荷的二氨合银Ag（NH3）+2被具有嗜银性物质的网状纤维吸附。（5）还原甲醛液是还原剂，能把与网状纤维结合的银氨配位化合物还原成棕黑色的金属银。（三）网状纤维纤维染色应用判定病变组织支架的破坏情况，组织、脏器网状支架的存在与塌陷、完整与破坏、网状纤维的分布及走行，有多少、粗细、疏密或有无断裂形态变化。⑴用于显示和鉴别肿瘤的性质和来源显示和区分癌与肉瘤来源于上皮组织的恶性肿瘤（癌）仅癌巢周围有网状纤维包绕，巢内癌细胞之间则没有网状纤维分部。来源于间叶组

8、织的恶性肿瘤（肉瘤），瘤