猪生长激素的人工合成

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1、关于人工合成猪生长激素的研究[摘要]针对猪生长激素的性质、用途以及人工合成方法和市场开放状况，本文利用文献计量学的方法，对人工合成猪生长激素进行分析讨论，试图通过统计分析掌握猪生长激素，为养猪产业提供客观依据。 　　[关键词]猪生长激素；PGH；重组腺病毒；人工培养[正文]一：性质和用途：   猪生长激素（piggrowthhormone（PGH）），是由猪脑垂体中的嗜酸性下细菌合成和分泌的一种单链多肽激素，由190个氨基酸构成单链，其分子量22000g/mol。它作为一种特殊的生物活性蛋白分子，不同于食品添加剂

2、中禁用的性激素等有机甾体激素，具有刺激骨及软骨组织生长[1]、调节蛋白质、脂质和糖类代谢的功能，能显著提高猪的生长速度、瘦肉率和饲料报酬[2]（即饲料效率），改善胴体品质；具有明显的经济效益和社会效益。PGH的使用方法是注射，将PGH注射进入猪体内，能够加快猪的生长代谢，使猪在短时间内迅速长大，胴体品质也得到改善。二：人工合成方法：1、PGH基因的克隆：根据GenBank上公布的PGH基因序列（收录号为U19788），设计、合成一对上、下游5’端各含一个BglII酶切位点的引物（P1:5’-TTAGATCTATG

3、GCTGCAGGCCCTCGGACCTCC-3’；P2:5’-TTAGATCTC-TAGAAGGCACAGCTGCTCTCCACAGATCT-3’），以含有PGH基因的质粒pMD18-PGH为模板，经过PCR扩增，回收PGH基因片段后，插入到载体TOPO-PCR2.1Cloning中，构建重组质粒TOPO-PGH。取纯化的重组质粒TOPO-PGH后，用BglII酶切出PGH基因片段，经过一系列操作后腺病毒载体与PGH基因片段连接，用大肠杆菌培养此病毒。根据Hirt的方法[3]抽提腺病毒DNA。2、大量培养重组腺病

4、毒：首先帅选出能生产PGH的接种腺病毒，将病毒接种入293细胞，在适合环境下大量培养293细胞。3、提取所需产物：用感染细胞的裂解液或者细胞培养液做SDS-PAGE电泳分析及WesternBlot检测，检测培养的293细胞中是否有PGH蛋白。电泳能够检测到PGH基因的表达产物占全菌蛋白的百分比。产物以包涵体的形式存在，适合规模化工业生产的需要。筛选出含有重组质粒的病毒之后，包涵体用低浓度尿素（2M）和高pH（12）缓冲液溶解，通过降低pH至8.5进行复性。进一步凝胶层析进行纯化，得到纯度较高的PGH蛋白。附：载体

5、：复制缺陷型重组腺病毒源基因：PGH基因目标基因：重组DNA分子重组腺病毒Ad-PGH培养基：人胚肾细胞HEK-293株PGH的基因片段BglII酶猪生长激素人工培养方法DNA连接酶电泳分析和WesternBlot检测后筛选出含有重组质粒的病毒，并进行提取293细胞在适合环境下大量繁殖初步培养、筛选、提取病毒，接种入293细胞接种重组腺病毒（Ad-PGH）大肠杆菌复制缺陷型重组腺病毒的质粒结果：体外细胞培养的结果表明，重组DNA分子在293细胞中能生物合成分泌的重组PGH蛋白，分子大笑与标准的PGH蛋白相似，而W

6、esternBlot检测结果也证实所表达的重组蛋白为PGH蛋白。这种方法利用价格不昂贵的293细胞培养病毒，而不用价格昂贵且产量不高的大肠杆菌培养。最后能够培养出大量高质量的猪生长激素。三．生长激素的发展前景   有资料表明，PGH一旦大规模应用于养猪业，将会对猪的生产，育种和饲料的调配产生重大的影响。PGH应用于育肥猪生长速度一般都能提高15%-20%，这对生产性能偏低的中国猪种提高的幅度还要更大些。这意味着肉猪将提前一个月出栏，从而加速猪群的周转，减少流动资金的占有，整个改变养猪场的生产计划。应用PGH，按照

7、瘦肉率提高10%，也会改变猪的育种方案和育种目标。如果肉猪屠宰的瘦肉率60%比较适于中国的消费者，就没有必要选择瘦肉率太高的猪种。只要瘦肉率达到50%多的猪种，靠PGH的调节，也会很容易实现60%的胴体瘦肉率。   从经济效益看，PGH可明显提高增重率和饲料报酬率，同时因增加瘦肉率而使其食用价值和商品价值提高，因而增加养猪的效益。   但是，问题是现在人们对转基因生物的不信赖，使得PGH的使用不是很受欢迎，也没有根据说人工合成猪生长激素是完全无害的，所以，PGH使用并不是很广泛。但是如果有足够证据证实人工合成猪生

8、长素对人体无害，则这个问题便迎刃而解了。总之，如果当PGH批准上市后，畜牧业的发展必然出现崭新的局面，人类的生活也必然得到很大的改善。[参考文献][1]RaschkeMJ.Bail.WindhagenHJ.etal.Recombinantgrowthhormoneacceleratesboneregenerateconsolidationindistractionoste