探究:酵母菌种群数量的变化

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1、探究:培养液中酵母菌种群数量的变化探究:培养液中酵母菌种群数量的变化目的要求1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化3、注意样方法的应用4、体会影响种群数量变化的因素1、酵母菌的繁殖方式主要是:2、酵母菌的呼吸方式是:兼性厌氧(可进行有氧呼吸和无氧呼吸)回顾思考:出芽生殖3、酵母菌的培养条件要注意那些问题?比如要用适宜的温度培养,调节好PH值,溶氧量的控制等。酿酒和做面包都需要酵母菌。这些酵母菌可以用液体培养基(培养液)来培养。培养液中酵母菌种群的增长情况,与发酵食品的制作有密

2、切关系。例如:酵母菌的种群数量在营养条件有限的情况下呈“S”型增长。温度、养分会影响酵母菌的生长。探究:培养液中酵母菌种群数量的变化问题培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?温度会影响酵母菌的生长吗?营养成分会影响酵母菌的生长吗?作出假设根据前面所学的知识,针对这一问题作出假设:讨论探究思路探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血球计数板(2mm×2mm方格)、滴管、显微镜等,都由老师提供。在制订计划前,你需要思考以下问题,并与同学讨论。一、怎样进行酵母菌的计数?提示:对一支试管中的培养液(可定为

3、10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的,可以采用抽样检测的方法:先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入,多余培养液用滤纸吸去,稍待片刻,待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部,将计数板放在载物台的中央,计数一个小方格内的酵母菌数量,再以此为根据,估算试管中的酵母菌总数。介绍:血球计数板的构造1、血球计数板:是显微镜上的外挂物件,可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量。血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽,构成三个

4、平台,中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网。化放大后的方格网计数室IHGFEDCBA25×1616×252、方格网的构成:方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,计数室通常有两种规格:一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造,它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。3、使用方法:将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的盖

5、玻片,将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,稍待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内,加盖盖玻片。5、单位换算:以1mm×1mm为例,大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3。换算为1mL:1000/0.1=104即1mL是104个0.1mm3。4、计数室的规格:计数室长×宽有:1mm×1mm,2mm×2mm,3mm×3mm等深度均为0.1mm。如果使用规格为16格×25格的计数室,要按对角方位,取左上、右上、左下、右下4个中格(即100个

6、小格)的酵母菌数。如果使用规格为25格×16格的计数室,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数(五点取样法)。出芽的酵母菌,芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算。6、如何计数呢?规格为25格×16格的计数室,五点取样法7、盖玻片下的培养液厚度为0.1mm,请推算出将一个小方格范围内的酵母菌数,换算成10ml培养液中酵母菌总数的公式。每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式(以1mm×1mm为例):(1)16格×25格的血球计数板计算公式酵母细胞数/ml=(100小格内酵母细胞

7、个数/100)×400×104×稀释倍数即:一小方格内酵母菌个数×4×106×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式酵母细胞数/ml=(80小格内酵母细胞个数/80)×400×104×稀释倍数即:一小方格内酵母菌个数×4×106×稀释倍数课本中大方格的长和宽各为2mm,深度为0.1mm,其体积为0.4mm3。换算为1mL:1000/0.4=2.5×103,即1mL是2.5×103个0.4mm3。则:每1ml菌液中所含的酵母菌个数计算公式(2mm×2mm):(1)16格×25格的血球计数板计算公式酵母细胞数/m

8、l=(100小格内酵母细胞个数/100)×400×2.5×103×稀释倍数即:一小方格内酵母菌个数×106×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=(80小格内酵母细胞个数/80)×400×2.5×103×稀释倍数即:一小方格内酵母菌个数×106×稀释倍数使酵母菌混合均匀。不需要,因不同时间取样已形成对

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