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《GB 4789.6-1994 食品卫生微生物学检验 致泻大肠埃希氏菌检验 》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中华人民共和国国家标准以食品卫生微生物学检验4789.6一94致泻大肠埃希氏菌检验储GB4789.6-R4MicrobiologicalexaminationoffoodhygieneExaminationofdlarrheogenicErcherichiacola1主肠内容与适用范困本标准规定了食品中致泻大肠埃希氏菌的检验方法。本标准适用于食品和食物中毒样品中致泻大肠埃希氏菌的检验。2引用标准GB4789.28食品卫生徽生物学检验染色法、培养基和试剂3设备和材料3.1天平:称取检样用。3.2均质器或乳钵。3.3温箱,36士1'C，42C.3.4水浴:
2、100'C,65-680C,50'C,3.5显微镜。3.6离心机。3.7酶标仪。3.8细菌浓度比浊管:MacFarland3号。3.9灭菌广口瓶:500mL,3.10灭菌三角烧瓶:500mL,250mL,3.11灭菌平皿:90mmX15mm,3.12灭菌试管:10mmX75mm,3.13灭菌吸管:1mL,5mL,3.14橡皮乳头。3.15载玻片。3.16酒精灯。3.17灭菌金属匙或玻璃棒。3.18接种棒，镍铬丝。3.19试管架，试管篓。3.20冰箱。3.21注射器:0.25mL，连接内径为1mm塑料小管一段。3.22灭菌的刀子、剪子、镊子。中华人民共和
3、国卫生部1994一03一18批准1994一09一01实施GB4789.6一943.23小白鼠:1-4日龄。3.24硝酸纤维素滤膜150mmX50mm,00.45dam,05用时切成两张，每张75mmX50mm，用铅笔划格，每格6mmX6mm，每行10格，分6行。灭菌备用。4培并墓和试剂4.1乳糖胆盐发酵管:按GB4789.28中4.9规定。4.2营养肉汤:按GB4789.28中4.8规定。4.3肠道菌增菌肉汤:按GB4789.28中4.18规定。4.4麦康凯琼脂:按GB4789.28中4.24规定。4.5伊红美蓝琼脂(EMB):按GB4789.28中4
4、.25规定。4.6三糖铁琼脂(TSI):按GB4789.28中4.26,4.27规定。4.7克氏双糖铁琼脂(KI):按GB4789.28中4.28,4.29规定。4.8糖发酵管(乳糖、鼠李糖、木精和甘露醉):按GB4789.28中3.2规定。4.9赖氨酸脱v酶试验培养基:按GB4789.28中3.12规定。4.10尿素琼脂(pH7.2):按GB4789.28中3.15规定。4.11氰化钾(KCN)培养基:按GB4789.28中3.16规定。4.12蛋白陈水、靛基质试剂:按GB4789.28中3.13规定。4.13半固体琼脂:按GB4789.28中4.3
5、0规定。4.14Honda氏产毒肉汤:按GB4789.28中4.34规定。4.15Elek氏培养基:按GB4789.28中4.35规定。4.16氧化酶试剂:按GB4789.28中3.18规定。4.17革兰氏染色液:按GB4789.28中2.2规定。4.18致病性大肠埃希氏菌诊断血清、侵袭性大肠埃希氏菌诊断血清、产肠毒素大肠埃希氏菌诊断血清、出血性大肠埃希氏菌诊断血清。4.19产肠毒素大肠埃希氏菌LT和ST酶标诊断试剂盒。4.20产肠毒素LT和ST大肠埃希菌标准菌株。4.21抗LT抗毒素。4.22多粘菌素B纸片:3001U,016mm,4.230.1Yo
6、硫柳汞溶液。4.242%伊文思蓝溶液。5检验程序致泻大肠埃希氏菌检验程序如下:GB4789.6一94检样侧大肠菌群MPN25g+营养肉汤污染严重的检样匀液3611*C{6h乳糖发醉阳性的发醉管肠道菌增菌肉汤EMMBA36士1C{18-24h乳搪发薛或不发醉的菌落3-5个，级化脸一革兰氏阴性杆菌TS1,靛基质.PHI.2尿素、KCN,核氨酸、动力TSI1k层十，H,S-,非如左述的KCN-,尿众一各种反应结果血清学试验ETEC+EPEC十或ETEC+非如左述的EHEC+(0157)各种结果赖氮酸一，桩基质+，动力一(0124动力+/一)肠毒素+肠道致病性
7、大肠埃希氏菌或肠道出血性大肠埃希氏菌产肠毒素大肠道侵袭性非致泻大非大肠肠埃希氏菌大肠埃希氏菌肠埃希氏苗埃希氏菌报告6操作步骤6.，增菌样品采集后应尽快检验。除了易腐食品在检验之前应预冷藏外，一般不冷藏。以无菌手续称取检验25g，加在225mL营养肉汤中，以均质器打碎1min或用乳钵加灭菌砂磨碎。取出适量，接种乳糖胆盐175Ge4789.6一94培养基，以测定大肠菌群MPN，其余的移入500mL广Q瓶内，于36士1℃培养6h。挑取1环，接种于1管30mL肠道菌增菌肉汤内，于42℃培养18h,6.2分离将乳糖发酵阳性的乳糖胆盐发酵管和增菌液分别划线接种麦康
8、凯或伊红美蓝琼脂平板;污染严重的检样，可将检样匀液直接划线接种麦康凯或伊红美蓝平板，于36士1
