《检验技术离心机》PPT课件

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1、1第三章离心技术及仪器centrifugaltechniqueandcentrifuge2经典的分离分析技术：离心技术、电泳技术、光谱技术、色谱技术3离心现象是指物体在离心力场中表现的沉降运动现象。应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术称为离心技术（centrifugaltechnique）,实现离心技术的仪器是离心机（centrifuge）。前言概念:4离心技术的应用:主要用于各种生物样品的分离、纯化和制备低速离心机主要用于细胞、细胞核、细胞膜、细菌的沉淀和收集；高速离心机多用于制备和收集微生

2、物、细胞碎片、大的细胞器、硫酸铵沉淀物以及免疫沉淀物等；超速离心机已成为分离、提纯、鉴定、分析线粒体、微粒体、染色体、溶酶体、质粒、病毒、大分子核酸和高分子蛋白质56第一节离心技术原理第二节离心机结构第三节离心方法第四节高、超速离心技术主要内容7教学基本要求1.掌握离心技术的基础原理，常用的离心方法.2.熟悉离心机的分类与结构，各种离心机的临床应用3.了解离心机的维护、离心方法的进展8一、离心力二、相对离心力三、沉降系数四、沉降速度第一节离心技术原理9重力时间当悬浮液静置不动时，由于重力场的作用可使

3、得其中悬浮的颗粒逐渐下沉，下沉的速度与微粒的大小、形态、密度、重力场的强度及液体的黏度有关。如红细胞颗粒，直径为数微米，可以在通常重力作用下观察到它们的沉降过程。此外，物质在介质中沉降时还伴随有扩散现象。重力沉降：混合液静置一段时间后10扩散现象扩散是由于微粒的热运动而产生的质量迁移现象,主要是由于密度差引起的。对小于几微米的微粒如病毒或蛋白质等，它们在溶液中成胶体或半胶体状态，仅仅利用重力是不可能观察到沉降过程的，因为颗粒越小，与溶液密度越相近，扩散现象则越严重，而沉降越慢。扩散现象是不利于样品分

4、离的，如果加大重力，就可能克服扩散现象的不利影响,实现生物大分子的分离。11离心沉降：在离心机中，离心管（centrifugetube）放于离心转头里，当离心机开动时，离心管绕离心转头的轴旋转，作圆周运动，在离心管内的样品颗粒将同样运动。12假如颗粒处于真空中，颗粒会沿切线方向飞去,也就是当离心管由图中的0位转到1位时，颗粒到达离心管底部A位。对于离心管而言，样品颗粒由顶位移到了A位，也就是由离心管顶部移到了底部，这与重力场中的由高处落到低处相似。这种颗粒在圆周运动时的切线运动称为离心沉降.实际上颗

5、粒是在介质中运动的，颗粒作切线运动时将由于介质的摩擦阻力，使其在离心管中依图中虚线所示的曲线运动，当离心管由0位转到2位时，颗粒由顶位移到B位。介质的阻力越大，颗粒的沉降速度越小、沉降的距离也越短。旋转速度越大，颗粒的沉降越快。13在离心力场中加速度达到数万甚至数十万倍重力加速度时，颗粒的沉降也加快了同样的倍数。这就使得许多在重力场中不能沉降的细小颗粒及密度较低的物体组份能用离心技术进行分离纯化。5ml血液离心5分钟血浆血细胞14离心机工作原理:悬浮液在高速旋转下，由于巨大的离心力作用，使悬浮的微小

6、颗粒（细胞器、生物大分子的沉淀等）以一定的速度沉降，从而使溶液得以分离、浓缩和提纯，颗粒的沉降速度取决于离心机的转速、物质的沉降系数、颗粒的质量、大小和密度。血浆试管离心沉降物血液15一、离心力当物体所受外力小于运动所需要的向心力时，物体将向远离圆心的方向运动。物体远离圆心运动的现象称为离心现象。也叫离心运动。离心运动是由于向心力消失或不足而造成的。旋转离心力离心运动：16离心作用是根据在一定角速度下作圆周运动的任何物体都受到一个向外的离心力进行的。离心力（Fc）的大小等于离心加速度ω2r与颗粒质量

7、m的乘积，即：式中ω是旋转角速度，Ｎ(rpm)是每分钟转头旋转次数，r为离心半径(cm)，m是质量。离心作用、离心力：17二、相对离心力(relativecentrifugalforce，RCF)相对离心力是指在离心力场中，作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数，单位是重力加速度“g”。由于各种离心机转子的半径或离心管至旋转轴中心的距离不同，离心力也不同,因此在文献中常用“相对离心力”或“数字×g”表示离心力,例如25000×g,表示相对离心力为25000。只要RCF值不变，一个样品可以在不同的离心

8、机上获得相同的结果。一般情况下,低速离心时相对离心力常以转速“rpm”来表示，高速离心时则以“g”表示。=1.118×10-5×(rpm)2×rg为地球重力加速度(980cm·sec-2)18通常称离心管顶部到旋转中心的距离为最小离心半径rmin，该处承受的离心力场为最小离心力场；称离心管底部到旋转中心的距离为最大离心半径rmax，该处承受的离心力场称为最大离心力场。最小离心半径最大离心半径在计算时规定旋转半径均用平均半径“Rav”代替：19三、沉降系数微粒(分子)的