泌尿系统与男性生殖系统药效学研究设计方法

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1、泌尿系统与男性生殖系统药效学研究的设计和方法天马行空官方博客：http://t.qq.com/tmxk_docin；QQ:1318241189；QQ群：175569632第一节急性肾功能衰竭药一、试验设计的医学基础急性肾功能衰竭(简称ARF)是危急重症，属中医“癃闭”、“关格”、“肾风”等范畴。其临床表现主要是小便点滴而下，或点滴全无，起病往往突然发作。治疗乃根据“腑以通为用”的原则，着重于通。实证宜清湿热、散瘀结、利气机而通水道；虚证宜补脾肾、助气化而达到小便自通的目的。改善少尿、氟质血症和肾小管坏死是治疗ARF药效学的主要

2、研究内容。二、药效学研究的实验设计(一)急性肾衰动物模型l常用动物模型(1)大鼠血红蛋白尿ARF模型；以甘油肌内注，24h后即有尿素氮升高，少尿或无尿等类似人的ARF症状。(2)犬去甲肾上腺素模型：雄性犬麻醉以适当的去甲肾上腺素经—侧肾动脉连续滴注，引起肾流量急剧下降，同侧输尿管收集的尿量也相减少等一系列肾衰症状。(3)犬夹闭肾动脉引起的ARF模型：麻醉犬用外科手术暴露肾动脉夹闭1h，引起的缺血性肾功能衰竭。(4)汞剂引起的动物ARF模型：以适当剂量的氯化汞静脉注射家兔，皮下或静脉给大鼠，l—2日引起肾小管损伤，出现急性肾功能

3、障碍的—系列变化。(5)大鼠抗生素ARF模型：大剂量抗生素(庆大霉素)给大鼠腹腔注射，通过影响肾小管上皮细胞膜脂代谢及抑制线粒休的能量代谢，造成肾小管损害，引起尿量改变及尿蛋白和尿素氮升高等急性症状。2观察指标(1)生化指标：①血肌酐(BUN)、血清尿素氮(Scr)水平；②24h肌酐、尿素总排出量；③24h肌酐清除率。(2)尿常规检查：①24h总尿量；②24h蛋白和管型等。(3)病理形态学检查。(4)其他可供分析的指标：①血清总蛋白和白蛋白；②对主要以损害肾小管功能的模型；如庆大霉素ARF模型可选择NAG酶及溶菌酶作为观察指标

4、反映肾小管损伤的严重程度。3，方法学评价(1)ARF模型较多，从机制分为缺血性和中毒性。一般认为大鼠血红蛋白尿性ARF模型二种机制均有，接近于人的创伤性ARF，特别是积压综合征。在此模型早期，肾血管阻力增加，肾血流量减少，肾皮质区域的血管重度收缩，如所试药物可能有类似于异博定的降低肾血管力、增加肾血流量等作用，采用此模型较适当。本模型所用动物价廉易得，方法简便，病变稳定，在—定时间内做动态观察，也可用家兔，以便多次采血检查。此模型是新药药效较常用的模型。(2)家犬去甲肾上腺素及家犬夹闭动脉引起的ARF模型均属缺血性ARF，机制

5、相同，所用动物相同。(3)汞剂引起的ARF属于中毒性ARF模型。特点为简单易行，病变较稳定，用家兔、大鼠、小鼠作模型动物。天马行空官方博客：http://t.qq.com/tmxk_docin；QQ:1318241189；QQ群：175569632(二)相关药效学试验和机制研究1，辅助试验对能反映解除主症有作用的其他试验，如药物的利尿作用、血管扩张作用对高血钾，酸中毒的控制作用，以及药物对其他原因引起的氮质肌症的影响，均可酌情选用。2．作用原理研究如用水清除率、截流分析实验、肾小管微穿刺技术等探时药物作用部位和功能。这研究对了

6、解新药特点很有意义。(三)阳性对照药(1)地塞米松。(2)维拉帕米(异博定)。三、急性肾衰动物模型建立方法(一)大鼠血红蛋白尿ARF模型1．原理肌内注射甘油后，大鼠肾血流减少，肾小管内皮细胞肿胀，增大了肾血管阻力，血管节段性坏死，外膜纤维化．血管自身调节功能丧失，导致肾小球滤过下降。另外，肾小球及肾小管用围纤维蛋白沉积，血臂内血液淤积，血栓形成，血流不畅，导致肾小球滤过率下降，肾小管坏死。2．操作方法采用体重150～250g雄性大鼠，置代谢笼中。纪录正常饮水量从尿量，用药前禁水24h。选体重减轻并有脱水的大鼠以50％甘油按10

7、ml／kg分别在两侧后肢肌内注射.大鼠自由进食和饮水，—般于2h后出现血红蛋白尿，48h形成稳定模型。1—5日内进行实验。3．造模成功指标和药物疗效观察(1)24h尿量较对照组明显减少，尿蛋白明显升高。(2)BUN、Set明显增高，血清总蛋白减少。(3)血清K、Na增高。(4)病理学检杳可见明显的肾小管病变。所试药物的药效可根据用药后对以上指标的改善来评价，结果进行组间比较，统计学处理采用t检验。4．注意点(1)个别大鼠叫在肌注甘油后，肾脏损害过重而北亡。(2)禁水24h后体重减轻明显，脱水严重的大鼠选作实验动物效果较好。(二

8、)犬去甲肾上腺素ARF模型l原理去甲肾上腺素引起肾血管收缩而致肾小球的血流减少，肾小球滤过减少；组织缺血、缺氧加重对肾组织损害从而产生ARF。2．操作方法取10—20kg雄性家犬，以戊巴比妥钠30mg／kg，静脉注射麻醉后，于术分离—侧输尿管，插入管收集尿液。从肾动脉按每分钟