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1、,第卷水生生物学报,年!∀!采用分裂阻断法研究黄鳝的核型和减数分裂徐晋麟浙江大学生物科学与技术系,杭州潘红春’李光敏安徽大学实验中心,合肥提要,,本实验采用在黄鳝腹腔内注人秋水仙素然后取未成熟性腺进行空气干燥法制片染色,获得了较好的性原细胞有丝分裂中期相,同时还观察到减数分裂阻断后的各期分裂相。并发现黄鳝的第九对染色体在后期提前分离在减数分裂过程中出现多倍性终变期和二倍性不减数细胞,后者为色类多倍体育种提出了新的思路。本实验用性原细胞有丝分裂中期
2、相和联会复合体进行了核型分析,结果与前人研究结果相符。关键词黄鳝,秋水仙素,减数分裂,有丝分裂,联会复合体,核型有关鱼类核型分析的研究,最初采用的方法是先在鱼腹腔内注入秋水仙素,一后,,取肾脏或精巢进行压片观察染色体但未能获得较好的分裂相’直到鱼类淋巴细胞和肾,,’。,细胞培养法建立后才有所突破用细胞培养法虽能获得较好的分裂相但因鱼类的染色体一般较小且数目多,所以长度的度量仍存在较大的误差。近年来采用联会复合体,,。来进行黄鳝核型的研究不仅量度准确而且和有丝分裂核型有很好的吻合性可,,,是用电镜观察不易普及同时的制备常用界面铺展法多
3、用硝酸银染色虽然有的动,,物的着丝粒部位略显膨大如鸟类但鱼类等动物的着丝粒一般不易显现这样就必需同时用培养法制备有丝分裂中期相,用其臂比为参照来推测的着丝粒部位。为了建立一种既简便易行,且效果较好的方法,作者将哺乳动物减数分裂标本的简易,,。制作法移植到鱼类稍加改变取得了十分良好的效果在同一张玻片上既获得了分散,。较好的有丝分裂中期相图版同时义可观察到减数分裂的各个时期图版一通过光镜观察拍摄的粗线期,,,照片就可以较准确地量度进行核型分析并可现为安徽师范大学生物系研究生,李革生曾参加了部分工作谨此致谢年月日收到
4、。期徐晋麟等采用分裂阻断法研究黄鳝的核型和减数分裂同时对减数分裂加以研究。材料和方法。黄鳝叩来源于合肥市场将饲养在水族箱中的黄鳝取出,用纱布包住鱼体,先用碘酒和的酒精消毒腹部皮肤,再用无菌干棉球擦去多余的酒精,然后将秋水仙素表注入腹腔,一后取出解剖,用镊子取出性腺,选择未完全成熟的性腺,放人一个盛有,,,溶液的平皿中用手术刀细细切碎在室温中低渗左右用甲醇一冰醋酸固定,以,,固,离心除去上清液再向离心管内加人
5、定液轻轻打,匀制成悬液。在每张冷冻过的清洁玻片上滴加滴悬液,吹干后用为染,,。“色再用蒸馏水轻轻冲洗晾干后即可镜检这种方法简称为减数分裂阻断”。法表秋水仙素用表!∀鱼体重一一一一一一秋水仙素量一一一一一一结果和讨论,、、。经光镜观察可见到分裂阻断后
6、出现的染色体变化情况图版性细胞的不同步发育在黄鳝性腺中,生殖细胞的发育是不同步的,这和其它鱼类减数分裂不同步的情况是’。,相似的【在一张片子上几乎可以观察到各个分裂期图版一甚至在同一视野中也能观察到几个不同的分裂相图版。正是由于存在这样的先决条件,采用减数分,,裂阻断法才能获得不同分裂期的图象从而可以得到较多的性原细胞有丝分裂中期相和,。清晰的以供核型分析性原细胞有丝分裂的阻断在动物生殖细胞形成的过程中,性原细胞通过有丝分裂进行增殖。从理论上说,若以适当浓度的秋水仙素注人动物体内是可以部分阻断性原细胞有丝分裂的进行
7、,使其停止在中期。本实验证实了这种推测是正确的。作者观察到多个类似于细胞培养法所获得的,,,,,,’”川收缩适中中期分裂相染色单体清晰分布均匀形态较好图版完全可供核。,,,,型分析之用经观察统计黄鳝皆为端着丝粒染色体长度为一群和前。人的结果一致,联会复合体,经光镜观察粗线期的对同源染色体完全联会图版工未发现不配对的异形,,川。,染色体与报道的研究结果一致但如果染色体的非同源节段较短则在上也很,,“”。难观察到即使用电镜观察若非同源少于也观察不到泡状结构由于采
