《GBT19540-2004-饲料中玉米赤霉烯酮的测定》.pdf

《《GBT19540-2004-饲料中玉米赤霉烯酮的测定》.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、ICS65.120B46荡黔中华人民共和国国家标准GB/T19540-2004饲料中玉米赤霉烯酮的测定Determinationofzearalenoneinfeeds2004-06-10发布2004-10-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布中国国家标准化管理委员会GB/T19540-2004IN舌本标准参考国内外有关标准、文献，经研究、改进和验证后制定。本标准非等效于AOAC(美国公职分析化学家协会)1988年最后通过的玉米中玉米赤霉烯酮的薄层色谱法和1994年首次通过的玉米、大麦、

2、饲料中玉米赤霉烯酮的酶联免疫吸附测定法。其中薄层色谱测定方法为仲裁方法，酶联免疫吸附测定方法为快速筛选方法。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。本标准由江苏省微生物研究所负责起草。本标准主要起草人:毖晓黎、丁贵平、李利东、袁建兴、成恒篙.GB/T19540-2004饲料中玉米赤霉烯酮的测定范围本标准规定了玉米赤霉烯酮(zearalenone，以下简称ZEN)的薄层色谱测定方法和酶联免疫吸附测定法。本标准适用于配合饲料和饲用谷物原料中ZEN的测定。薄层色谱测

3、定方法的最低检测量为20ng,酶联免疫吸附测定方法的最低检测量为。.25ng,2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1怕料果样古洛薄层色谱法(仲裁法)3.1原理试样中ZEN用三氯甲烷提取，提取液经液一液萃取、浓缩

4、，然后进行薄层色谱分离，限量定量，或用薄层扫描仪测定荧光斑点的吸收值，外标法定量。3.2试剂与材料所用试剂除另有规定，均使用分析纯试剂水符合GB/T6682中一级水的规定。3.2.1三氯甲烷。3.2.240g/L氢氧化钠溶液:称取4g氢氧化钠，加水适量溶解，用水稀释至100m工。3.2.3磷酸溶液(1+10).3.2.4磷酸溶液(1+19)。3.2.5无水硫酸钠:650℃灼烧4h，冷却后贮于干燥器中备用。3.2.6展开剂:三氛甲烷一丙酮一苯一乙酸(18+2+8+功。3.2.7显色剂:20g抓化铝(AI

5、C1,·6H20)溶于100mL乙醇中3.2.8薄层板:称取4g硅胶G,置于乳钵中加10mL0.5放甲基纤维素钠水溶液研磨至糊状。立即倒人薄层板涂布器内制备成10cmX20cm、厚度。.3mm的薄层板，在空气中干燥后，用甲醇预展薄层板至前沿，吹干，标记方向，在1050C-110℃活化1h，置于干燥器内保存备用。3.2.9ZEN标准储备溶液普告:工凡接触ZEN的容器，需浸人4%次氯酸钠(NaOCI)溶液，半天后清洗备用。2为了安全，分析人员操作时要带上医用乳胶手套。称取适量的ZEN标准品，用甲醇配制成约

6、100pg/mLZEN标准储备溶液。避光，于一5℃以下储存。标定储备液的浓度，用1cm石英比色杯，以甲醇为参比，在ZEN的最大吸收峰波长314nm处，测定吸光度值A。储备液中ZEN的含量(X,)以微克每毫升(1pg/mL)表示，按式(1)计算。GB/T19540-2004AXMX100X,.............·..·..·.一(1)￡XS式中:A-测定的吸光度值;M-ZEN的摩尔质量(M=318g/mol);e-ZEN在甲醇中的分子吸收系数(e=600m'/moD;S—比色杯的光径长度，单位为厘

7、米(cm),3.2.10ZEN标准工作溶液:根据计算的标准储备液的浓度，精密吸取标准储备液(3.2.9)适量，用三氯甲烷稀释成浓度为20pg/mL的标准工作溶液3.3仪器与设备3.3.1小型粉碎机3.3.2电动振荡器。3.3.3薄层板涂布器。3.3.4玻璃器皿:分液漏斗、漏斗。所有玻璃器皿均用稀盐酸浸泡，依次用自来水、蒸馏水冲洗。3.3.5旋转蒸发器:配有200ml心形瓶。3.3.6慢速滤纸。3.3.7展开槽;250mmX150mmX50mm(立式，具磨口)。3.3.8点样器:1lcL-99kL.3.

8、3.9紫外光灯:波长254nm,365n,3.3.10薄层色谱扫描仪:配有汞灯光源3.4试样制备按GB/T14699.1饲料采样方法取得试样，四分法浓缩减取约200g，经粉碎，混匀，装人磨口瓶中备用。3.5分析步骤3.5.1试样处理称取约20g试样(3.4)(精确至0.01g),置于具塞锥形瓶中，加人8mL水和100mL三氯甲烷，盖紧瓶塞，在振荡器上振荡1h，加入10g无水硫酸钠，混匀，过滤，量取50mL滤液于分液漏斗中，沿管壁慢慢地加人氢氧化钠溶液(3