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1、第27卷第2期热带作物学报Vol.27No.22006年6月CHINESEJOURNALOFTROPICALCROPSJun.2006龙眼果实发育过程中内源多胺含量的变化*陈杰忠刘运春叶自行胡又厘冯奇瑞华南农业大学园艺学院广州510642摘要在龙眼果实发育早期(花后5d),幼果中腐胺(Put)、亚精胺(Spd)含量较高,随着果实发育而下降。假种皮开始发育时(花后45d)腐胺、亚精胺含量较高,随后下降。3种游离多胺中,以腐胺含量最高,亚精胺次之,精胺(Spm)含量最低。在果实迅速膨大期,假种皮内游离的腐胺、亚精胺、
2、精胺含量迅速上升,并处在较高的水平。在果皮和种子的快速生长阶段多胺含量亦快速上升。关键词龙眼果实发育内源多胺中图分类号S667.201多胺(polyamines,PAs)是植物体内广泛存在、具有生物活性的低分子量的脂肪族含氮碱。目前国内外对多胺的研究多集中于腐胺(putrescence,Put)、亚精胺(sperdimine,Spd)、精胺(spermine,Spm)的生理作用。大量的研究结果已经证实在果树生长发育的重要时期均伴随着多胺类的相应变化,多胺对果树的[1,2]花芽分化、座果、果实生长发育、抗衰老、抗逆
3、性以及根系形成等方面具有十分重要的生理功能。多胺[3][4]参与果实生长发育进程的报道很多,在苹果、梨、葡萄上的研究结果表明,多胺的含量在果实发育早[5]期含量高,随着发育进程逐渐降低;同时Escribano在柑桔和番荔枝上研究发现,多胺的含量在果实发[6]育初期较高,随着果实的的生长发育而降低,果实成熟期又升高。李建国等认为,多胺广泛参与荔枝的座果以及果实生长发育的整个过程。但至今有关龙眼果实发育过程中内源多胺的变化规律以及内源多胺在果实发育中的作用未见报道。笔者以“石硖”龙眼为试材,追踪果实发育过程中幼果、果
4、皮、假种皮、种子中内源多胺含量的变化动态,探讨多胺在龙眼果实发育中的作用。1材料与方法1.1材料在广州市郊罗岗镇西山农场龙眼园选择长势良好,生长、物候期基本一致的龙眼5株为试材,供试品种为石硖龙眼(DimocarpuslonganLour.cv.Shixia),树龄为7a。根据龙眼枝势、枝粗分别在树冠中上部东、西、南、北4个方向选取1个具有代表性的枝条,挂牌标记。花后5d,座果后能判断大小开始,在挂牌枝条上选取基准果2个,共40个果。中途如有脱落则参照正常果大小的平均值补足,直到果实发育成熟。1.2方法1.2.1
5、样品采集从花后5d,即果实座果后开始采样,参照标记的基准果,每隔10d取样1次。采果后置冰壶带回实验室,用蒸馏水冲洗样品2次,然后用纱布吸干果实表面水分,进行可溶性糖、蛋白质及多胺的分析。1.2.2龙眼果实生长发育动态观察果实鲜、干重的变化:果实座果后,根据标记的基准果的大小,每株龙眼树1次取果15~20个(前期果小取20个,后期果大取15个),用天平称其鲜重,立刻放入烘箱在105℃下杀酶15min,60~70℃烘干至恒重,称其干重,每隔10d取样1次,直至果实采收。落果率的统计:果实座果后,分别统计标记果穗的存
6、留果数,前2次每隔5d,以后每隔10d统计1次,追踪其落果[7]动态,直至果实采收时统计最终座果率。相对落果率(RAR)采用Zucconi的统计方法,公式如下:RAR=(Xt-Xt-1)(/Xt-1×d)陈杰忠男,1958年生,教授,博士生导师。研究方向:果树生理与栽培。E-mail:cjzlxb@163.com*通讯作者收稿日期:2005-01-31修回日期:2006-05-152期陈杰忠等:龙眼果实发育过程中内源多胺含量的变化19Xt和Xt-1分别为每个时期及上一时期的存留果数,d为2次统计之间相隔的天数。果
7、实解剖与观察:同时在以上树上取果实5个,并对各部分组织进行解剖、观察和记录,手绘简单的果实纵切解剖图。1.2.3可溶性总糖的测定参照文献[8],用3,5—二硝基水杨酸比色定糖法(DNS)测定可溶性总糖的含量(%)。1.2.4可溶性蛋白质的测定用考马斯亮蓝G250染色法测定可溶性蛋白质含量(mg/g,FW)。1.2.5多胺含量的测定PAs的提取参照文献[9]的方法。分别称取0.50g果皮、种子,1.00g果肉,用5mL预冷的5%(v:v)高氯酸(HClO4)在冰浴中研磨成匀浆,冰浴中浸提1h,低温下(0~4℃)16
8、000r/min离心20min,收集上清液用于PAs的测定。取PAs的上清液1mL,加入1.0mol/L的NaOH,10μL苯甲酰氯,旋涡振荡20s后置室温下保温30min,然后加入2.0mL饱和NaCl,2.0mL冷乙醚,旋涡振荡20s后在1500r/min下离心5min,收集1.0mL醚相于小试管中,用热空气吹干,剩余物置于-20℃下低温冰箱保存备用。PAs含量测定采
