微生物-实验二-细菌的生理分布消毒灭菌

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1、细菌的生理、分布、消毒与灭菌一、细菌的人工培养二、细菌的分布空气中细菌的检测咽拭培养三、消毒与灭菌细菌的人工培养一、常用培养基的制备原则1、培养基的制备原则：①适当的营养成分。②合适的酸碱度。③配制后经灭菌后方可使用。2、培养基配制的基本程序按一定配方称了各种物质→溶解→测定及调整PH→滤过→分装→灭菌、备用。常用培养基的种类1按用途可分为（1）基础培养基：（2）营养培养基：（3）鉴别培养基：（4）选择培养基：（5）厌氧培养基：常用培养基的种类2按物理性状可分为：1）液体培养基2）固体培养基，在液体培养基中加入2~3%琼脂，固体培养基倾倒平皿上即成“平板”倾入试管内即可制成“斜面培养

2、基3）半固体培养基：当液体培养基内加入0.2~0.5%琼脂时即成之。二、细菌人工培养的接种方法：（一）细菌分离培养接种法——平板划线分离培养法目的：使混杂在一起的细菌分散生长。平板区划线法培养后菌落的散布情况一个细菌在固体培养基上，经过一定时间的生长繁殖之后，所形成的肉眼可见的细菌集团，称为菌落。很多菌落连在一起，融成一片，称为菌苔。描述菌落：①大小：以直径（mm）表示之，1mm左右为小菌落，2——3mm为中等大菌落，3mm以上为大菌落。②形成：圆形、卵圆形及不规则形。③边缘：整齐或不整齐、锯齿状、毛发状等。④表面：光滑、湿润、皱纹、干燥等。⑤隆起度：扁平、凸起、中心凹陷等。⑥透明度

3、：透明、半透明、不透明。⑦颜色：无色、白色、黄色等。⑧溶血性：在血平板上产生溶血毒素的细菌，可以使培养基中的红细胞破坏溶解，可分为完全溶血、草绿色溶血及不溶血（二）细菌纯培养接种法目的：测试其生物学性状、保种等。方法：斜面培养基接种液体培养基接种穿刺接种法斜面培养基接种法斜面上生长状态观察：可见有均匀一致的菌苔，如有不同的菌落出现，则表明污染了杂菌。液体培养基接种法液体培养基中生长状态观察：示培养前的液体培养基多为清彻透明的。接种细菌后，由于细菌种类不同，可有以下三种生长形式。①混浊：液体变为混浊。②菌膜：液体澄清，表面有一薄膜。③沉淀：管底有沉淀物。半固体培养基接种方法半固体中生长

4、状态观察：无鞭毛（无运动）的细菌，经培养后仅沿穿刺线生长，培养基清亮。有运动的细菌，沿穿刺线向外扩散，穿刺线摸糊不清，培养基混浊。空气中细菌的检测一、实验目的与原理二、实验材料三、实验方法咽拭培养实验一、实验目的与原理二、实验材料血平板、棉签三、实验方法紫外线的杀菌作用一、实验目的与原理了解紫外线对不同种细菌的杀菌作用及紫外线的穿透力。紫外线的杀菌波长范围为240—280nm，265~266nm的作用最强。其主要是使DNA上相邻的嘧啶通过共价键结合形成二聚体，影响DNA的正常硷基配对。紫外线的穿透力很弱，其杀菌只限于表面的照射。二、实验材料1、菌种：2、培养基：琼脂平板3、纸片、镊子

5、及紫外线灯等三、实验方法1、涂平板。2、打开皿盖，盖纸片。3、紫外线照射30分钟。4、取掉纸片，盖好皿盖，37℃孵育24小时，观察生长情况。皮肤消毒前后的细菌学检查一、实验目的与原理观察消毒剂的消毒效果二、实验材料1、2%碘酒，75%酒精2、琼脂平板三、实验方法细菌对抗生素的敏感性测定一、实验目的与原理了解药物敏感性试验方法及实践中的重要意义二、实验材料1、菌种：金黄色葡萄球菌6—8小时肉汤培养物。2、培养基：普遍琼脂平板。3、抗生素：含各种抗生素干燥滤纸片、小镊子、米尺等。三、实验方法细菌对抗生素的敏感试验（纸片法）四、实验结果抑菌圈细菌对药物敏感时，在该药纸片周围无细菌生长（该区

6、称抑菌环）。细菌对药物不敏感，药纸片周围有菌生长一般认为抑菌环直径6—10mm为低度敏感；10—15mm为中度敏感，15mm以上为高度敏感。