DB51T 1080-2010 饲料中玉米赤霉烯酮的测定 高效液相色谱法

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1、ICS备案号：28170-2010DB51四川省地方标准DB51/T1080—2010饲料中玉米赤霉烯酮的测定高效液相色谱法DeterminationofzearalenoneinfeedsHigh-performanceliquidchromatography2010-06-01发布2010-07-01实施四川省质量技术监督局发布DB51/T1080-2010目次前言…………………………………………………………………………………………………………II1范围……………………………………………………

2、……………………………………………………12规范性引用文件……………………………………………………………………………………………13原理…………………………………………………………………………………………………………14试剂和溶液…………………………………………………………………………………………………15仪器与设备…………………………………………………………………………………………………16试样制备……………………………………………………………………………………………………27分析步骤……………

3、………………………………………………………………………………………28结果计算……………………………………………………………………………………………………29精密度………………………………………………………………………………………………………2附录A…………………………………………………………………………………………………………3IDB51/T1080-2010前言本标准的附录A为资料性附录。本标准由四川省畜牧食品局提出并归口。本标准由四川省质量技术监督局批准。本标准由四川省饲料工作总站负责起草。

4、本标准起草人：柏凡、赵立军、李云、高庆军、魏敏、张静。IIDB51/T1080-2010饲料中玉米赤霉烯酮的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了测饲料中玉米赤霉烯酮的含量的高效液相色谱法(HPLC)。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料及饲料原料的测定。本标准中检出限为0.1mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB

5、/T14699.1饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备3原理试样经纯水提取，离心、过滤后，取滤液经过免疫亲和柱净化，浓缩，用高效液相色谱仪-紫外检测器检测，外标法计算玉米赤霉烯酮含量。4试剂和溶液除特殊说明外，所有试剂均为分析纯，色谱用水符合GB/T6682一级用水的规定。4.1乙腈：色谱纯。4.2甲醇：色谱纯。4.3氯化钠：分析纯。4.4提取液：乙腈+水=90+10（体积比）。4.5玉米赤霉烯酮标准品：含量大于98%。4.5.1标准贮备液：精密称取10mg玉米赤霉烯酮标准品，用乙腈溶解、

6、定容至100mL，此贮备液浓度为100µg/mL，置于冰箱中2℃～8℃保存，有效期6个月。4.5.2标准工作溶液：分别准确移取玉米赤霉烯酮贮备液，用流动相配制成标准工作溶液：0.01µg/mL，0.1µg/mL，0.5µg/mL，1.0µg/mL，2.0µg/mL，5.0µg/mL。置于冰箱中2℃～8℃保存，有效期1个月。注意：注1:凡接触玉米赤霉烯酮的容器，需浸入4%次氯酸钠（NaOCl）溶液，放置半天后清洗备用。注2:为了安全，分析人员操作时须带上医用乳胶手套，在通风橱内操作。4.6玉米赤霉烯

7、酮免疫亲和柱。5仪器与设备5.1分析天平：感量0.1mg。5.2超声波清洗器。5.3离心机：转速为5000r/min以上。5.4超纯水处理器。5.5涡旋混合器。1DB51/T1080-20105.6高效液相色谱仪：配备紫外检测器。5.7氮吹仪。5.80.45µm滤膜。6试样制备按GB/T14699.1规定采集试样后，按GB/T20195规定，选取具有代表性的实验室样品1kg，四分法缩减分取200g左右，粉碎过1mm孔筛，混匀装入磨口瓶中备用。7分析步骤7.1试样溶液的制备7.1.1提取称取20g试

8、样(精确至0.01g)于锥形瓶中，加入2g氯化钠（4.3），50mL提取液（4.4），超声提取20min，离心，取上清液过滤，取1mL上清液用蒸馏水稀释至10mL，稀释液待净化。7.1.2净化将免疫亲和柱底帽除去。剪去亲和柱的盖帽，与10mL注射器连接。待免疫亲和柱中缓冲液排出后，精确吸取上述稀释液1.0mL～2.0mL过免疫亲和柱（流速1-2滴/秒），再用5mL蒸馏水淋洗柱子，抽干柱子，用2mL甲醇洗脱，收集洗脱液于50℃水浴中氮气吹干，准确加入流动相1000µL，涡旋30s，过